우리는 인정 하 고 CAH에 의료 연구 위원회 (M01858X/1)에서 자금을 폭발 부상 연구 로얄 영국 군단 센터의 재정 지원을 하 고 싶습니다.

1. 세포 배양 및 샘플 준비 <ol><li>받기 적절 한 셀 라인 (예를 들어, 피부 시 셀). 
	참고: 현재 프로토콜 설계 되었습니다 부착 세포에 대 한 모델로 사용 하는 털에서 고립 된 쥐 피부 시 fibroblasts.</li>
	<li>최소 필수 매체 (MEM) α 10% 태아 둔감 한 혈 청 및 1% 페니실린 스 보충을 포함 하는 T-75 플라스 크에 세포 문화. 80%의 합류를 도달할 때까지 습도 환경에서 37 ° C, 5% CO 2의 표준 문화 조건에서 세포를 유지.</li>
	<li>매체 발음 및 Dulbecco에서 두 번 셀 세척 &#39; s 인산 염 버퍼 식 염 수 (PBS). 트립 신/EDTA 표준 문화 5 분에 대 한 조건 셀 (10 X 객관적 렌즈와 빛/위상 대비 현미경을 사용 하 여 플라스 크에서 성공적으로 해리는 되도록 짧게 확인의 2 mL에 그들을 배양 하 여 플라스 크에서 세포 분열 ).</li>
	<li>는 Trypsinization 반응 중화 문화 매체의 4 mL를 추가 합니다. 15 mL 원심 분리기 튜브에 세포 현 탁 액을 전송.</li>
	<li>원심 분리기에서 200 x g 셀 작은 4 분. 천천히 발음 상쾌한, 펠 릿을 꺼내 려 하지 않도록 주의 복용. 매체의 5 mL에 펠 릿을 다시 중단.</li>
	<li>깨끗 한 hemocytometer 세포 현 탁 액의 약 20 µ L 수 전송 및 10 X 객관적 렌즈를 장착 하는 현미경을 사용 하 여 셀.</li>
	<li>90 mm 접시 안에 3 개의 35mm 요리를 배치 하 여 폭발에 대 한 셀을 준비 합니다. 그들을 적절 하 게 라벨. 각 35 mm 접시 중간의 2 개 mL를 추가 하 고 접시, 접시 주위에 균등 하 게 세포를 배포 당 5 x 10 4 셀의 총 씨. 쇼크 웨이브 노출 첨부 파일 적절 한 셀에 대 한 수 있도록 표준 문화 조건에 하룻밤 실험 샘플을 품 어. 
	참고: 형광 이미징, 셀 해야 합니다 시드할 수 불 임 유리 coverslips에.</li>
</ol> 2. 튜브 어셈블리 충격 <img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55618/55618fig2.jpg" /> 그림 2 : EVOC 장비 및 충격 튜브 어셈블리. EVOC rig의 (A) 이미지. (B) 충격 관 기구의 회로도 충격 관 차원 4.13 m의 EVOC 장비를 포함 하 여 총 길이 59 m m의 내부 직경을 포함 됩니다. EVOC 장비 합계 2.71 m.와 구동된 튜브의 길이 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55618/55618fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol><li>어셈블리 절차 동안 강철 발가락 작업 부츠와 실험실 코트를 착용.</li>
	<li>삽입 2 개의 볼트 구멍을 통해 두 개의 정렬 바 출구 플랜지의 수평 비행기에서 발견. 니트 릴 고무 가스 켓 시트 정렬 막대의 끝 배치 하 출구 플랜지와 비보 전 기관 문화 (EVOC) 장비 사이 앉아. 
	참고: EVOC 장비는 35 mm 페 트리 접시 ( 그림 2A)와 함께 사용 하기 위한 사용자 정의 설계 된 정착 물.</li>
	<li>EVOC 장비 플랜지를 부착 콘센트 충격 관의 정착 맞춤 바, 그것이 방향의 올바르게 섹션 페 트리 접시를 보유 하는 그것의 기초에 보장을 통해 밀어.</li>
	<li>나머지 구멍에 4 개의 M24 볼트와 와셔를 삽입합니다. 그들은 터치 플랜지 너트 위치.</li>
	<li>단단히 고정 볼트와 너트 순차적으로 대각선 대칭 방식에서 EVOC 장비 및 충격 관 성공적으로 정렬는 시각적으로 확인 하는 동안.</li>
	<li>는 EVOC 장비에 압력 트랜스듀서를 연결 하 고 센서 케이블을 사용 하 여 현재 소스에 그것을 연결. 그런 다음 오실로스코프에 전류 소스 연결 BNC 케이블을 사용 하 여.</li>
	<li>확인 모든 밸브 놓고 흐름 컨트롤 충격 관에 폐쇄 됩니다. 내장 외부 압축 공기 라인을 열고 수동으로 압력 레 귤 레이 터 2.5 바에 솔레노이드를 충전을 시계 방향으로 돌려</li>
	<li>반시계 180 ° 선회 하 여 압축된 가스 병에 안전 밸브를 엽니다.</li>
	<li>천천히 압력 레 귤 레이 터, 가스 병 위에 위치한 약 15 바 압력 증가를 시계 방향으로 돌려 
	참고:이 레 귤 레이이 터의 설정 포인트 해야 될 약간 높은 위에 붕괴 실험에 사용할 수 있는 두꺼운 횡 경 막의 압력.</li>
	<li>10 c m x 10 c m 사각형으로 0.125 m m 두꺼운 플라스틱 시트를 절단 하 여는 격 막 준비. 
	참고: 횡 경 막의 두께 (즉, 더 큰 피크 압력; 충격파는 두꺼운 막 귀 착될 것 이다 충격파의 피크 압력 변경 붕괴 압력 연관 됩니다. 표 1).</li>
</ol> < 테이블 fo:keep-together.within-페이지 = "1" > <tbody><tr><td>Mylar 다이어 프 램 크기 (cm)</td> <td>파열 압력 (바)</td> <td>센서 3 압력 범위 (kPa)</td></tr> <tr><td>10 x 10 x 0.023</td> <td>2 ± 0.2</td> <td>47 ± 7.5</td></tr> <tr><td>10 x 10 x 0.050</td> <td>4 ± 0.2</td> <td>72 ± 7.5</td></tr> <tr><td>10 x 10 x 0.125</td> <td>9.5 ± 0.5</td> <td>127 ± 12.5</td></tr></tbody> < /t 수 > 표 1: 다이어 프 램 두께 최대 압력에 압력 해당 버스트.
<ol start="11"> <li>핸들 테이프에서 만들고, 횡 경 막의 상하에 그들을 수정 하 고 신중 하 게 불 감 증 약 실에 의해 전면 작은 플랜지 옆 횡 경 막의 위치를 그들을 사용 하 여. 횡 경 막 인지 확인 직선과 올바르게 위치는 불 감 증을 닫기 전에.</li>
	<li>4 M24 볼트와 너트를 사용 하 여이 보안. 단단히 볼트와 너트를 대각선으로 대칭 패션에 순차적으로 고정.</li>
