저자는 기술 데이빗 브릴즈 (버밍엄, AL, 미국의 앨라배마 대학)에서 조언을 인정하고 싶습니다. 우리는 설명된 실험에 대한 유용한 제안 및 토론 동물 복지에 관한과 윤리 및 간섭 기준 및 인간 끝 지점의 개발을위한 이베트 첸, 멜버른 대학의 동물 복지 담당관, 그리고 데이비드 테일러, 동물 시설 관리자를, 감사하고 싶습니다 이 원고 인치 Odilia Wijburg과 패트 릭 읽기가 NHMRC RD 라이트 원정대에 의해 지원됩니다, 커스티 단기은 GSK 대학원 지원 교부금 및 퍼지 장학금으로 지원됩니다.

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	<li>Brundage, J. F., Shanks, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths+from+bacterial+pneumonia+during+1918-19+influenza+pandemic.">Deaths from bacterial pneumonia during 1918-19 influenza pandemic.</a> Emerg Infect Dis. 14, 1193-1199 (2008).</li><li>Petersdorf, R. G., Fusco, J. J., Harter, D. H., Albrink, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+infections+complicating+Asian+influenza.">Pulmonary infections complicating Asian influenza.</a> AMA Arch Intern Med. 103, 262-272 (1959).</li><li>Diavatopoulos, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influenza+A+virus+facilitates+Streptococcus+pneumoniae+transmission+and+disease.">Influenza A virus facilitates Streptococcus pneumoniae transmission and disease.</a> Faseb J. , (2010).</li><li>Orihuela, C. J., Gao, G., Francis, K. P., Yu, J., Tuomanen, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis.">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J Infect Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li><li>Kadurugamuwa, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+monitoring+of+pneumococcal+meningitis+and+evaluation+of+treatment+efficacy+in+an+experimental+mouse+model.">Noninvasive monitoring of pneumococcal meningitis and evaluation of treatment efficacy in an experimental mouse model.</a> Mol Imaging. 4, 137-142 (2005).</li><li>Smith, M. W., Schmidt, J. E., Rehg, J. E., Orihuela, C. J., McCullers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pro-+and+anti-inflammatory+molecules+in+a+mouse+model+of+pneumococcal+pneumonia+after+influenza.">Induction of pro- and anti-inflammatory molecules in a mouse model of pneumococcal pneumonia after influenza.</a> Comp Med. 57, 82-89 (2007).</li><li>Owen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal-associated+lymphoid+tissue+and+olfactory+epithelium+as+portals+of+entry+for+Burkholderia+pseudomallei+in+murine+melioidosis.">Nasal-associated lymphoid tissue and olfactory epithelium as portals of entry for Burkholderia pseudomallei in murine melioidosis.</a> J Infect Dis. 199, 1761-1770 (2009).</li><li>Luker, G. D., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luciferase+real-time+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+viral+pathogenesis.">Luciferase real-time bioluminescence imaging for the study of viral pathogenesis.</a> Methods Mol Biol. 292, 285-296 (2005).</li><li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases.">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cell Microbiol. 9, 2315-2322 (2007).</li></ol>

이 비디오 문서의 생산은 칼리퍼 생명 과학에 의해 후원되었다.

