저자는 그녀의 기술 지원을 니나 프레스톤 감사합니다. 이 작품은 미국 심장 협회 (12POST11920023)와 NIH (K23DK088833, K23DK087859)에 의해 지원되었다.

이 프로토콜은 콜로라도 여러 기관 검토위원회 (COMIRB)의 지침을 따릅니다. 테스트 세션 1. 준비 <ol><li> 참가자가 가장 정확한 측정을 위해 이러한 제한을 따라야합니다 : 음식과 카페인 빠른 12 시간을, 운동, 흡연 12 시간의 구속에서 12 시간의 억제는 약물의 적용&gt; 4 반감기 억제는 가능하면 (에 가능하지 않을 수 있습니다 경우 이러한 CKD 환자와 같은 인구), 그리고 폐경 전 여성이 일 호르몬의 영향을 최소화하기 위해 월경주기의 1-7에서 테스트해야합니다. </li><li> 인산 완충 식염수 (PBS)의 476.8 ml로에 2 ㎖ M 0.5의 에틸렌 디아민 테트라 아세트산 (EDTA), 헤파린 (180 USP 단위 / mg)을 0.05 g, 및 소 혈청 알부민 2.5 g을 첨가하여 해리 완충액 500 ㎖를 준비 7.4의 산도. 이것은 몇 달 동안 4 ° C에 저장할 수 있습니다. </li><li> 초음파, 컴퓨터 및 비 침습성 혈역학을 켭니다워크 스테이션 (NIHem, 동맥 강성 장비). 컴퓨터 R-파 트리거 박스에 초음파를 출력 케이블을 연결합니다. </li></ol> 혈관 내피 세포의 2. 수집 및 처리 <ol><li> 훈련을받은 간호사 또는 의사는 수집을 수행 (2.2-2.5, 2.7 단계) 및 연구원 와이어를 수집하고 처리 (2.6, 2.8-2.19 단계) </li><li> , 국소 소독제와 전주 사이트를 예비 학교에 지혈대를 적용, 정맥 찾은 18 G 카테터와 cannulate. IV의 끝에 heplock 어댑터를 놓습니다. </li><li> 멸균 장갑을 착용하고 사이트를 통해 불임의 fenestration 있음을 넣어. </li><li> 커튼에 2 J-선을 배치합니다. 두 전선에서 &quot;J&quot;모양을 풀다하는 &quot;J&quot;의 아크를 당깁니다. </li><li> heplock를 덮개를 벗기다 및 정맥 약 8cm로 J-와이어를 공급. 와이어를 제거하기 전에 앞뒤로 여러 번 누릅니다. 와이어에 심한 혈액을 피하십시오. </li><li> 그들이에 들어갈 수 있도록 전선을 싹둑 전선 절단기를 사용하여해리 버퍼 ~ 30 ㎖를 포함하는 50 ML 원뿔 관 </li><li> 두 번째 와이어 2.5 단계를 반복합니다. </li><li> 두 번째 와이어 단계 2.6를 반복합니다. 젖은 실험실에 튜브를 반환합니다. </li><li> 포셉 한 쌍의 전선을 걸쇠와 관의 내부에 전선을 보유하지만, 상기 용액. 10 분 동안 반복해서 50 ML 원뿔 튜브에서 분리 버퍼를 수집하는 전동 피펫을 사용하고 관에 전선에서 과잉 유동성을 흔들어 다음, 전선을 씻어 진동하는 전선의 길이를 아래로 실행되도록 놓습니다. </li><li> 400 XG에 7 분, 4 ℃에서 원심 분리 </li><li> 100 ml의 포름 알데히드 용액 + 900 ㎖의 PBS를 결합하여 호일 커버 튜브에 포름 알데히드 용액을 준비합니다. </li><li> 천천히, 원심 분리기에서 튜브를 제거하고 진공 펌프를 켭니다, 흡입 호스의 끝 부분에 피펫 팁을 배치하고 펠렛을 방해하지 않고 나머지를 진공 청소기로 청소, 튜브 ~ 400 ㎖에 둡니다. </li><li> 박 및 피펫 1 ㎖ 포름 알데히드 용액에 커버샘플을 해결하기 위해 관. 재현 탁하지 마십시오. 실온에서 10 분 동안 배양한다. </li><li> 제목과 연구 방문 정보 표시와 아빠 펜으로 각각의 슬라이드에 타원을 그려 8 슬라이드를 준비합니다. </li><li> 15 ML 400 XG에서 5 분, 4 ° C.에 대한 PBS,에 resuspend, 원심 분리기 추가 </li><li> 단계를 반복 2.15, 12 ML 400 XG에 6 분 4 ° C.에 대한 PBS,에 resuspend, 원심 분리기를 추가 </li><li> 천천히, 원심 분리기에서 튜브를 제거하고 진공 펌프를 켭니다, 흡입 호스의 끝 부분에 피펫 팁을 배치하고 펠렛을 방해하지 않고 나머지를 진공 청소기로 청소, 튜브 ~ 2 ㎖를 둡니다. </li><li> 균등하게 타원형 지역에있는 8 슬라이드에서 재현 탁 피펫. </li><li> 5 시간 동안 37 ° C에서 다음 (샘플이 몇 년 동안 잘 될 것입니다) 분석을위한 준비가 될 때까지 -80 ° C에서 보관 인큐베이터에있는 장소. </li></ol> FMD BA와 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적 3. 