</ol> 3. 쇼크 웨이브 노출 하기 전에 그냥 셀의 준비 <ol><li>준비 자외선 살 균을 수행 하 여 조직 층 류 두건. 살 균 제 솔루션 및 70% 에탄올으로 그것을 청소. 모든 항목 처리 세포 이전 을/포스트-shock에 필요한 노출을 살 균 후드 내에서 배치할 수집. 
	참고:이 신선한 매체, 포함 접착제 가스 투과성 막, 소독가 위, 펫, 피 펫 팁.</li>
	<li>전송 한 90 mm 페 트리 접시 살 균 후드에 인큐베이터에서 3 개의 실험 샘플을 포함 하.</li>
	<li>접착제 가스 투과성 멤브레인 시트 (테이블의 자료를 참조) 6 사각형으로 각 한 35mm 페 트리 접시의 상단을 충당 하기 위해 충분히 큰 되도록 컷.</li>
	<li>35 mm 페 트리 접시에서에서 매체를 발음, 1 개의 측에 뚜껑 놓고 막와 접시의 가장자리 사이의 단단한 물개 보장 접착제 가스 투과성 막 섹션과 커버.</li>
	<li>EVOC 장비에 샘플을 전송 하 고 되도록 접시 위에 충격 튜브의 내부 자료와 비품의 기지에 확보.</li>
</ol> 4. 튜브 작업 충격 <ol><li>충격 튜브 시스템 가압 귀 수비수, 눈 고글, 안전 부츠, 그리고 실험실 외 투 착용.</li>
	<li>흐름 조절기는 레 귤 레이 터 시계 방향으로 흘러 충격 관에 압축 공기 실린더를 연결 하는 유연한 호스 가스를 수 있도록 설정.</li>
	<li>선택 컨트롤 패널의 하단에는 &#34; 더블 불 감 증 &#34; 짧은 기간 쇼크 웨이브에 대 한 입구e 또는 &#34; 드라이버 튜브 &#34; 증가 웨이브 동안 입구.</li>
	<li>파형 데이터를 얻기 위해 DC 전원 및 오실로스코프에 스위치. 50.0 MS 오실로스코프 샘플링 속도 설정/s, 레코드 길이 1 M의 포인트. 50의 범위를 설정 2 바에서 발사 및 100 mV 4 봉 위에 대 한 mV</li>
	<li>설정 제어판 맞은편 벽에 스위치를 사용 하 여 안전 조명. 
	참고:이 다른 연구자 충격 관 충전 방에 입력 하지 알려줍니다.</li>
	<li>를 닫습니다 솔레노이드 솔레노이드 제어 상자에 스위치를 설정. 
	참고:이 안전 기능은 청구 시스템에 대 한 허용 더블 불 감 증 챔버에 있는 밸브를 닫습니다.</li>
	<li>컨트롤 패널에서 천천히 노브 시계 반대 방향으로 점차 압축 챔버 내의 압력을 증가 하 여 흐름 제어를 엽니다. 컨트롤 패널 디스플레이 사용 하 여 압력 모니터링.</li>
	<li>일단 횡 경 막 파열 압력에 도달 하면, 횡 경 막 파열 됩니다 및 &#34; 뱅 &#34; 들어 있을 것입니다. 신속 하 게 손잡이 선회 하 여 흐름 제어를 닫습니다. 
	참고: 쇼크 웨이브 셀 샘플 및 튜브의 끝에 밖으로 튜브 여행을 합니다.</li>
	<li>솔레노이드 솔레노이드 제어 상자에 스위치를 해제 하 여 열고 (제어판 맞은편 벽에 스위치를 사용 하 여) 안전 라이트 끄고.</li>
	<li>살 균 후드에 셀 샘플을 전송, 접착제 가스 투과성 막 제거 하 고 신선한 성장 매체의 2 mL 접시를 채우십시오. 셀 하거나 사용할 수 있습니다 즉시 평가 5 단계에 설명 된 대로 장기 연구 인큐베이터에 반환.</li>
</ol> 5. 생존 세포 충격파 노출 redox 지표 분석 결과 및 라이브 및 죽은 세포의 형광 이미징의 조합을 사용 하 여 다음 <ol><li>평가 세포 생존 능력. 
	참고: 형광 이미징, 셀 해야 합니다 시드할 수 불 임 유리 coverslips에 섹션 1 동안: 세포 문화와 샘플 준비. 이 35 mm 페 트리 접시 안에 배치 될 수 있습니다.</li>
	<li>전송 200 µ L redox 표시기 시 약의 (테이블의 자료를 참조) 직접 중간 후 충격의 2 mL와 함께 그들을 채우는 후 각 실험 접시 파도 노출. 4 헤에 대 한 표준 문화 조건에 품 어</li>
	<li>각 요리에 대 한 어느 블랙 2 x 100 µ L aliquots (어두운 불 임 후드)에 전송 하거나 96 잘 접시, 형광 또는 흡 광도 생존 능력을 평가 하는 데 사용 됩니다 여부에 따라 취소.</li>
	<li>올바른 필터를 장착 하는 적절 한 플레이트 리더를 96 잘 접시를 전송 하 고 형광 또는 570 여기 밴드 530ex/590em를 사용 하 여 읽을 nm 흡 광도 대 한 600 nm 참조와 결합. 내보내기 및 데이터를 저장.</li>
	<li>분석 데이터 충격파 노출 샘플 및 비 노출 컨트롤 사이의 어떤 차이를이 세포 생존 능력에 한 방울을 나타낼 수 있습니다. 
	참고: 음수 컨트롤 또한 실험 설계에 포함 되어야 합니다. 또한, 표준 곡선의 보간 셀 숫자를 계산에 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>발음 redox 표시기 시 약을 포함 하는 매체. 신선한 매체의 2 mL와 함께 그것을 대체 하 고 품 어 24 h. 표준 문화 조건에 셀</li>
	<li>두 번째 생존 시간 포인트를 필요에 따라 위의 단계를 반복 합니다.</li>
	<li>라이브 및 죽은 세포의 형광 이미징, 매체를 발음 하 고 셀 1 mL의 PBS에 두 번 세척. 전송 100 µ L는 영상에 완전 한 시 약의 각 샘플 (재료의 표 참조) 키트 및 15 분에 대 한 빛에서 보호 하는 실 온에서 품 어</li>
	<li>시 발음 하 고 일단 1 mL의 PBS 사용 하 여 씻어. 좋은 포인트 집게를 사용 하 여 신중 하 게 35 m m 접시에서는 coverslip를 제거 하 고 얼굴-다운 유리 현미경 슬라이드에 배치.</li>
	<li>취득 이미지 (10 X 렌즈, 0.50 숫자 조리개) 형광 현미경을 사용 하 여 각 샘플에 대 한 올바른 여기 및 방출 필터 장착 (ex / em 488 nm/515 nm과 570 nm/602 nm). 
	참고: 라이브 셀 강렬한, 유니폼, 녹색 형광을 방출 합니다. 손상 된 세포 막으로 죽은 또는 죽어가는 셀 것 이다 이해 죽은 키트 구성 요소, 셀의 핵 지역에서 주로 발견 붉은 형광의 방출의 결과로,.</li>
	<li>소프트웨어 중 하나를 수동으로 또는 자동으로 각 이미지에서 라이브 및 죽은 세포의 수를 계산 하는 이미지 분석을 사용 하 여.</li>
</ol>

