Name: transvaginal mesh insertion in the ovine model
Uploaded: 2017-07-27T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transvaginal Mesh Insertion in the Ovine Model at JoVE.com

우리는 Ivan Laermans, Rosita Kinart, Ann Lissens (외과 기술 센터, KU Leuven, Leuven, Belgium)에 감사드립니다. Jo Verbinnen과 Kristof Reyniers (벨기에 인스티튜트 해부학 연구소, KU Leuven, Leuven, Belgium)는 실험 도중 기술 지원을 제공했습니다. 데이터 및 원고 관리에 대한 도움을 주신 Leen Mortier에게 감사드립니다. 우리는 FEG Textiltechniken에 프로토 타입 메쉬 제작, 멸균 및 연구 무조건 기부에 감사드립니다.

이 실험에 대한 윤리적 승인은 KU Leuven의 동물 실험 윤리위원회 (P065 / 2013)에서 얻었습니다. 동물은 동물 복지에 관한 현재의 국가 지침에 따라 취급되었습니다. 1. 재료 및 실험 동물 <ol><li> 수술 준비 <ol><li> 외과 수술 극장에서 멸균 드레이프가있는 테이블을 덮고 멸균 굴곡 식 투관침 ( 그림 1 , 패널 A), 멸균 수술 도구, 봉합사 및 멸균 거즈를 준비하십시오. 실험에 추적 관찰이 포함 된 경우 멸균 상태에서 전체 수술 절차를 수행하십시오. 테이블 위에있는 모든기구를 수술 중에 사용할 준비를하십시오. </li><li> 멸균 된 직사각형 임플란트 및 / 또는 임플란트에 멸균 패키지로 고정 암을 삽입하고 멸균 드레이프로 덮인 테이블 위에 놓습니다 ( 그림 1B , C 및 D ). </li></ol></li></ol> 그림 1 : 트로 카와 임플란트. ( A ) 투관침의 개략도. ( B ) H 형 폴리 비닐 리덴 플루오 라이드 (PVDF) 임플란트, 중앙 부분의 세부 사항 (패널 C ). 그 모양은 현재 transvaginal 탈출 수술에 사용할 수있는 4 개의 암 메쉬에서 영감을 얻었습니다. 직사각형 몸체 (30 x 40 mm 2 )는 4 개의 뻗은 팔 (150 x 10 mm 2 )으로 옆으로 확장됩니다. 암의 크기는 이전 연구 해부 (17)에 기초하여 관련 서스펜션 구조를 관통 할 정도로 길게 설계되어있다. ( D ) 사각형 임플란트 (30 x 40 mm 2 ). 두 가지 임플란트 모두 폴리 불화 비닐 리덴으로 만들었습니다. 직물 특성 및 특성은 표 1 에 나와있다 . <ol start="2"><li> 실험 동물 (Ewe, 45-60 kg) <ol><li> 외과 수술 30 분 전에 15 mg / mL atropine sulfate 1 mL와 xylazine HCl 1 mL / x 50 mL를 전주에 (im) 전 처치하십시오. </li><li> 30 분 후에, 전처리가 양을 혼수 상태에 빠뜨리고 졸린 상태인지 확인하십시오. </li><li> 정맥 카테터를 경정맥에 넣고 0.075 mL / kg 케타민 100 mg / mL HCl을 투여하십시오. 고통스러운 자극에 대한 반응의 부족을 관찰하여 깊은 마취를 확인하십시오. </li><li> 동물을 수술대 위로 옮기고 삽관을 통해기도를 고정시킵니다. 5 L / min 산소에서 2.5 % isoflurane으로 마취를 유지하십시오. </li><li> 경정맥에 정맥 주사를 삽입하고 150 mL / h의 유속으로 식염수 500 mL를 공급한다. </li><li> 국소 의정서에 따라 예방 항생제 (amoxicillin clavulanate, 7 mg / kg) 및 수술후 진통제 (buprenorfin 및 chlorocresol, 1 mL) 또는 이와 동등한 약물을 투여하십시오. </li><li> 동물을 조명에 두십시오.