평가 <ol><li> 일회용 팬티에 대한 연구 제목 변경을하고 시간이조용하고, 희미한, 기후 제어 방에서 메신저 / 그녀의 거짓말 부정사. </li><li> 해당 특정 초음파 및 동맥 경화 장치에 대한 ECG의 수 (이 절차는 비 침습성 혈역학 워크 스테이션 [NIHem] 4 전극을 필요로 동맥 강성을 측정하는 데 사용), 그리고 주제에 혈압 커프를 놓습니다. </li><li> 20 분 후, 혈압 판독을 시작한다. 적어도 3을 수행하고 측정이 5 mmHg로 내 때까지 각 읽기 사이에 2 분 휴식, 반복합니다. </li><li> 상완 동맥의 맥박에 대한 부위를 촉진 및 소프트웨어 프로그램을 사용하여 상완 파형을 기록 안압계를 배치하여 안압계를 시작한다. </li><li> , 반경 대퇴 및 경동맥에 대해 반복합니다. </li><li> 줄자 (상완 요골과 경동맥) 및 사용자 정의 자 / 캘리퍼스 (대퇴골)를 사용하여 supersternal 노치에서 각 사이트까지의 거리를 측정한다. </li><li> 소프트웨어 프로그램을 사용하여 경동맥, 상완, 경동맥 레이디 얼, 경동맥 - 대퇴 (대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적)를 계산합니다. </li><li> 장소모드를 트리거하도록 설정 혈관 소프트웨어 주두 처리 및 기록 기준선 상완 동맥 초음파 영상 및 혈액 유속 측정의 적어도 10 심장 사이클 바로 원위 팔뚝 혈압 커프. 기계 팔 원한다면 초음파 프로브를 견고하게하기 위해 사용될 수있다. </li><li> 250 mmHg로에 팔 혈압 커프를 팽창시키고 타이머를 시작합니다. 매우 여전히 남아있는 참가자를 지시합니다. </li><li> 타이머 4:45을 읽을 때 모드를 실행하기 위해 혈관 소프트웨어 세트와 기록 속도를 시작합니다. 트리거는 5시에 커프를 해제하고 시계는 5:10 읽을 때 B-모드 (직경) 이미지를 기록하는 초음파를 변경합니다. </li><li> 시계가 7시 될 때까지 녹음을 계속합니다. </li><li> 모드를 실행하도록 설정 혈관 소프트웨어를 기본 상완 동맥 초음파 영상의 기록을 최소 10 심장주기. </li><li> 피사체의 혈압을 가라. 만약 수축기 혈압&gt; 100 mmHg로, 다 제목하에 설하 니트로 글리세린 0.4 mg의 배치 및# 39;의 혀와 환자가 다른 금기 사항이 없으면, 타이머를 시작합니다. </li><li> 시계 모드를 실행하도록 설정 혈관 소프트웨어와 3시 읽을 때 B-모드 (직경 이미지) 기록을 시작합니다. </li><li> 시계는 8:00 읽을 때 녹음을 중지합니다. </li><li> 이 기준에 반환 될 때까지 혈압을 모니터 </li></ol> 4. 인간 제대 정맥 내피 세포를 준비 (HUVEC) 제어 슬라이드 <ol><li> 통로 5-6 된 HUVEC 성장과 ~ 80 %의 포화 상태. </li><li> 3 트립신의 ML 또는 어떤 요리 / 플라스크에 필요한과를 Trypsinize. </li><li> 트립신 중화 용액 동량을 사용하여 트립신을 중화. </li><li> ~ 5 분 200 XG에 원심 분리기와 진공 청소기를 이용하여 트립신과 중화 솔루션을 제거합니다. </li><li> 씻어 ~ 10 ㎖의 PBS를에 재현 탁. </li><li> 200 XG ~ 5 분 원심 분리기. PBS를 제거합니다. </li><li> PBS를 제거하고 1800 μL PBS + 200 ㎕의 포름 알데히드에 고정합니다. </li><li> PBS (~ 10 ml)에 재현 탁. </li><li> ~ 200 XG에 원심 분리기5 분. 슬라이드 당 ~ 200 μl를 추가 할 수있는 적절한 볼륨 PBS,에 resuspend를 제거합니다. </li><li> -80 ° C에서 보관 슬라이드 분석을위한 준비가 될 때까지 (샘플 몇 년 동안 잘 될 것입니다). </li></ol> 혈관 내피 세포의 5. 염색 <ol><li> -80 ° C의 냉장고에서 슬라이드를 타고 (이 절차는 한 HUVEC 제어 슬라이드를 포함, 10 슬라이드의 배치입니다) 실온에서 5 분을 기다립니다. </li><li> 섬세한 작업 와이프 ​​(슬라이드의 중앙을 터치하지 않음)을 가진 과잉의 물을 닦아. </li><li> 각 슬라이드에 변경 PBS를 추가하여 슬라이드를 다시하는 것은 수화물 10 분을 둡니다. </li><li> 슬라이드 서있는 동안, 5 % 당나귀 혈청 및 기타 솔루션을 준비합니다. <ol><li> 최대 10 개의 슬라이드를 위해 (7.4의 pH로) 변경된 PBS의 5,700 μL에 당나귀 혈청 300 μl를 추가하여 5 % 당나귀 혈청을 준비한다 (더이 양을 증가). </li><li> 5 % 혈청의 1,000 μL에 대한 관심의 기본 항체를 희석. 