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</ol>

저자 아무 경쟁 금융 관심사 있다.

폭발 이벤트 노출에서 얻은 기본 상해는 아직 완전히 이해 되지. 4 와 heterotopic 나오고6,7, 개발에 중요 한 첫 번째 단계는 식별 하 고 폭발을 이용한 부상, 외상 성 뇌 부상3,등을 트리거하는 메커니즘을 이해 예방의 효과적인 방법입니다. 이 목표를 달성 하기 위해, 다양 한 실험 시스템 폭발 이벤트 노출11,12,13,,1418,19 복제 하도록 개발 되었습니다. . 설명 하는 기술은 여기 충격 관 장비 (그림 2) 전체-바디 (즉, 설치류), 조직, 또는 셀 샘플에서 압력의 범위에 충격파를 발사 능력을 사용 합니다. 전체 조직 보다는 오히려 개별 셀 형식을 로드 하는 기능 손상 메커니즘1,2의 범위를 통해 동시에 발생할 수 있습니다 뚜렷한 세포 응답을 구문 분석 하는 기능을 제공 합니다. 예를 들어 외상 성 모델에 뇌 손상, 신경 등 이다, 개별 세포 유형의 평가 셀 전용 상해의 식별에 대 한 허용할 수 있습니다. 또한, 전체 기관 응답 뇌 조직을 사용 하 여 평가 될 수 있다. 개별 세포 유형 및 조직 표본 값 있고 다른 정보를 제공할 수 있습니다. 그것은 또한 이중 불 감 증 또는 드라이버-튜브 입구를 선택 하 여 충격을 생성 하기 위해 가압 공기의 양을 변경할 수 있습니다. 이 충격파의 기간을 제어합니다. 또 다른 가능성 격 막 물자 및 피크 압력25를 변경 하려면 두께 변경 하는.
고려해 야 할 또 다른 요소는 샘플 주택 등 현재 시스템에 설명 된 EVOC 장비에 있는 충격 관의 출구 근처에 있을 때 있을 수 있는 방해 끝 효과입니다. 찬드라 외. 폭발 웨이브 프로 파일 압축 기반 충격 관에 서로 다른 위치에서 발견 하 고 프리 파형 위치 깊은 충격 튜브15시간에 최고의 표현 했다 발견을 보았다. Kuriakose 외. 또한 샘플의 보조 로드를 공부 하 고 충격 튜브의 끝에 엔드 플레이트의 배치 제거 원치 않는 반사 파도16수 있었다 발견. 데이터를 고려 하 고 있는 이러한 간행물15,16이 문서에서 설명 하는 충격 튜브 시스템을 개선 하기 위해 향후 수정 EVOC 장비 구동된 관 내의 더 깊은 위치에 배치를 포함할 수 있었다, 또는, 충격 관에 엔드 플레이트의 포함. 설명된 방법의 한계는 샘플의 상대적으로 낮은 처리량을 포함할 수 있습니다. 단일 사용자의 출력을 주위에 안전 하 게 충격 관을 운영할 수 있다 시간 당 6-8 샘플. 현재, 시스템은 단일 35 mm 페 트리 접시의 사용 주위 설계 되었습니다. 따라서, 여러 그룹 및 생물 복제를 포함 하는 큰 실험 달성 하기 어려울 수 있습니다.
이 방법 문서에서는 어떻게 부착 피부 시 세포의 생존 능력은 단일 충격파에 노출에 의해 영향을 합니다. 짧은 기간 충격파 (&#60; 10 ms) ≤72의 kPa 미치지 않았다 생존 컨트롤 (그림 3 및 그림 4)에 비교 될 때. 반면, 127 kPa에서 쇼크 웨이브 둘 다 redox 지표 분석 결과 (그림 3) 및 형광 이미지 분석 (그림 4)와 같이에서 24 시간 후, 생존 능력에 상당한 드롭 자극. 세포는 중에 노출 됐다 때 밀러 그 외 여러분 쥐 organotypic hippocampal 슬라이스 문화에서 세포 생존 능력에 유사한 감소를 보고 147 kPa 또는 278 kPa 충격파 오픈, 헬륨 구동 충격 튜브14를 사용 하 여. VandeVord 그 외 여러분 의 짧은 기간 압력에 노출 된 쥐 이다에서 생존 능력에 영향을 주지는 보고 하는 반면, &#62; 200 kPa는 barochamber 충격 관18대신 사용 되었다. 따라서 로드의 성격 조직 또는 세포의 기계적 특성에 매우 의존 하는 신체 내에서 복잡 한 스트레스 파도 만들지만이 외부 압력은 폭발 파에 의존을 주목 한다. 폭발 이벤트에 세포질 응답의 추가 특성 연구는 필요 합니다. 또한,이 기술은 같이 세포 수준에서 충격파 노출 평가, 하 여 생물학 응답 신호 경로 또는 epigenetic 변화의 섭 동 등 부상에서 트리거 식별 고 더 탐험.
결론적으로,이 작품 스테인리스 충격 관 및 1 차 셀 문화를 통합 하는 수정 된 EVOC 장비를 사용 하 여를 설명 합니다. 압력의 범위에 충격파 생성 하 고 폭발 파에 노출에서 발생 하는 효과 복제 하려면 라이브 셀 통해 전파 수 있습니다. 이 프로토콜, 세포 생존 능력을 평가 하는 방법을 설명 하지만 개별 셀 형식에 장기 변화 또한 공부 될 수 있다. 앞으로 복잡 한 충격파 폭발 유도 주 부상에 대 한 우리의 이해를 발전의 목표와 더불어 다른 세포 유형으로 이끌어 낼 수 있습니다 차동 효과 평가 계획입니다.

