クライオ電子顕微鏡サンプル調製のためのストレプトアビジン-アフィニティーグリッド作製

クライオ電子顕微鏡には、画像の全体的な品質を向上させる顕微鏡ハードウェア自体の進歩や、クライオ電子顕微鏡画像を処理するために使用されるソフトウェアの開発など、近年多くの技術的進歩があり、多くのサンプルに存在する大量の不均一性に対処できるようになりました。サンプル調製は、クライオ電子顕微鏡における最大のボトルネックの1つです。サンプル量は限られている可能性があり、タンパク質はガラス固化中に疎水性の空気と水の界面に吸収される傾向があります。

これにより、サンプルの変性、より大きなタンパク質複合体の分解、およびクライオ電子顕微鏡画像に存在する好ましい粒子配向につながる可能性があります。これらのグリッドは、ストレプトアビジンとビオチンの親和性の高い相互作用を利用して、ビオチン化サンプルをつなぎ合わせ、疎水性の気水界面から保護します。非常に少ないサンプル量で作業でき、サンプルのランダムなビオチン高揚感は、他の担体層を使用する場合に観察される可能性のある優先配向の問題を克服するための戦略を提供します。