예를 들어, nitrotyrosine와 NADPH를 위해산화 효소 (1:300과 1:1,500)는 산화 스트레스의 지표로 사용할 수 있습니다. </li><li> 5 % 혈청 1500 μll에 AF568의 5 μl를 희석하여 보조 AF568를 준비합니다. </li><li> 준비의 2 μl를 희석하여 cadherin의 VE 5 % 혈청의 1,000 μL에 카데 린을 VE. </li><li> 5 μl를 희석하여 AF488 준비는 5 % 혈청의 1,000 μL에 카데 린을 VE. </li><li> AF568를 유지, 전체 과정을 통해 포일에서 헤린과 AF488 VE와 슬라이드를 준비하는 동안 다음 4 ° C 냉장고에 로커에 배치합니다. </li></ol></li><li> 재수의 10 분 후, 섬세한 작업 건조 슬라이드를 닦아냅니다. </li><li> 60 분 동안 5 % 당나귀 혈청을 추가하고 화학 물질의 완전한 범위를 보장하기 위해 원으로 지역에 플라스틱 파라핀 필름의 조각을 배치합니다. </li><li> 섬세한 작업과 플라스틱 파라핀 필름 건조 슬라이드를 폐기 닦아냅니다. 세척하지 마십시오. 60 분 동안 차 항체를 추가하고 보장하기 위해 원으로 지역에 플라스틱 파라핀 필름의 조각을 배치화학 물질의 전체 범위. </li><li> 물총 병에서 변형 된 PBS로 세척하고 5 분 동안 슬라이드 열의 흡수, 플라스틱 파라핀 필름을 폐기하십시오. 슬라이드를 적시는 동안, 어두운 방으로 이동합니다. 나머지 모든 단계에 대한 어둠 속에서 작업 할 수 있습니다. </li><li> 킴 와이프 ​​건조 슬라이드, 45 분 AF568 (차 항체)를 추가하고, 화학 물질의 완전한 범위를 보장하기 위해 원으로 지역에 플라스틱 파라핀 필름의 조각을 배치합니다. 빛에서 커버. </li><li> 생물 학적 폐기물 용기의 플라스틱 파라핀 필름을 폐기하십시오. 물총 병에서 변경된 PBS와 린스, 다음 5 분 동안 열을 담가. </li><li> 킴 와이프 ​​건조 슬라이드, 다음, 추가 60 분 cadherin의를 VE 및 화학 물질의 완전한 범위를 보장하기 위해 원으로 지역에 플라스틱 파라핀 필름의 조각을 배치합니다. 빛에서 커버. </li><li> 생물 학적 폐기물 용기의 플라스틱 파라핀 필름을 폐기하십시오. 물총 병에서 변경된 PBS와 린스, 다음 5 분 동안 열을 담가. </li><li> 건조 슬라이드섬세한 작업은 30 분 AF488를 추가하고 화학 물질의 완전한 범위를 보장하기 위해 원으로 지역에 플라스틱 파라핀 필름의 조각을 배치 닦아냅니다. 빛에서 커버. </li><li> 생물 학적 폐기물 용기의 플라스틱 파라핀 필름을 폐기하십시오. 물총 병에서 변경된 PBS와 린스, 다음 5 분 동안 열을 담가. </li><li> 섬세한 작업을 건조 슬라이드를 닦아 슬라이드를 20 분 동안 건조 할 수 있습니다. 빛에서 커버. </li><li> 각 슬라이드에 4 매체를 장착 만 fluoroshield 한 방울 &#39;, 6 diamidino -2 - 페닐 인돌 염산염 (DAPI)을 추가하고 커버 슬립 각을 커버합니다. </li><li> 호일로 덮여 4 ° C 냉장고에 슬라이드를 놓습니다. 영상은 48 시간 이내에 완료해야합니다. </li></ol> 6. 이미징 및 혈관 내피 세포의 분석 <ol><li> 특정 현미경의 사양에 따라 스테인드 내피 세포 이미징을위한 현미경을 준비합니다. 하나의 눈을 멀게 기술자는 박쥐에 특정 단백질을 분석해야세포의 채널. </li><li> 체계적으로 슬라이드를 검사합니다. cadherin의를 VE 및 DAPI에 대한 긍정적 인 염색으로 핵 완전성을 확인하기 위해 긍정적 인 염색에 의해 내피 세포를 식별합니다. </li><li> 나중에 분석을위한 슬라이드 당 이미지 30 세포. HUVEC을 포함, 스테인드 일괄 처리의 각 슬라이드에 대해 반복합니다. </li><li> 질적 인 소프트웨어를 사용하여 그 차 항체에 대한 염색의 강도를 분석합니다. </li><li> 다른 염색 세션, HUVEC에서 동일한 단백질 발현에 수집 된 내피 세포에있는 단백질 발현의 비율로보고 값 사이의 강도 염색의 차이 가능한 혼란 효과를 최소화하기 위해. </li></ol>