현대 전쟁 및 민간인에 테러 작업에서 즉흥적으로 폭발 장치를 사용 하 여 최근 트렌드, 중요성은 인간의 신체에 폭발적인 이벤트의 효과 이해 합니다. 폭발 이벤트에 노출을 통해 얻은 부상 치명적인 치명적인 부상의 4 개의 종류로 분할 되 고 실제 프로세스와 수 있습니다. 압축 하 고 연속적으로 광대 한 방식으로, 막과 부드러운 조직1의 장애를 일으키는 시체와 로컬 상호 작용 하는 폭발 파에 직접 노출에서 기본 부상 결과입니다. 2 차 부상 무뚝뚝한 외상 또는 침투 상처 충격으로 폭발 파에 의해 빠른 속도로 추진 하는 낮은 질량 개체와 함께 포함 됩니다. 3 차 부상 폭발 파에는 충분 한 에너지를 높은 질량 또는 개체에 대 한 개인의 개체를 던 질 때 발생 합니다. 마지막으로, 제 사기 폭발 부상 플래시 화상2같은 다른 범주에 맞지 않는 다른 기타 부상에 의해 정의 됩니다. 이러한 폭발 이벤트에 노출, 다음 주 부상 외상 성 뇌 부상3,,45, heterotopic 나오고6,7, 폭발 폐 상해8, 청각의 손실을 포함 9, 등10.
폭발 이벤트에서 일반적으로 관찰 된 파형은 프리 파, 대표 하는 무료-필드는 동봉 하는 공간, 반대로 폭발 이다. 긍정적인 압력에 샤 프 하 고 급속 한 상승으로 정의할 수 있는 폭발 전면 파형에 의하여 이루어져 있다. 이것은 높은 속도 대기 수준에 압력을 감소 시키는 릴리스 물결에 움직이는 공기의 돌풍 바람에 즉시 선행 된다. 부분적인 진공은 공기의 느린 역류 발생 초기 폭발의 지역에 남아 있습니다. 파도 (그림 1A)의 긍정적이 고 부정적인 단계 폭발 파도1푸시 풀 운동의 결과. 기본 폭발 부상 뒤에 메커니즘을 명료 하 게 하기 위해, 실험 모델 파형, 프리 파, 세포와 조직 것 이다 얼굴 진짜 폭발 이벤트에 노출 등을 생산 하기 위해 생성 되었습니다. 문학에서 나열 된 현재 시스템 포함 충격 관11,12,13,14,15,,1617, barochambers18,19, Kolsky 바20, 고급 폭발 시뮬레이터21, Split Hopkinson 압력 바22, 그리고 다른 폭발 이벤트 사용 하 여 통제 된 환경에서의 휴양 pentaerythritol tetranitrate23. 사용할 수 있는 모델의 광범위에도 불구 하 고 많은 변수 영향, 적용 전 스트레스를 포함 하 여 폭발 파도 개별 세포 유형 또는 조직 평가24에서 기계적 성질에서 얻은 부상. 조직 또는 장기의 연구 조직 변형 및 폭발 사건의 결과로 지속 심한 형태학 변화에 설명 해 주실 수 있습니다, 하는 동안 세포 수준에서 분석 transcriptional epigenetic 변화는 충격파에 의해 영향을 파악할 수 있습니다.
이 방법 문서는 단층에 라이브 셀 통해 압력의 범위에 충격파를 전파 하는 기법을 설명 합니다. 세포 생존 능력, 충격에서 잠재적인 손상 임계값 elucidating 즉각적인 특성에 대 한 수 있습니다. 또한, 가능한 셀 표준 문화 조건에 반환 될 수 있습니다 그리고 폭발 이벤트에서 장기 생물 학적 효과 평가할 수 있습니다. 프로토콜 아래 문화 셀에 사용할 수 있는 두 가지 셀 생존 방법을 설명 합니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55618/55618fig1.jpg"> 
그림 1: 프리 웨이브의 근사. (A) 충격 관에 센서 3에서 프리 웨이브의 근사. (B) 대표 데이터 센서 1, 2, 및 충격 관에 3에서 다른 압력 프로필을 게재. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55618/55618fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

