신열대성 아누란에서 다양한 규모의 바이오마커를 평가하기 위한 생태독성학적 방법론

요약

이 논문에서는 신열대성 아누란 종의 바이오마커 평가를 위한 표준화된 생태독성학적 방법을 제시합니다. 특히, 이 논문은 유전적, 세포-조직학적, 생화학적, 형태학적 및 개별 수준과 같은 다양한 규모의 생태독성학적 평가에서 여러 방법론을 자세히 설명합니다.

초록

생태독성학의 새로운 질문은 유기체에 대한 환경 스트레스 요인의 영향에 대한 해석뿐만 아니라 가능한 영향의 결정을 개선하는 생태독성학적 예측을 도출하기 때문에 일련의 바이오마커를 적용하는 것의 중요성을 강조합니다. 다양한 조직 수준에서 생태독성학적 바이오마커를 사용하면 환경 스트레스 요인에 대한 유기체의 생물학적 반응을 예측할 수 있으며, 이는 환경 위험 평가에 유용하다는 것은 잘 알려져 있습니다.

그럼에도 불구하고, 관찰된 효과의 특성과 변이를 규명하기 위해 기본 절차의 최적화를 고려하고, 대조군에서 이력 데이터를 생성하고, 장기 및 조직의 반응을 평가하기 위해 특정 생물학적 분석을 사용하는 것이 필요합니다. 따라서 본 연구는 다양한 생태학적 수준에서 신열대성 아누란의 모든 단계에서 사용되는 여러 생태독성학적 방법론을 설명하고 이를 야생 동물과 실험실 조건 모두에서 사용할 수 있는 유용한 바이오마커로 검증하는 것을 목표로 합니다. 이 연구에서 이러한 바이오마커는 개체/유기체 수준(신체 상태 지수), 조직학적/생리학적 수준(조직병리학, 조직통계 및 색소 분석), 생화학적 수준(산화 스트레스 효소) 및 유전적 수준(혜성 분석에 의한 DNA의 직접 및 산화 손상)에서 적용되었습니다.

이러한 방법론은 종에 따라 약간의 변형이나 수정이 있지만, 이러한 기술은 수생 및 육상 생태계의 유용한 지표 종이 되는 특정 특성을 가진 아누란에 대한 생체 이물의 효과를 평가하기 위한 효과적인 바이오마커를 제공합니다. 결론적으로, 본 연구에서 사용된 바이오마커 배터리는 신열대성 아누란의 독성 반응을 추정하는 데 적합한 것으로 입증되었으며, 이 지역의 수생 생태계에 대한 오염 물질의 영향을 식별하기 위한 생물지표로 추가로 권장될 수 있습니다. 마지막으로, 특정 지역의 아누란에 대한 이러한 중요한 바이오마커의 표준화를 달성하고 위험 평가 및 의사 결정에 포함할 수 있도록 하는 것이 권장됩니다.

서문

자연 수역에 환경 스트레스 요인을 입력하는 것은 수생 생태계의 건강에 영향을 미칠 수 있습니다¹. 이러한 환경 스트레스 요인에 대한 노출은 직접 노출(단기 및 장기 ^모두)을 포함한 다양한 독성 메커니즘을 통해 수생 생물의 생존 또는 적합성에 영향을 미칠 수 있습니다2. 따라서 적합성 및 생존과 관련된 독성학적 종점을 평가하기 위한 표준화된 실험실 생물학적 분석은 현장에서 스트레스의 많은 간접적인 영향에 대한 신뢰할 수 없는 추정치일 수 있습니다. 또한, 정상적인 생리적 수준의 변화와 먹이 포획과 같은 개체에 미치는 영향은 유기체의 생존 및 생식 적합성에 미치는 영향, 그리고 궁극적으로 생태계의 건강에 미치는 영향에 대한 더 나은 장기 지표가 될 수 있습니다 ^1,3. 알려진 환경 매개변수와 오염 물질 농도를 기반으로 생태계 구성 및 기능, 유기체 건강의 변화를 예측하는 것은 오염 관리를 개선하는 데 중요합니다¹.

바이오마커는 생체 이종 화학 물질에 대한 ....

프로토콜

다음 기술에는 국제 윤리 기준^46,47,48에 따라 수행 된 동물의 이전 희생과 장기의 후속 해부 및 절제가 포함됩니다. 이 동물들은 San Luis 주 환경, 농업 및 생산부(Ministry of Environment, Agriculture and Production, Resolution 49-PMA2019)의 승인에 따라 포획되었습니다. 동물의 희생 및 안락사 방법은 San Luis 국립 대학의 Institutional Animal Care and Use Committee (CICUA, protocol Q-322/19)의 프로토콜에 의해 정식으로 승인되었습니다. 아누란 유기체를 사용한 절차는 Garber et ^al.46, CONICET⁴⁷ 및 INTA⁴⁸에 자세히 설명된 지침에 따라 수행되었습니다. 또한, 여기에 제시된 모든 프로토콜은 유충 및 성충 생활 단계에 있는 신열대 아누란 종을 위한 것입니다. 그들은 이미 지역 연구자들에 의해 ....

결과

여기에 제시된 모든 바이오마커 기법은 간단하고, 빠르고, 편리하고, 민감하고, 저렴하고, 정확한 방법입니다. 각 바이오마커에 대해 다음 사항에 유의하는 것이 중요합니다.

개인 수준
스케일된 질량 지수
밀리미터 단위로 사진을 찍는 것은 이 값이 소프트웨어를 보정하는 데 사용되기 때문에 매우 중요하며, 이로 인해 .......

토론

개별 수준의 바이오마커는 측정이 매우 간단하고 비용이 매우 저렴하며, 이러한 바이오마커를 검사하는 데 일반적으로 모든 연구 실험실에서 사용할 수 있는 몇 가지 장비만 필요하기 때문입니다. 또한 이러한 바이오마커는 동물의 건강 및 적합성에 대한 일반 정보를 제공합니다. 각 프로토콜에 사용된 동물의 수는 신뢰할 수 있는 결과를 얻는 데 매우 중요합니다. 데이?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Analytical scale
Electrophoresis power supply	Enduro	E0203-250V
Eosin	Merck
Fluorescence photomicroscope	Olympus	BX50	Equipped with an appropriate filter combination
Hematoxylin of Harris	Merck
High resolution photo camera			>16 megapixels
Homogenizer
Horizontal electrophoresis chamber	Sigma
Microcentrifuge	Denver Instrument
Microscope	Leica	DM4000 B	Equipped with image capture system Leica DFC 280
Microtome	Leica	2265
Paraplast	Sigma	P3558
Personal Computer			Eqquiped with Mac OS X, Lynux or Windows
Refrigerated centrifuge
UV–Vis spectrophotometer	Rayleigh	723G	With UV-lamp