저자는 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

FMD BA 및 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적에 대한 정확한 결과를 얻기 각각 높은 품질의 초음파 영상 및 압력 파형을 획득해야합니다. 이 핵심은 운영자 (44)에 의해 각 기술의 적절하고 지속적인 교육 및 사용하는 것입니다. 또, 테스트 세션 (예를 들면, 이전 12 시간 단식, 온도 조절 실 등) (44,45)를 표준화하여 가능한 결과에 영향을 미칠 수만큼 외부 변수에 ...

만성 신장 질환 (CKD)는 단독 1 미국에서 ~ 인구의 11.5 %에 영향을 미치는 전염병 비율에 도달하였습니다 주요 공중 보건 관심사입니다. CKD 환자에서 심혈관 사망 또는 심장 혈관 사건의 위험은 크게 일반 인구의 2 ~ 4에 비해 증가한다. CKD 환자는 기존의 심장 혈관 위험 요소의 높은 유병률을 나타내고 있지만, 이것은 단지 심혈관 질환의 자신의 발생률이 증가 (CVD) 5의 일부를 설명합니다. 혈관 장애는 신장 6-9의 분야에서 증가 인정 받고 중요한 비 전통적인 심혈관 질환의 위험 요인이다. 많은 변화 가능성 동맥 부전의 발전에 기여하는 반면, 큰 관심사들 사이에서 가장 일반적으로 손상된 내피 의존성 팽창 (EDD)로 평가 혈관 내피 기능 장애의 발달, 그리고 LA의 경직 아르RGE 탄성 동맥 10. 다양한 기술 및 EDD 큰 탄성 동맥 경화를 평가하기 위해 존재하지만, 가장 일반적으로 사용되는 각각 상완 동맥 흐름 중재 팽창 FMD BA 및 대동맥 맥파 속도 (대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적)이다. EDD을 평가하기 위해 일반적으로 사용되는 또 다른 기술은 정맥 폐색 혈량 측정법 (plethysmography) (11, 12)을 사용하여 아세틸 콜린 등의 약물 에이전트에 팔 혈류 반응을 측정한다. 그러나,이 방법은 FMD BA보다 더 많은 침략과 CKD 환자에서 금기 할 수있다 상완 동맥의 도관이 필요합니다. 동맥 경화를 평가하기 위해 대체 기술이 널리 이용되거나 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적으로 21 임상 종점으로 확인되지 않지만, 경동맥 동맥 로컬 컴플라이언스 (강성의 역수)를 측정하는 것이다. CKD 환자는 손상 한 FMD BA 14-16 증가 대동맥 맥파 속도 AP를 모두 보여웨스트 버지니아 13,17,18도 전에 투석을 필요로합니다. 중요한 임상 적 관점에서, 혈관 기능 장애의 이러한 비 침습적 조치 모두 CKD 19-21뿐만 아니라 다른 인구 22 ~ 26의 환자에서 모두 미래의 심혈관 사건과 사망률의 독립적 인 예측 인자이다. 이 기술은 CKD 환자 등의 CVD 위험이 다양한 인구를 공부에 적용 할 수 있습니다. 동맥 부전 CKD에서 개발하는 정확한 메커니즘은 불완전하게 이해된다; 그러나, 감소 된 산화 질소 (NO) 생체 이용률은 중요한 기여를 27-30과 장애인 EDD 모두의 일반적인 메커니즘 증가 동맥 경화 10,31입니다. CKD에서, 산화 스트레스가 증가하고, NO 생체 이용률 32-34의 감소에 기여한다. 산화 스트레스는 항산화 방어에 상대적인 반응성 산소 종 (ROS)의 과다 생물학적으로 정의된다. 생리적 인 자극, INC염증 신호를 건의 Luding, 산화 효소 시스템을 촉진 슈퍼 옥사이드 음이온 (O 2 ● -)를 포함하여, ROS를 생산하는 (예를 들면, 산화 효소 NADPH 산화 효소.) 35. 슈퍼 옥사이드의 생산은 궁극적으로 산화 질소 (NO)의 생체 이용률을 감소로 연결됩니다. 내피 기능 장애는 사건의 CKD (36)의 독립적 인 예측대로 손상 NO 생체 이용률은 차례로, CKD의 발전에 기여할 수 없다. 이 동물 데이터 eNOS의 억제는 고혈압 (전신 및 사구체)를 유도하는 것을 나타내는과 일치, 사구체 국소 빈혈, 사구체 경화증 및 tubulo 간질 부상 37. 실제로, NO 생체 이용률이 인간의 CKD (38, 39)의 내피 기능 장애에 대한 중요한 역할을 제안, 인간의 질병을 모방 실험 신장 질환의 개발과 진행에 필요한 나타납니다 감소. 혈관 산화 스트레스의 마커는 V에서 평가 될 수있다원래 콜롬보 등. (40)에 의해 개발 및 씰 등 41-43 수정 기술을 사용하여, 인간의 연구 대상에서 수집 내피 세포를 ascular. 2 멸균 J-선을 사용하여, 세포가 전주 정맥에서 수집, 복구 고정하고, 나중에 긍정적으로 내피 세포로 확인하고 면역을 사용하여 관심의 단백질의 발현을 분석 하였다. 우리는 여기에) 측정 FMD의 BA에 사용할 수있는이 방법에 대한 설명을 제공한다; b)는 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적 측정; C) 산화 스트레스의 마커의 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정합니다. 초점은 만성 투석을 필요로하지 않는, CKD 환자에 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:736px;" width="736">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:109px;">Company</td>
			<td style="width:244px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">J-wire</td>
			<td style="width:109px;">St. Jude</td>
			<td style="width:244px;">404584</td>
			<td>2 per collection</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Disposable shorts (MediShorts)</td>
			<td>Quick Medical&#160;</td>
			<td>4507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Non-invasive hemodynamic workstation (NIHem)</td>
			<td style="width:109px;">Cardiovascualr Engineering</td>
			<td style="width:244px;">N/A</td>
			<td>Includes custom ruler.&#160; An alternate system is the Sphygmocor</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Ultrasound</td>
			<td style="width:109px;">G.E.</td>
			<td>Model: Vivid7 Dimension</td>
			<td>We use a G.E., but there are many companies and models</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Vascular software (Vascular Imager)&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Medical Imaging Applications</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">R-wave trigger box</td>
			<td style="width:109px;">Medical Imaging Applications</td>
			<td>N/A</td>
			<td>custom made</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Rapid Cuff Inflation System</td>
			<td style="width:109px;">Hokanson</td>
			<td style="width:244px;">Model: Hokanson E20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Forearm blood pressure cuff</td>
			<td style="width:109px;">Hokanson</td>
			<td style="width:244px;">N/A</td>
			<td>custom cuff with 6.5 x 34 cm bladder&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">HUVECs</td>
			<td style="width:109px;">Invitrogren&#160;</td>
			<td>C-015-5C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Donkey serum</td>
			<td style="width:109px;">Jackson&#160;</td>
			<td>017-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Pap pen</td>
			<td style="width:109px;">Research Products International</td>
			<td>195505</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">VE Cadherin</td>
			<td style="width:109px;">Abcam</td>
			<td style="width:244px;">ab33168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">AF568</td>
			<td style="width:109px;">Life Technologies</td>
			<td>A11011</td>
			<td>depends on specifications of microscpe&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">AF488</td>
			<td style="width:109px;">Life Technologies</td>
			<td>A11034</td>
			<td>depends on specifications of microscpe&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Nitrotyrosine antibody&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Abcam</td>
			<td>ab7048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">NADPH oxidase antibody</td>
			<td>Upstate</td>
			<td>07-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">DAPI&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Vector</td>
			<td style="width:244px;">H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Delicate task wipe (Kimwipe)&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Fisher Scientific</td>
			<td>06-666-A&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Plastic paraffin film (parafilm)&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Fisher Scientific</td>
			<td>13-374-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Confocal microscope&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Olympus&#160;</td>
			<td>Model: FV1000 FCS/RICS</td>
			<td>many options exist&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular function in patients with chronic kidney disease