<table><tbody><tr><td>MEM &amp;alpha;, nucleosides</td><td>ThermoFisher</td><td>22571020</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum, certified, US origin</td><td>ThermoFisher</td><td>16000044</td><td>Supplement to create complete growth media.</td></tr><tr><td>Dulbecco&amp;rsquo;s Phosphate Buffered Saline</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin&amp;nbsp;</td><td>ThermoFisher</td><td>15070-063</td><td>Supplement to create complete growth media.</td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA (0.5%), no phenol red</td><td>ThermoFisher</td><td>15400-054</td><td>Dilute 1 in 10 before use.</td></tr><tr><td>CytoOne T-75 Flask, TC-Treated, vented</td><td>Starlab</td><td>CC7682-4875</td><td></td></tr><tr><td>TC Dish (PS) 35 mm, 8.5 cm&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt;</td><td>Triple Red</td><td>TCD010035</td><td></td></tr><tr><td>Petri dish (PS) 90 x 14.2 mm no vent</td><td>VWR UK</td><td>391-0453&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Gas Permeable Adhesive Plate Seals</td><td>ThermoFisher</td><td>AB-0718</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEAD Cell Imaging Kit (488/570)</td><td>ThermoFisher</td><td>R37601</td><td></td></tr><tr><td>Alamarblue cell viability reagent</td><td>Fisher Scientific</td><td>13494309</td><td></td></tr><tr><td>Virkon tablets</td><td>VWR UK</td><td>115-0020</td><td>Use to create 2% solution as viability control reagent.</td></tr><tr><td>Dumont forceps</td><td>SurgicalTools</td><td>11295-10</td><td>Use to remove coverslips from petri dish.</td></tr><tr><td>Cover glass, square</td><td>VWR UK</td><td>631-0125</td><td></td></tr><tr><td>Microscope slides</td><td>VWR UK</td><td>631-1553</td><td></td></tr><tr><td>96 Well plate, solid black</td><td>AppletonWoods</td><td>CC760</td><td>Plate to be used for fluorescence measurements.</td></tr><tr><td>96 Well plate, clear, (PS)</td><td>VWR UK</td><td>734-1799</td><td>Plate to be used for absorbance measurments.</td></tr><tr><td>Leica DMi1 Camera stand outfit</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>Optical microscope used for cell culture.</td></tr><tr><td>Zeiss PALM MicroBeam Laser Capture Microdisseciton</td><td>Zeiss</td><td></td><td>Fluorescence microsope used for LIVE/DEAD imaging.</td></tr><tr><td>EnVision Multilabel Reader</td><td>PerkinElmer</td><td>2104-0010A</td><td>Plate reader to be used for fluorescence/absorbance readings.</td></tr><tr><td>Mylar Electrical &amp;amp; Chemical Insulating Film, 304 mm x 200 mm x 0.023 mm&amp;nbsp;</td><td>RS Components</td><td>785-0782</td><td>Use to create shock tube diaphragm.</td></tr><tr><td>Mylar Electrical &amp;amp; Chemical Insulating Film, 304 mm x 200 mm x 0.05 mm&amp;nbsp;</td><td>RS Components</td><td>785-0786</td><td>Use to creatw shock tube diaphragm.</td></tr><tr><td>Mylar Electrical &amp;amp; Chemical Insulating Film, 304 mm x 200 mm x 0.125 mm&amp;nbsp;</td><td>RS Components</td><td>785-0798</td><td>Use to create shock tube diaphragm.</td></tr><tr><td>Current source power unit</td><td>Dytran Intruments Inc.</td><td>4103C</td><td>Power source for 2300V1 sensor.</td></tr><tr><td>IEPE Pressure Sensor</td><td>Dytran Intruments Inc.</td><td>2300V1</td><td>Pressure sensor located on shock tube.</td></tr><tr><td>Digital Phosphor Oscilloscope</td><td>Tektronix</td><td>DPO 4104B</td><td>Use to gather and save sensor 2300V1 data.</td></tr></tbody></table>

evaluating primary blast effects in vitro

폭발 이벤트에 노출은 폐, 귀, 뇌 등 중요 장기에 심각한 외상을 일으킬 수 있습니다. 같은 폭발 유도 상해 뒤에 있는 메커니즘을 이해 하는 것입니다 현대 전쟁 및 테러 관련 사건에 폭발물의 사용으로 최근 추세를 고려 하는 매우 중요. 폭발 유도 상해를 완전히 이해 하려면 우리 먼저 재현할 수 방법을 사용 하 여 통제 된 환경에서 이러한 폭발 이벤트를 복제 하 수 있을 해야 합니다. 충격 관 장비를 사용 하 여이 기술을, 압력의 범위에 충격파는 라이브 셀 2d, 성장에 전파 될 수 그리고 산화 환 원 지표 분석 결과 및 라이브 및 죽은 세포의 형광 이미징 사용 하 여 세포 생존 능력의 마커를 즉시 분석 될 수 있다. 이 메서드는 컨트롤 치료에 비교 될 때 세포 생존 능력에 상당한 드롭 자극 127 kPa 최대 폭발 압력을 증가 입증. 테스트 샘플 부착 세포에 국한 되지 않습니다 하지만 셀 정지, 포함 될 수 있습니다 전체-바디와 조직 샘플, 충격 관 설치에 사소한 수정. 조직 및 세포 경험 진짜 폭발 이벤트에 노출 되 면 정확한 상태를 복제 하는 것은 어렵습니다. 이 문서에서 제공 하는 것과 같은 기술을 손상 임계값을 정의 하 여 충격파 노출에서 발생 하는 세포 내에서 transcriptional epigenetic 변화를 식별 수 있습니다.