생체내에서 IVIS 시스템과 이미징은 미생물의 pathogenesis 4, 6-9의 실시간 시각화을 허용하는 독특한 방법이다. 여기, 우리는 S. 사이 synergism을 이해하기 위해이 기술의 응용 프로그램을 표시 유아 마우스의 pneumoniae 및 독감 바이러스. 이 기법의 비침습 특성으로 인해, 우리는 시간이 지남에 따라 각각의 마우스에 감염의 진행을 모니터 할 수있다. 이것은 우리가 공동 보관되어 유아 마우스 세 사이 폐렴 전송의 속도론을 문서에 사용할 수 있습니다. 이 기법의 비침습 자연 실험마다 적은 동물을 사용하는 연구자 수 있으며 따라서 동물의 사용량을 줄일 수 있습니다. 그것은 몸 속에 감염의 이전에 알려지지 않은 사이트로 감염의 보급을 시각화뿐만 아니라 쉽게 해부 (예 : 중간 귀)에 의해 샘플링되지 사이트 IVIS 기계를 사용하는 것도 가능합니다. 이미징 실험을 시작하기 전에, 우리는 발광 생물 EF3030 변형의 식민지 수준은 조직 homogenates에 가능한 개수를 열거하여 부모 EF3030 변형의 식민지 수준을 비교할 수 있다고 밝혔다. 또한, 우리는 먼저 독감 바이러스에 감염이의 nasopharynx의 발광 생물 EF3030 증가 하중 결과 상위 EF3030 변형 (결과가 표시되지 않음)와 시연으로 동물을 식민지 확인. IVIS 기술이 작동하기 쉬운 데이터를 이해하기 쉽게 재현할 생성하지만, 실험은 신중하게 기술의 감도와 유틸리티가 극대화되도록 설계해야합니다. 예를 들어, IVIS 카메라의 감도는 우리의 경험에서, 폐에서 발생하는 발광 생물 신호에 대한 검출 한계를 증가 조직 8의 깊이와 불투명도에 영향을받습니다. 또한, 어두운 모피와 색소 피부가 많은 8 (사나이 답게 마우스에 비해) 10 배 등에 의해 빛의 전송을 줄여줍니다. 이 방법을 개발하는 동안, 우리는 5~14일 된 C57BL / 6 마우스와 함께 사용하기 위해이 프로토콜을 최적화하고 이후 IVIS가 발광 생물 S. 함께 이십일 된 C57BL / 6 마우스의 식민지를 감지하는 데 사용할 수있는 것을 보여준 pneumoniae EF3030. 이러한 실험은 누드 또는 BALB / C 마우스에서 수행하는 경우 그러나, 신호 검출이 증가 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, IVIS 카메라는 새로운 접근 방식, 모니터 특징 궁극적으로 독감 바이러스 감염 다음과 폐렴 구균 질환의 생체내 개발에 이해를 나타냅니다.

using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice

세계적으로 약 50 만명 죽인 1,918 인플루엔자 바이러스 유행 기간 동안 사망자의 대부분은 인플루엔자 바이러스에 혼자와 감염의 결과되지 않았습니다. 대신, 대부분의 개인은 predominately 박테리아 연쇄상 구균 pneumoniae (pneumococcus)에 의한, 보조 세균 감염에 굴복 할 생각입니다. 독감 바이러스와 pneumococcus로 인한 감염 사이의 시너지 관계는 이후 (1, 2 검토)뿐만 아니라 바이러스의 계절 동안 발생으로 1957 아시아 독감 바이러스 유행성 동안 관찰되었습니다. 여기, 우리는 동시에 독감 바이러스와 S.의 결과로 증가 병적 상태에 관여 수있는 메커니즘 (들)을 조사하는 데 사용하는 프로토콜을 설명 pneumoniae 감염. 우리는 안정을 유아 murine 모델을 개발하고 reproducibly S. 함께 식민지 마우스의 독감 바이러스 감염의 효과를 입증했습니다 pneumoniae. 이 프로토콜을 사용하여, 우리는 생체내 이미징 3 사용 공동 위치해, 신생아 생쥐 간의 폐렴 전송의 반응 속도론에 처음으로 통찰력을 제공합니다.

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Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

독감 바이러스에 동시 감염 asymptomatic 동안 침투 폐렴 구균 질환의 유도에 연루 요인 중 하나입니다<em&gt; 연쇄상 구균 pneumoniae</em&gt; 운송. 여기이 두 호흡기 병원균 사이 synergism을 조사하기 위해 유아 마우스를 사용하여 혼합 감염 방법을 설명합니다.

사이 Synergism을 맡은 이후로 발광 생물 이미징을 사용하여 연쇄상 구균 pneumoniae</em유아 마우스에서>와 인플루엔자 바이러스

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

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사이 Synergism을 맡은 이후로 발광 생물 이미징을 사용하여 연쇄상 구균 pneumoniae와 인플루엔자 바이러스