만성 신장 질환 (CKD) 환자는 크게 일반 인구에 비해 심혈관 질환 (CVD)의 위험이 증가하고,이 부분적으로 만 기존의 CVD 위험 요인에 의해 설명된다. 혈관 장애는 혈관 내피 기능 장애 (가장 일반적으로 장애인 내피 세포에 의존하는 팽창 [EDD]로 평가)과 큰 탄성 동맥의 경직을 특징으로 중요한 비 전통적인 위험 요소입니다. 다양한 기술이 EDD 큰 탄성 동맥 강성을 평가하기 위해 존재하지만 가장 일반적으로 각각 상완 동맥 흐름 중재 팽창 (FMD의 BA)와 대동맥 맥파 속도 (대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적가) 있습니다 사용. 혈관 장애의 이러한 비 침습적 측정 모두와 신장 질환이없는 환자에서 미래의 심혈관 질환의 독립적 인 예측 인자이다. CKD 환자는 모두 장애인 FMD BA을 설명하고, 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적 증가했다. 반면에 의한 정확한 메커니즘 혈관 부전 deve을CKD에서의 해양 생물이 불완전하게 이해하고, 증가 된 산화 스트레스 및 산화 질소 (NO) 생체 이용률의 후속 감소는 중요한 기여자이다. 산화 스트레스의 세포 변화는 전주 정맥 혈관 내피 세포를 수집하고 면역을 사용하여 산화 스트레스의 마커 단백질 발현을 측정하여 평가 될 수있다. 우리는 FMD BA, 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적, 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정하기 위해 여기에이 방법에 대한 설명을 제공한다.

FMD BA 반응성 충혈 다음 상완 동맥의 직경 피크 변화로 정량화된다. 따라서, 나머지의 직경은 5 분의 혈압 수갑을 폐쇄 기간 (그림 1)의 끝에 다음과 같은 직경과 비교된다. 패널은 상완 동맥의 대표적인 초음파 영상을 보여주고, 상용 소프트웨어를 사용하여 얻은 패널 B는 다음 2 분에 팔 릴리스에서 직경 R-웨이브 게이트 변화의 그래프를 표시합니다. 변화는 (그림 1의</str...

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Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

혈관 장애 및 생리 학적 기전에 기여하는 정도는 상완 동맥 흐름 중재 팽창 대동맥 맥파 속도, 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정함으로써, 만성 신장 질환을 가진 환자에서 평가 될 수있다.

만성 신장 질환 환자에서 혈관 기능의 평가

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

16.1K 조회수.  University of Colorado, Denver.  혈관 장애 및 생리 학적 기전에 기여하는 정도는 상완 동맥 흐름 중재 팽창 대동맥 맥파 속도, 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정함으로써, 만성 신장 질환을 가진 환자에서 평가 될 수있다. 

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Examining the Characteristics of Episodic Memory using Event-related Potentials in Patients with Alzheimer's Disease

Our laboratory uses event-related EEG potentials (ERPs) to understand and support behavioral investigations of episodic memory in patients with amnestic mild cognitive impairment (aMCI) and Alzheimer's disease (AD). Whereas behavioral data inform us about the patients' performance, ERPs allow us to record discrete changes in brain activity. Further, ERPs can give us insight into the onset, duration, and interaction of independent cognitive processes associated with memory retrieval. In patient populations, these types of studies are used to examine which aspects of memory are impaired and which remain relatively intact compared to a control population. The methodology for collecting ERP data from a vulnerable patient population while these participants perform a recognition memory task is reviewed. This protocol includes participant preparation, quality assurance, data acquisition, and data analysis. In addition to basic setup and acquisition, we will also demonstrate localization techniques to obtain greater spatial resolution and source localization using high-density (128 channel) electrode arrays.

Examining the Characteristics of Episodic Memory using Event-related Potentials in Patients with Alzheimer&#039;s Disease

The methodology for collecting high-density event-related potential data while patients with Alzheimer's disease perform a recognition memory task is reviewed. This protocol will include subject preparation, quality assurance, data acquisition, and data analysis.

알츠하이머 병 환자에서 이벤트 관련 후보를 사용하여 에피소드 메모리의 특성을 검토

Our laboratory uses event-related EEG potentials (ERPs) to understand and support behavioral investigations of episodic memory in patients with amnestic ...