위에서 설명한 방법을 사용 하 여, 세포는 단층에 성장 3 중 충격 관 (그림 2B)를 사용 하 여 생성 충격 파도에서 노출 되었다. 세포 생존 능력의 마커 평가 됐다. Redox 지표 분석 결과 사용 하 여, 127 kPa 충격파의 응용 문화 (그림 3)에서 24 시간 후 컨트롤에 비해 피부 시 세포의 생존 능력을 크게 줄일 수 있었다 발견 했다. 쇼크 웨이브 ≤72 kPa의 응용 프로그램 생존 능력을 감소 하지 않았다. 이러한 관측을 지원 하기 위해 각각, 녹색 또는 빨간색 fluorophores, 라이브 또는 죽은 세포를 라벨 붙일 수 있는 형광 이미지 분석 결과 사용 되었다. 생물 복제 당 13 형광 이미지에서 라이브 및 죽은 세포의 정량화 컨트롤 (그림 4)에 비해 127 kPa 충격파에 노출 된 사람들에서 세포 생존 능력에 있는 감소를 설명 했다. 통계 분석 뒤에 p와 Tukey의 다중 비교 테스트, 일방통행 ANOVA를 사용 하 여 실시 되었다 &#60; 0.05 통계적으로 유의 한 것으로 간주. 그룹 당 샘플 크기 redox 지표 분석 결과 대 한 9 및 양적 형광 이미징 분석에 대 한 39 합쳐집니다.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55618/55618fig3.jpg"> 
그림 3 : 산화 환 원 지표 분석 결과 데이터의 시간 과정을 보여주는 세포 생존 충격파 노출 후. 상당히 적은 세포는 127-kPa 충격파 노출 그룹에서 치료 컨트롤에 비해 24 시간 후 관찰 되었다. 30의 치료 2%를의 구성 되어 부정적인 제어 살 균 제 t 0와 모든 다른 그룹에 비해 24 시간에서 현저 하 게 몇몇 세포를 보여주었다 (재료의 표 참조). 각 막대가 나타냅니다 평균 ± 1 표준 편차 (SD); 생물 복제, N = 3; 기술 복제, n = 3. p = &#60; 0.0001. p를 = &#60; 0.05. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55618/55618fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55618/55618fig4.jpg"> 
그림 4 : 형광 이미징. (A) 양적 데이터 24 h 후 충격파 노출에서 형광 현미경을 사용 하 여 캡처한 라이브 및 죽은 세포의 형광 이미지에서 수집. 상당히 적은 가능한 셀 127 kPa에서 관찰 되었다 (의미 = 93.42) 47 kPa에 비해 충격파 노출 샘플 (의미 98.18 =), 72 kPa (의미 98.87 =), 그룹을 제어 하 고 (의미 99.10 =). 실행 가능한 셀 24 h 후 부정적인 제어 그룹에 관찰 되었다 (뜻 = 0). (B) 대표 형광 이미지입니다. 그린 레드 죽은 세포를 표시 하는 동안 라이브 셀을 표시 합니다. 각 상자 그림 표시 Tukey 수염;와 함께 상위 및 하위 quartiles 생물 복제, N = 3; 기술 복제, n = 13. p = &#60; 0.0001. 눈금 막대 = 300 µ m. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55618/55618fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

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Evaluating Primary Blast Effects In Vitro

셀 충격파에 노출에 의해 변조는 어떻게 이해는 폭발 이벤트에서 발생 하는 부상 뒤에 메커니즘을 식별 하는 것을 도울 수 있다. 이 프로토콜 사용자 충격 관 장비를 사용 하 여 셀 monolayers에 압력의 범위에 충격파를 적용할 세포 생존 능력에 후속 효과 확인.

평가 기본 폭발 효과 체 외에

Exposure to blast events can cause severe trauma to vital organs such as the lungs, ears, and brain. Understanding the mechanisms behind such ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Evaluating Primary Blast Effects In Vitro

8.0K 조회수.  Imperial College London. 셀 충격파에 노출에 의해 변조는 어떻게 이해는 폭발 이벤트에서 발생 하는 부상 뒤에 메커니즘을 식별 하는 것을 도울 수 있다. 이 프로토콜 사용자 충격 관 장비를 사용 하 여 셀 monolayers에 압력의 범위에 충격파를 적용할 세포 생존 능력에 후속 효과 확인.

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Blast Quantification Using Hopkinson Pressure Bars

Near-field blast load measurement presents an issue to many sensor types as they must endure very aggressive environments and be able to measure pressures up to many hundreds of megapascals. In this respect the simplicity of the Hopkinson pressure bar has a major advantage in that while the measurement end of the Hopkinson bar can endure and be exposed to harsh conditions, the strain gauge mounted to the bar can be affixed some distance away. This allows protective housings to be utilized which protect the strain gauge but do not interfere with the measurement acquisition. The use of an array of pressure bars allows the pressure-time histories at discrete known points to be measured. This article also describes the interpolation routine used to derive pressure-time histories at un-instrumented locations on the plane of interest. Currently the technique has been used to measure loading from high explosives in free air and buried shallowly in various soils.

This protocol details the use of Hopkinson pressure bars to measure reflected blast loading from near-field explosive events. It is capable of interpolating a pressure-time history at any point on a reflective boundary and as such can be used to fully characterize the spatial and temporal variations in loading produced.

폭발 정량화는 홉 킨슨 압력 막대를 사용하여

Near-field blast load measurement presents an issue to many sensor types as they must endure very aggressive environments and be able to measure pressures ...

연구

공학

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) in vitro exposure systems are often large and bulky, making transport to the field and operation at the source of emission or within the breathing zone difficult. Through miniaturization of these systems, the lab can be brought to the field, expediting processing time and providing a more appropriate exposure method that does not alter the aerosol prior to contacting the cells. The Portable In vitro Exposure Cassette (PIVEC) adapts a 37 mm filter cassette to allow for in vitro toxicity testing outside of a traditional laboratory setting. The PIVEC was characterized using three sizes of copper nanoparticles to determine deposition efficiency based on gravimetric and particle number concentration analysis. Initial cytotoxicity experiments were performed with exposed lung cells to determine the ability of the system to deposit particles while maintaining cell viability. The PIVEC provides a similar or increased deposition efficiency when comparing to available perpendicular flow in vitro exposure devices. Despite the lower sample throughput, the small size gives some advantages to the current in vitro ALI exposure systems. These include the ability to be worn for personal monitoring, mobility from the laboratory to the source of emission, and the option to set-up multiple systems for spatial resolution while maintaining a lower user cost. The PIVEC is a system capable of collecting aerosols in the field and within the breathing zone onto an air-interfaced, in vitro model.

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

Here, we present a protocol to perform portable cellular aerosol exposures and measure cellular response. The method uses cells, grown at the air-liquid interface, mimicking in vivo physiology. Cellular response to copper nanoparticle aerosols was observed as oxidative stress through reactive oxygen species generation and cytotoxicity as lactate dehydrogenase release.

새로운 휴대용 체 외에 노출 카세트 졸 샘플링에 대 한

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) ...

환경과학

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same pathway, are likely to fail. Emphasis must be placed upon the inhibition of pathways that are responsible for intrinsic and/or adaptive resistance to therapy. An active field of investigation is the development and testing of DNA repair inhibitors that promote the action of, and prevent resistance to, commonly used chemotherapy and radiotherapy. We used a novel protocol to evaluate the effectiveness of BRCA2 inhibition as a means to sensitize tumor cells to the DNA damaging drug cisplatin. Tumor cell metabolism (acidification and respiration) was monitored in real-time for a period of 72 hr to delineate treatment effectiveness on a minute by minute basis. In combination, we performed an assessment of metastatic frequency using a chicken embryo chorioallantoic membrane (CAM) model of extravasation and invasion. This protocol addresses some of the weaknesses of commonly used in vitro and in vivo methods to evaluate novel cancer therapy regimens. It can be used in addition to common methods such as cell proliferation assays, cell death assays, and in vivo murine xenograft studies, to more closely discriminate amongst candidate targets and agents, and select only the most promising candidates for further development.