수술 테이블의 끝에 hotomy 위치와 로프 ( 그림 2 , 패널 A)를 사용하여 hyperf 굴곡에 엉덩이와 그 사지를 확보. </li><li> 횡문 경을 통해 방광과 직장을 수동으로 비우십시오. </li><li> 회음부, 허벅지의 안쪽 부분 및 꼬리 주름을 면도하고 polyvidone iodium 7.5 %로 소독하십시오 ( 그림 2 , 패널 B 및 C). </li></ol></li></ol><img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/55706/55706fig2.jpg" /> 그림 2 : 동물 수술. ( A ) 양이 앙와위를 고정시키고, 엉덩이는하지를 과도하게 구부린다. ( B ) 트로 카 삽입을위한 외부 진입 지점은 복부 쪽 (빈 화살표)과 옆쪽 꼬리 접힘 부분 (전체 화살표)에 있습니다. ( C ) 복부 삽입 부위의 위치; 가운데 점선은동물의 midsagittal 비행기. ( D ) 해부 된 직장 질 중격. ( E ) 허벅지, 폐색 구멍, 그리고 산기슭 공간의 내측에 근육을 통해 복부 트로 카를 삽입. 피어싱 트로 카의 탄도는 손가락으로 제어됩니다. ( F 와 G ) 트로 카가 제자리에 놓이면 와이어 슬링 (열린 화살표)이 진행되어 질의 메쉬의 팔에로드됩니다. ( H ) 복부 (전체 화살표)와 등 (빈 화살표) 팔의 최종 위치. ( I ) 중앙 부분은 질벽과 직장 외벽 사이에 긴장이 없습니다. <ol start="10" style="margin-left: 40px;"><li> 무균 상태의 수술 인력을 준비하십시오. 수술 뚜껑과 입 마스크를 착용하고 수술을 위해 손을 씻고 수술 가운과 멸균 장갑을 착용하십시오. </li><li> 멸균 드레이프로 동물을 가리고 성기 위에 개구부를 만듭니다.틈새. </li></ol> 2. 수술 절차 <ol><li> 직장과 중격의 준비 <ol><li> Allis 포 셉를 사용하여 hymeneal 링으로 3cm 두개의 지느러미 질 벽을 파악하십시오. </li><li> 생리 식염수 10 mL가 담긴 주사기에 22G 바늘을 장착하십시오. 질 상피 (약 3 - 4mm 깊이)를 통해 그것을 삽입하고 rectomaginal 격막의 정중선, hymeneal 반지에 1.5cm cranial. </li><li> 직장 질 중격 (11)에 식염수를 주입하여 「아쿠아 절개 &quot;를 수행한다. </li><li> 질 상피에 3cm 길이의 정중선 절개를하고, Allis 포셉 (단계 2.1.1)의 꼬리를 시작하고 메스를 사용하여 hymeneal 링에서 끝납니다. 이 절개를 통해 직장 - 질 공간을 입력하십시오. </li><li> 자기 유지 식 견인 장치 ( 표 참조)를 회음부 위에 놓고 4 개의 날카로운 스테이 후크를 질 절개에 놓고 열어 두십시오. </li&gt; <li> 손가락으로 퉁퉁 퉁 근막을 질벽에서 측 방향으로 골반 벽쪽으로 그리고 cranially 위쪽으로 막 다른 골반으로 잘라냅니다. 메쉬의 30 x 40 mm 2 중앙 부분에 적합한 공간을 생성하십시오 ( 그림 2 , 패널 D). </li><li> 필요할 때마다 지혈 겸자 또는 십자형 지혈 접합으로 지혈을하십시오. 참고 : 작은 bleeders는 지혈 겸자로 클램핑 수 있습니다. 이것은 혈관을 부수고 자연 응고 폭포를 시작합니다. 더 강한 출혈을 위해 출혈성 혈관을 집게로 잡고 십자형 합자를 놓고 사각형 매듭으로 고정시킵니다. 