연구

의학

Spectral Karyotyping to Study Chromosome Abnormalities in Humans and Mice with Polycystic Kidney Disease

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being analyzed 1, 2. This classical banding technique, however, is not reliable in identifying complex chromosomal aberrations such as those associated with cancer. To overcome the limitations of the banding technique, Spectral Karyotyping (SKY) is introduced to provide much reliable information on chromosome abnormalities.
SKY is a multicolor fluorescence in-situ hybridization (FISH) technique to detect metaphase chromosomes with spectral microscope 3, 4. SKY has been proven to be a valuable tool for the cytogenetic analysis of a broad range of chromosome abnormalities associated with a large number of genetic diseases and malignancies 5, 6. SKY involves the use of multicolor fluorescently-labelled DNA probes prepared from the degenerate oligonucleotide primers by PCR. Thus, every chromosome has a unique spectral color after in-situ hybridization with probes, which are differentially labelled with a mixture of fluorescent dyes (Rhodamine, Texas Red, Cy5, FITC and Cy5.5). The probes used for SKY consist of up to 55 chromosome specific probes 7-10.
The procedure for SKY involves several steps (Figure 1). SKY requires the availability of cells with high mitotic index from normal or diseased tissue or blood. The chromosomes of a single cell from either a freshly isolated primary cell or a cell line are spread on a glass slide. This chromosome spread is labeled with a different combination of fluorescent dyes specific for each chromosome. For probe detection and image acquisition,the spectral imaging system consists of sagnac interferometer and a CCD camera. This allows measurement of the visible light spectrum emitted from the sample and to acquire a spectral image from individual chromosomes. HiSKY, the software used to analyze the results of the captured images, provides an easy identification of chromosome anomalies. The end result is a metaphase and a karyotype classification image, in which each pair of chromosomes has a distinct color (Figure 2). This allows easy identification of chromosome identities and translocations. For more details, please visit Applied Spectral Imaging website (<a href="http://www.spectral-imaging.com/" target="_blank">http://www.spectral-imaging.com/</a>).
SKY was recently used for an identification of chromosome segregation defects and chromosome abnormalities in humans and mice with Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease (ADPKD), a genetic disease characterized by dysfunction in primary cilia 11-13. Using this technique, we demonstrated the presence of abnormal chromosome segregation and chromosomal defects in ADPKD patients and mouse models 14. Further analyses using SKY not only allowed us to identify chromosomal number and identity, but also to accurately detect very complex chromosomal aberrations such as chromosome deletions and translocations (Figure 2).

Spectral Karyotyping (SKY) is an advanced cytogenetics technique to identify genomic and chromosomal aberrations. This technique takes advantage of chromosome painting probes, which allow classification of all chromosomes. SKY can also identify complex chromosome aberrations and segregation defects in mice and humans with various diseases, including polycystic kidney disease.

Polycystic 신장 질환과 함께 인간과 마우스의 염색체 이상을 공부하는 스펙트럼 Karyotyping

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being ...

Utilizing Repetitive Transcranial Magnetic Stimulation to Improve Language Function in Stroke Patients with Chronic Non-fluent Aphasia

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been shown to significantly improve language function in patients with non-fluent aphasia1. In this experiment, we demonstrate the administration of low-frequency repetitive TMS (rTMS) to an optimal stimulation site in the right hemisphere in patients with chronic non-fluent aphasia. A battery of standardized language measures is administered in order to assess baseline performance. Patients are subsequently randomized to either receive real rTMS or initial sham stimulation. Patients in the real stimulation undergo a site-finding phase, comprised of a series of six rTMS sessions administered over five days; stimulation is delivered to a different site in the right frontal lobe during each of these sessions. Each site-finding session consists of 600 pulses of 1 Hz rTMS, preceded and followed by a picture-naming task. By comparing the degree of transient change in naming ability elicited by stimulation of candidate sites, we are able to locate the area of optimal response for each individual patient. We then administer rTMS to this site during the treatment phase. During treatment, patients undergo a total of ten days of stimulation over the span of two weeks; each session is comprised of 20 min of 1 Hz rTMS delivered at 90% resting motor threshold. Stimulation is paired with an fMRI-naming task on the first and last days of treatment. After the treatment phase is complete, the language battery obtained at baseline is repeated two and six months following stimulation in order to identify rTMS-induced changes in performance. The fMRI-naming task is also repeated two and six months following treatment. Patients who are randomized to the sham arm of the study undergo sham site-finding, sham treatment, fMRI-naming studies, and repeat language testing two months after completing sham treatment. Sham patients then cross over into the real stimulation arm, completing real site-finding, real treatment, fMRI, and two- and six-month post-stimulation language testing.

We explore the use of repetitive transcranial magnetic stimulation (rTMS) to improve language abilities in patients with chronic stroke and non-fluent aphasia. After identifying a site in the right frontal gyrus for each patient that responds optimally to stimulation, we target this site during ten days of rTMS treatment.

만성 비 유창한 실어증과 뇌졸중 환자의 언어 기능을 개선하기 위해 반복적 경 두개 자기 자극을 활용

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been shown to significantly improve language function in patients with non-fluent aphasia1. In this ...

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements of homeostasis, integrative animal models are necessary to study development and progression of CKD. To study development of CKD and novel therapeutic interventions in CKD, we use the 5/6th nephrectomy ablation model, a well known experimental model of progressive renal disease, resembling several aspects of human CKD. The gross reduction in renal mass causes progressive glomerular and tubulo-interstitial injury, loss of remnant nephrons and development of systemic and glomerular hypertension. It is also associated with progressive intrarenal capillary loss, inflammation and glomerulosclerosis. Risk factors for CKD invariably impact on endothelial function. To mimic this, we combine removal of 5/6th of renal mass with nitric oxide (NO) depletion and a high salt diet. After arrival and acclimatization, animals receive a NO synthase inhibitor (NG-nitro-L-Arginine) (L-NNA) supplemented to drinking water (20 mg/L) for a period of 4 weeks, followed by right sided uninephrectomy. One week later, a subtotal nephrectomy (SNX) is performed on the left side. After SNX, animals are allowed to recover for two days followed by LNNA in drinking water (20 mg/L) for a further period of 4 weeks. A high salt diet (6%), supplemented in ground chow (see time line Figure 1), is continued throughout the experiment. Progression of renal failure is followed over time by measuring plasma urea, systolic blood pressure and proteinuria. By six weeks after SNX, renal failure has developed. Renal function is measured using 'gold standard' inulin and para-amino hippuric acid (PAH) clearance technology. This model of CKD is characterized by a reduction in glomerular filtration rate (GFR) and effective renal plasma flow (ERPF), hypertension (systolic blood pressure&gt;150 mmHg), proteinuria (&gt; 50 mg/24 hr) and mild uremia (&gt;10 mM). Histological features include tubulo-interstitial damage reflected by inflammation, tubular atrophy and fibrosis and focal glomerulosclerosis leading to massive reduction of healthy glomeruli within the remnant population (&lt;10%). Follow-up until 12 weeks after SNX shows further progression of CKD.

