ラットの小腸を標的とする:上腸間膜動脈への長期注入

ラットの優れた腸間膜動脈のカヌレーションは困難であり、実験モデルとしてはあまり使用されません。この技術により、機能的なカヌル化を行い、動脈内薬物の第一通過作用を有する実験場を開く。この方法は、上腸間膜動脈のカンヌレーションに同意しながら出血および血栓症を回避する。

そして、食べて動くことができる比較的自由な動物の薬物の長期注入を可能にする。腸に活性薬の薬理学的研究は、この技術から大きな利益を得る可能性があります。.薬物の直接単一の通路の効果を研究する代替手段はありません。

大きなカニューレを切ることから始めます。その後、小さなカニューレをカットし、大きなカニューレに1センチメートル挿入します。2つのカニューラをシアノクリレート接着剤と一緒に固定し、ルーメンの閉塞を避けます。

その後、より大きなカニューレの自由な四肢を、生理食塩水で満たされた1ミリリットルのシリンジに取り付けられたルアースタブアダプタに接続します。上の間間膜動脈の枝にカテーテルの挿入を容易にするためにはさみで小さなカニューレの自由な先端を研ぎ澄まします。生理液で洗い流してカニューレの熟愛を確認します。

麻酔下ラットの外科領域から毛皮を剃る, 上の腸間膜動脈またはSMAカニューリンの枝のための腹部を含む, カニューレ出口のための首の後ろ.手術領域を無菌で清掃する。そして、4つの手足を固定するsupineの位置に動物を置きます。

メスの刃を使用して、腹膜にすべての腹部平面を通して、メソ胃領域の正中線にまっすぐ3センチメートルの切開で腹壁を開きます。開いた外科的切開を保つために縫合糸を使用して、開いた外科的切開を維持するために縫合を使用して、腹腔切開の周りに生理液を浸したガーゼを置きます。綿棒を使用して小腸を識別して露出させ、切り出した皮間腸を抽出し、ガーゼの上に下向きに置きます。

脈動を感じることによってSMAを識別する。綿棒を使用して、腸間質脂肪を分離し、SMAとその近位枝の2〜3を明らかにする。Cannulationの外科的な操縦を可能にするのに十分な大きさであるSMAの近位枝を選択してください。

この枝を原点から3〜4センチメートル下流に結び、縫合糸の端部を後で操作するのに十分な長さを保つことによって膨張を可能にします。SMAの枝の下に剛性の支持を置き、鉗子を使用して小さなカニューレの四肢を保持し、縫合端をもう一方の手で引っ張って容器を緊張させ、カテーテルの侵入を容易にする。血管の平面から、血流と反対の方向に20度の角度でカニューレの先端を保持します。

その後、軽く動脈壁を貫通し、カニューレを挿入するために先端を押します。SMAから原点に近い動脈枝に1センチメートルのカニューレの挿入を続ける。外科的結び目でカニューレを動脈に固定し、滅菌生理食塩水の1ミリリットルを洗い流すか、血液サンプリングによって正しい機能を確認します。

首の後部領域に1センチメートルの切開を行い、球状の弁を収容する。次に、皮下組織を通して首に置かれた弁に腹腔を通過させ、カテーテルプラグでカニューレの遠位の端を閉じて空気の流入を避ける。腹腔内の小さな弁を交換し、腹壁を閉じます。

その後、ステッチで次の皮膚にバルブを固定します。ボタンバルブを保護するために、ジャケットでラットをドレスアップ。注入の間に鋼鉄棒でカニューレの露出部分を保護し、弁にそれを固定する。

50ミリリットルの無菌生理食塩水を充填したエラストマーポンプにカニューレの遠位を接続し、24時間注入を進めます。注入後、ラットからポンプ、ジャケット、スチールロッド、バルブを取り外して動物の外部注入システムを分解します。カニューレを首から切り取り、縫合糸を巻いた後、首の皮膚の下に四肢を残します。

本研究では、15匹のラットがこの処置を施し、平均1日の食物および水摂取量は3日後に正常まで徐々に増加した。体重増加も規則的で、観察期間が終わるまで徐々に増加した。24時間後、わずか2つのバルーンポンプに生理的な残留物があり、他の13は完全に空であった。

さらに、輸液期間後、12個のカニューレは血液サンプリングと生理食前注入の両方で依然として機能していましたが、3つのカニューラはもはや特許ではありませんでした。壊死では、カニューレの100%がSMA枝に位置していた。そして、どのラットも腸虚血や腹腔内出血の徴候を持っていなかった。

5匹のラットで、イオドートされた造影剤を腸間膜カニューレに注入して血管造影を得た。腸間膜動脈円、特にSMAとその主要な枝は腹部に広がるコントラスト培地なしで観察され、カニューレがSMAの枝に十分に配置され固定されていることを確認した。特許は、容器の下に縫合を通過し、カニューレを穿刺し挿入するための最も適切な位置を選択する下流の血管の合字をカンニュレートする分岐の細心の注意を払って、このプロトコルの最も重要な側面である。

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