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Here, real-time monitoring of tumor cell metabolism, combined with an in vivo chicken embryo chorio-allantoic membrane (CAM) model of metastasis, are used to evaluate novel anti-cancer targets/agents for their ability to sensitize tumor cells to DNA damaging chemotherapeutics.

암 약물 과민 반응의 효과를 평가<em&gt; 체외</em&gt; 및<em&gt; 생체</em

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same ...

의학

Protocol for Human Blastoids Modeling Blastocyst Development and Implantation

A model of the human blastocyst formed from stem cells (blastoid) would support scientific and medical advances. However, its predictive power will depend on its ability to efficiently, timely, and faithfully recapitulate the sequences of blastocyst development (morphogenesis, specification, patterning), and to form cells reflecting the blastocyst stage. Here we show that na&#239;ve human pluripotent stem cells cultured in PXGL conditions and then triply inhibited for the Hippo, transforming growth factor- &#946;, and extracellular signal-regulated kinase pathways efficiently undergo morphogenesis to form blastoids (&gt;70%). Matching with developmental timing (~4 days), blastoids unroll the blastocyst sequence of specification by producing analogs of the trophoblast and epiblast, followed by the formation of analogs of the primitive endoderm and the polar trophoblasts. This results in the formation of cells transcriptionally similar to the blastocyst (&gt;96%) and a minority of post-implantation analogs. Blastoids efficiently pattern by forming the embryonic-abembryonic axis marked by the maturation of the polar region (NR2F2+), which acquires the specific potential to directionally attach to hormonally stimulated endometrial cells, as in utero. Such a human blastoid is a scalable, versatile, and ethical model to study human development and implantation in vitro.

A protocol outlining the formation of human blastoids that efficiently, timely, and sequentially generate blastocyst-like cells.

인간 배반포 모델링 배반포 개발 및 이식을 위한 프로토콜

A model of the human blastocyst formed from stem cells (blastoid) would support scientific and medical advances. However, its predictive power will depend ...

발생학

Rapid Quantification of Mitogen-induced Blastogenesis in T Lymphocytes for Identifying Immunomodulatory Drugs

Lymphocyte proliferation in response to antigenic or mitogenic stimulation is a readily quantifiable phenomenon useful for testing immunomodulatory (i.e., immunosuppressive or immunostimulatory) chemical compounds and biologics. One of the earliest steps during mitogenesis is cell enlargement or blastogenic transformation, whereupon the cell volume increases before division. It is usually detectable in the first several hours of T-lymphocyte stimulation. Here, we describe a rapid method to quantify blastogenesis in T lymphocytes isolated from mouse spleens and human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) using an automated cell counter. Various commonly used proliferation assays for the most part are laborious and only reflect the overall population effect rather than individual cellular effects within a population. In contrast, the presented automated cell counter assay provides rapid, direct, and precise measurements of cell diameters that can be used for assessing the effectiveness of various mitogens and immunomodulatory drugs in vitro.

T-lymphocyte mitogenesis is accompanied by blastogenic transformation, whereupon the cell volume enlarges before cell division. Here, we describe a method to quantify blastogenesis in T lymphocytes using an automated cell counter with the capability of measuring cell diameters.

면역 마약 식별을위한 T 림프구에서 미토 겐 유도 블라스의 신속한 정량

Lymphocyte proliferation in response to antigenic or mitogenic stimulation is a readily quantifiable phenomenon useful for testing immunomodulatory (i.e., ...

면역학 및 감염병학

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

Traumatic brain injury is a leading cause of death and disability in military and civilian populations. Blast traumatic brain injury results from the detonation of explosive devices, however, the mechanisms that underlie the brain damage resulting from blast overpressure exposure are not entirely understood and are believed to be unique to this type of brain injury. Preclinical models are crucial tools that contribute to better understand blast-induced brain injury. A novel in vitro blast TBI model was developed using an open-ended shock tube to simulate real-life open-field blast waves modelled by the Friedlander waveform. C57BL/6N mouse organotypic hippocampal slice cultures were exposed to single shock waves and the development of injury was characterized up to 72 h using propidium iodide, a well-established fluorescent marker of cell damage that only penetrates cells with compromised cellular membranes. Propidium iodide fluorescence was significantly higher in the slices exposed to a blast wave when compared with sham slices throughout the duration of the protocol. The brain tissue injury is very reproducible and proportional to the peak overpressure of the shock wave applied.

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

This paper describes a novel model of primary blast traumatic brain injury. A compressed-air driven shock tube is used to expose in vitro mouse hippocampal slice cultures to a single shock wave. This is a simple and rapid protocol generating a reproducible brain tissue injury with a high throughput.

모델을 새로운 시험관에 폭발 외상 성 뇌 손상의

Traumatic brain injury is a leading cause of death and disability in military and civilian populations. Blast traumatic brain injury results from the ...

신경과학

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral vascular effects. Impact (i.e., non-blast) traumatic brain injury (TBI) is known to decrease pressure autoregulation in the cerebral vasculature in both humans and experimental animals. The hypothesis that blast-induced traumatic brain injury (bTBI), like impact TBI, results in impaired cerebral vascular reactivity was tested by measuring myogenic dilatory responses to reduced intravascular pressure in rodent middle cerebral arterial (MCA) segments from rats subjected to mild bTBI using an Advanced Blast Simulator (ABS) shock tube. Adult, male Sprague-Dawley rats were anesthetized, intubated, ventilated and prepared for Sham bTBI (identical manipulation and anesthesia except for blast injury) or mild bTBI. Rats were randomly assigned to receive Sham bTBI or mild bTBI followed by sacrifice 30 or 60 min post-injury. Immediately after bTBI, righting reflex (RR) suppression times were assessed, euthanasia at the time points post-injury was completed, the brain was harvested and the individual MCA segments were collected, mounted and pressurized. As the intraluminal pressure perfused through the arterial segments was reduced in 20 mmHg increments from 100 to 20 mmHg, MCA diameters were measured and recorded. With decreasing intraluminal pressure, MCA diameters steadily increased significantly above baseline in the Sham bTBI groups while MCA dilator responses were significantly reduced (p &#60; 0.05) in both bTBI groups as evidenced by the impaired, smaller MCA diameters recorded for the bTBI groups. In addition, RR suppression in the bTBI groups was significantly (p &#60; 0.05) higher than in the Sham bTBI groups. MCA&#39;s collected from the Sham bTBI groups exhibited typical vasodilatory properties to decreases in intraluminal pressure while MCA&#39;s collected following bTBI exhibited significantly impaired myogenic vasodilatory responses to reduced pressure that persisted for at least 60 min after bTBI.