A two-stage method to establish chronic kidney disease (CKD) in the Lewis rat by surgically removing 5/6th of renal mass is described. Combination of the surgical procedure, NOS-inhibition and a high-salt diet leads to a model resembling human CKD, allowing study of causal mechanisms and development of novel therapeutic interventions.

높은 소금 다이어트와 루이스 쥐에서 만성 신장 질환을 유발하는 산화 질소 합성 효소 억제와 함께 5/6th의 절제

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Computerized Dynamic Posturography for Postural Control Assessment in Patients with Intermittent Claudication

Computerized dynamic posturography with the EquiTest is an objective technique for measuring postural strategies under challenging static and dynamic conditions. As part of a diagnostic assessment, the early detection of postural deficits is important so that appropriate and targeted interventions can be prescribed. The Sensory Organization Test (SOT) on the EquiTest determines an individual&#39;s use of the sensory systems (somatosensory, visual, and vestibular) that are responsible for postural control. Somatosensory and visual input are altered by the calibrated sway-referenced support surface and visual surround, which move in the anterior-posterior direction in response to the individual&#39;s postural sway. This creates a conflicting sensory experience. The Motor Control Test (MCT) challenges postural control by creating unexpected postural disturbances in the form of backwards and forwards translations. The translations are graded in magnitude and the time to recover from the perturbation is computed.
Intermittent claudication, the most common symptom of peripheral arterial disease, is characterized by a cramping pain in the lower limbs and caused by muscle ischemia secondary to reduced blood flow to working muscles during physical exertion. Claudicants often display poor balance, making them susceptible to falls and activity avoidance. The Ankle Brachial Pressure Index (ABPI) is a noninvasive method for indicating the presence of peripheral arterial disease and intermittent claudication, a common symptom in the lower extremities. ABPI is measured as the highest systolic pressure from either the dorsalis pedis or posterior tibial artery divided by the highest brachial artery systolic pressure from either arm. This paper will focus on the use of computerized dynamic posturography in the assessment of balance in claudicants.

Individuals with intermittent claudication exhibit poor balance compared to healthy controls. Computerized dynamic posturography is an objective method for measuring an individual's postural responses to balance disturbances. This provides an objective reflection of the person&#x2019;s ability to respond to situations under which sensory stimuli are altered and unexpected perturbations occur.

Computerized dynamic posturography with the EquiTest is an objective technique for measuring postural strategies under challenging static and dynamic ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. Pulmonary Hypertension (PH) was induced in 3-week-old piglets by a progressive obstruction of the pulmonary vascular bed. A ligation of the left Pulmonary Artery (PA) was performed first through a mini-thoracotomy. Second, weekly embolizations of the right lower pulmonary lobe were done under fluoroscopic guidance with n-butyl-2-cyanoacrylate during 5 weeks. Mean Pulmonary Arterial Pressure (mPAP) measured by ritght heart catheterism, increased progressively, as well as Right Atrial pressure and Pulmonary Vascular Resistances (PVR) after 5 weeks compared to sham animals. Right Ventricular (RV) structural and functional remodeling were assessed by transthoracic echocardiography (RV diameters, RV wall thickness, RV systolic function). RV elastance and RV-pulmonary coupling were assessed by Pressure-Volume Loops (PVL) analysis with conductance method. Histologic study of the lung and the right ventricle were also performed. Molecular analyses on RV fresh tissues could be performed through repeated transcutaneous endomyocardial biopsies. Pulmonary microvascular disease in obstructed and unobstructed territories was studied from lung biopsies using molecular analyses and pathology. Furthermore, the reliability and the reproducibility was associated with a range of PH severity in animals. Most aspects of the human CTEPH disease were reproduced in this model, which allows new perspectives for the understanding of the underlying mechanisms (mitochondria, inflammation) and new therapeutic approaches (targeted, cellular or gene therapies) of the overloaded right ventricle but also pulmonary microvascular disease.

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

만성 혈전 색 전성 폐 고혈압과 돼지에서 마우스 오른쪽 심실 기능의 평가

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function in diabetic nephropathy and podocyte-specific VEGF-A knock-out mice; therefore, this protocol describes the full kidney work-up used in our lab to assess these mouse models of glomerular disease, enabling a vast amount of information regarding kidney and glomerular function to be obtained from a single mouse. In comparison to alternative methods presented in the literature to assess glomerular function, the use of the method outlined in this paper enables the glomerular phenotype to be fully evaluated from multiple aspects. By using this method, the researcher can determine the kidney phenotype of the model and assess the mechanism as to why the phenotype develops. This vital information on the mechanism of disease is required when examining potential therapeutic avenues in these models. The methods allow for detailed functional assessment of the glomerular filtration barrier through measurement of the urinary albumin creatinine ratio and individual glomerular water permeability, as well as both structural and ultra-structural examination using the Periodic Acid Schiff stain and electron microscopy. Furthermore, analysis of the genes dysregulated at the mRNA and protein level enables mechanistic analysis of glomerular function. This protocol outlines the generic but adaptable methods that can be applied to all mouse models of glomerular disease.

This protocol describes a full kidney work-up that should be carried out in mouse models of glomerular disease. The methods allow for detailed functional, structural, and mechanistic analysis of glomerular function, which can be applied to all mouse models of glomerular disease.

신장 기능 사 질병 마우스 모델에서의 평가

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...

Interventional Diagnostic Procedure: A Practical Guide for the Assessment of Coronary Vascular Function

Approximately 40% of patients undergoing invasive coronary angiography for investigation of angina are found to have no obstructive coronary artery disease (ANOCA). Abnormal coronary function underlies coronary vasomotion syndromes including coronary endothelial dysfunction, microvascular angina, vasospastic angina, post-PCI angina and myocardial infarction with no obstructive coronary arteries (MINOCA). Each of these endotypes are distinct subgroups, characterized by specific disease mechanisms. Diagnostic criteria and linked therapy for these conditions are now established by expert consensus and clinical guidelines.
Coronary function tests are performed as an adjunctive interventional diagnostic procedure (IDP) in appropriately selected patients during coronary angiography. This aids differentiation of patients according to endotype. The IDP includes two distinct components: a diagnostic guidewire test and a pharmacological coronary reactivity test. The tests last approximately 5 minutes for the former and 10-15 minutes for the latter. Patient safety and staff education are key.
The diagnostic guidewire test measures parameters of coronary flow limitation (fractional flow reserve [FFR], coronary flow reserve [CFR], microvascular resistance [index of microvascular resistance (IMR)], basal resistance index, and vasodilator function [CFR, resistive reserve ratio (RRR)]).
The pharmacological coronary reactivity test measures the vasodilator potential and propensity to vasospasm of both the main coronary arteries and the micro-vessels. It involves intra-coronary infusion of acetylcholine and glyceryl trinitrate (GTN). Acetylcholine is not licensed for parenteral use and is therefore prescribed on a named-patient basis. Vasodilatation is the normal, expected response to infusion of physiological concentrations of acetylcholine. Vascular spasm represents an abnormal response, which supports the diagnosis of vasospastic angina.
The purpose of this practical guide is to provide information on the preparation and administration of the IDP in clinical practice. It discusses some key preparation and safety considerations, as well as tips for procedural success. The IDP supports stratified medicine for a personalized approach to health and wellbeing.

The purpose of this practical guide is to provide information on the preparation and administration of an interventional diagnostic procedure in clinical practice. It discusses some key preparation and safety considerations, as well as tips for procedural success.

중재 적 진단 절차 : 관상 동맥 혈관 기능 평가를위한 실용 가이드

Approximately 40% of patients undergoing invasive coronary angiography for investigation of angina are found to have no obstructive coronary artery ...

Muscle Function Obtained with Motion Mode Ultrasound and Surface Electromyography during Core Endurance Exercise

Motion mode (M-mode) ultrasound allows researchers and clinicians to measure the change of muscle thickness across time. Muscle thickness can be measured between fascial borders at a given time point during an exercise. This selected time point produces a one-dimensional image resulting in real-time, live observation of anatomy. Ultrasound used during functional movement can be referred to as dynamic ultrasound; this is feasible and reliable with the use of a linear transducer, elastic belt, and foam block to secure consistent transducer placement. The lateral abdominal wall is commonly investigated using ultrasound due to the overlapping nature of the muscles. Surface electromyography (sEMG) can complement M-mode ultrasound imaging because it measures the electrical representation of muscle activation. There is minimal evidence using M-mode ultrasound and sEMG simultaneously during core exercise. Exercises that challenge the core musculature involve both isometric holds (e.g., side plank), as well as oscillatory extremity movements (e.g., dead bug). In this study, both instruments will be used simultaneously to measure core muscle function during exercise. Ultrasound measurements will be obtained using a linear transducer and ultrasound unit, and sEMG measurements will be acquired from a wireless sEMG system. To make comparisons between participants and exercises, normalization methods using static, exercise starting positions for both instruments will be used. An activation ratio will be used for ultrasound and calculated by dividing the contracted thickness (thickness during a time point of exercise) by the rested (starting position) thickness. Muscle thickness will be measured in centimeters from the superior inferior fascial border to inferior superior fascial border. These methods aim to offer an innovative and practical measurement of muscle function with M-mode ultrasound and sEMG during core endurance exercises.

This protocol uses motion mode ultrasound and surface electromyography simultaneously to measure muscle function of the core. Muscle thickness and activation of the local stabilizers (e.g., transverse abdominis, internal oblique) and global movers (e.g., external oblique) is achievable during specific time points of the side plank and dead bug exercises.

운동 모드 초음파와 표면 근전도 검사로 얻은 근육 기능 코어 지구력 운동 중

Motion mode (M-mode) ultrasound allows researchers and clinicians to measure the change of muscle thickness across time. Muscle thickness can be measured ...

Acupoint Application Combined with Acupoint Massage for Treating Constipation in a Patient with Chronic Obstructive Pulmonary Disease

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a common and frequent disease in elderly patients, with a tendency for progressive exacerbation. Constipation that reduces the quality of life and triggers the risk of diseases is a common concomitant symptom in patients with COPD. Currently, western medical treatment does not achieve the desired results for patients. A high recurrence rate accompanies it, whereas traditional Chinese medicine (TCM) has a long history and rich experience in treating chronic diseases. Both acupoint application and acupoint massage are characteristic therapies of TCM, with minor side effects, high safety, simple operation, and outstanding advantages. They are effective in treating constipation for patients with COPD and are considered an ideal alternative therapy for patients with chronic constipation. The purpose of this article is to introduce the method of acupoint application combined with acupoint massage for the treatment of constipation in patients with COPD, including the selection of points, items, treatment time, and operation procedure.

Here we demonstrate acupoint application combined with acupoint massage for treating constipation in a patient with chronic obstructive pulmonary disease (COPD).