Here, we present a protocol to describe methods for ex vivo vascular reactivity determination following a primary blast traumatic brain injury (bTBI) using isolated, pressurized, rodent middle cerebral arterial (MCA) segments. bTBI induction is accomplished using a shock tube, also known as an Advanced Blast Simulator (ABS) device.

가압된 설치류에 폭발을 이용한 Neurotrauma의 효과 중간 대뇌 동맥

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Low-intensity Blast Wave Model for Preclinical Assessment of Closed-head Mild Traumatic Brain Injury in Rodents

Traumatic brain injury (TBI) is a large-scale public health problem. Mild TBI is the most prevalent form of neurotrauma and accounts for a large number of medical visits in the United States. There are currently no FDA-approved treatments available for TBI. The increased incidence of military-related, blast-induced TBI further accentuates the urgent need for effective TBI treatments. Therefore, new preclinical TBI animal models that recapitulate aspects of human blast-related TBI will greatly advance the research efforts into the neurobiological and pathophysiological processes underlying mild to moderate TBI as well as the development of novel therapeutic strategies for TBI.
Here we present a reliable, reproducible model for the investigation of the molecular, cellular, and behavioral effects of mild to moderate blast-induced TBI. We describe a step-by-step protocol for closed-head, blast-induced mild TBI in rodents using a bench-top setup consisting of a gas-driven shock tube equipped with piezoelectric pressure sensors to ensure consistent test conditions. The benefits of the setup that we have established are its relative low-cost, ease of installation, ease of use and high-throughput capacity. Further advantages of this non-invasive TBI model include the scalability of the blast peak overpressure and the generation of controlled reproducible outcomes. The reproducibility and relevance of this TBI model has been evaluated in a number of downstream applications, including neurobiological, neuropathological, neurophysiological and behavioral analyses, supporting the use of this model for the characterization of processes underlying the etiology of mild to moderate TBI.

We present here a protocol of a blast wave model for rodents to investigate neurobiological and pathophysiological effects of mild to moderate traumatic brain injury. We established a gas-driven, bench-top setup equipped with pressure sensors allowing for reliable and reproducible generation of blast-induced mild to moderate traumatic brain injury.

설치류의 폐쇄 머리 경미한 외상성 뇌 손상의 전임상 평가를위한 저강도 폭발파 모델

Traumatic brain injury (TBI) is a large-scale public health problem. Mild TBI is the most prevalent form of neurotrauma and accounts for a large number of ...

Assessment of the Acute Inhalation Toxicity of Airborne Particles by Exposing Cultivated Human Lung Cells at the Air-Liquid Interface

Here, we present a specially designed modular in vitro exposure system that enables the homogenous exposure of cultivated human lung cells at the ALI to gases, particles or complex atmospheres (e.g., cigarette smoke), thus providing realistic physiological exposure of the apical surface of the human alveolar region to air. In contrast to sequential exposure models with linear aerosol guidance, the modular design of the radial flow system meets all requirements for the continuous generation and transport of the test atmosphere to the cells, a homogenous distribution and deposition of the particles and the continuous removal of the atmosphere. This exposure method is primarily designed for the exposure of cells to airborne particles, but can be adapted to the exposure of liquid aerosols and highly toxic and aggressive gases depending on the aerosol generation method and the material of the exposure modules.
Within the framework of a recently completed validation study, this exposure system was proven as a transferable, reproducible and predictive screening method for the qualitative assessment of the acute pulmonary cytotoxicity of airborne particles, thereby potentially reducing or replacing animal experiments that would normally provide this toxicological assessment.

We present a robust, transferable and predictive in vitro exposure system for the screening and monitoring of airborne particles concerning their acute pulmonary cytotoxicity by exposing cultivated human lung cells at the air-liquid interface (ALI).

공기-액체 인터페이스에서 재배된 인간 폐 세포를 노출하여 공기 중 입자의 급성 흡입 독성 평가

Here, we present a specially designed modular in vitro exposure system that enables the homogenous exposure of cultivated human lung cells at the ALI to ...

생쥐에서 매우 반복적인 저수준 폭발을 모델링하는 Shocktube 방법

Modeling Highly Repetitive Low-level Blast Exposure in Mice

Exposure to explosive blasts is a significant risk factor for brain trauma among exposed persons. Although the effects of large blasts on the brain are well understood, the effects of smaller blasts such as those that occur during military training are less understood. This small, low-level blast exposure also varies highly according to military occupation and training tempo, with some units experiencing few exposures over the course of several years whereas others experience hundreds within a few weeks. Animal models are an important tool in identifying both the injury mechanisms and long-term clinical health risks following low-level blast exposure. Models capable of recapitulating this wide range of exposures are necessary to inform acute and chronic injury outcomes across these disparate risk profiles.
Although outcomes following a few low-level blast exposures are easily modeled for mechanistic study, chronic exposures that occur over a career may be better modeled by blast injury paradigms with repeated exposures that occur frequently over weeks and months. Shown here are methods for modeling highly repetitive low-level blast exposure in mice. The procedures are based on established and widely used pneumatic shocktube models of open-field blast exposure that can be scaled to adjust the overpressure parameters and the number or interval of the exposures. These methods can then be used to either enable mechanistic investigations or recapitulate the routine blast exposures of clinical groups under study.

저자 스포트라이트: 생쥐에서 낮은 수준의 폭발 노출의 장기 영향 해독

Presented here are methods for producing repeated low-intensity blast exposures using mice.

마우스에서 매우 반복적인 낮은 수준의 폭발 노출 모델링

Exposure to explosive blasts is a significant risk factor for brain trauma among exposed persons. Although the effects of large blasts on the brain are ...