이 시점에서 직사각형 임플란트 (2.2 단계)를 삽입하거나 절개를 계속하여 임플란트를 앵커 암 (2.3 단계)과 함께 삽입 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 플랫 메쉬 삽입 <ol><li> 질식 견인기를 질 절개로 삽입하여해부학적인 부분의 두개 부분. </li><li> 해부 된 직장 - 질의 공간의 가장 두개 측면의 왼쪽과 오른쪽에 간단한 중단 3/0 폴리 프로필렌 봉합과 이식의 왼쪽과 오른쪽 두개골 모서리를 봉합. 잔여 봉합사 물질을 자릅니다. 봉합을 질 내강에서 멀리 두십시오 ( 즉, 질벽을 관통하지 마십시오). 참고 : 임플란트는 항상 직장 - 질 중격을 구성하는 결합 조직에 봉합됩니다. 봉합사가 질 속에서 보이지 않으면 질 벽이 관통하지 않습니다. </li><li> 임플란트의 두개골 측면을 따라 하나의 중간 중단 된 추가 단순 봉합사를 추가하십시오. </li><li> 간단한 중단 3 / 3 폴리 프로필렌과 주변 결합 조직에 임플란트 중간에 측면 가장자리를 봉합. 임플란트를 가능한 한 평평하게 유지하고 긴장을 없앱니다. </li><li> 왼쪽과 오른쪽 꼬리 모서리를 왼쪽과 오른쪽에 3/0 폴리 프로필렌 봉합선으로 단절시켜 봉합하십시오.직구 공간의 가장 꼬리 쪽의 측면. </li><li> 임플란트의 꼬리 측면을 따라 하나의 중간 중단 된 추가 단순 봉합사를 추가하십시오. </li><li> 실행중인 3/0 polyglactin 봉합사로 질 절개를 닫습니다. </li></ol></li><li> 암에 임플란트를 삽입 및 고정 (트로 카 가이드 기법). <ol><li> 단계 2.1에서 생성 된 직장 - 질 공간의 해부를 계속해서 두개 - 구멍 내로하여 천공 할 수있는 폐쇄 구멍의 내면에 도달시킵니다. </li><li> 공간을 caudo - 옆으로 해부하여 sacrotuberous 인대와 caudally 위치한 coccygeus 근육의 꼬리 측면에 도달. </li><li> 아니. 24 블레이드를 사용하여 외음부 측면에 1cm 폭의 절개를 4 번 만들고 피부와 표면 근육 근막을 절단하십시오 ( 그림 2 , 패널 B 및 C). </li><li> 허벅지의 내측에 두 개의 &quot;복부&quot;절개를하십시오.좌골 ( 즉 , symphysis의 하 경계)과 정중선에서 3 cm 측면 ( 그림 2 , 패널 C). </li><li> 꼬리 주름을 삽입하는 수준에서 2 개의 &quot;등쪽&quot;절개를하고, 손바닥이있는 결절에 2cm 정도가되게합니다 ( 그림 2 , 패널 B). </li><li> 복부 절개 중 하나를 통해 곡선 트로 카를 배치하십시오 ( 그림 2 , 패널 E). </li><li> trocar를 내전근 magnus 근육, 외부 obturator, 그리고 obturator foramen의 내면으로 통과시킵니다. </li><li> 질식 절개를 통해 삽입 된 손가락으로 트로 카의 진행을 조절하십시오. 그 팁을 요나구 근육의 힘줄이 많은 호에 가이드하십시오 ( 그림 2 , 패널 E). </li><li> 질 벽 절개에 가이드 와이어를 노출시키고 해당 동측 두개골 메쉬 암 ( 그림 2 , 패널 F)으로로드합니다. </li><li> m으로 적재 된 트로 카 당기십시오.위의 구조를 통해 esh 팔. 팔을 긴장없이 유지하십시오. </li><li> 동물의 반대쪽에있는 복부 절개를 통해 두 번째 두개골 팔을 사용하여 과정을 반복합니다. </li><li> 등쪽 절개 중 하나를 통해 트로 카를 sacrotuberous 인대 바로 앞쪽에있는 coccygeus 근육으로 통과시킵니다 ( 그림 2 , 패널 G). </li><li> 질식 절개를 통해 가이드 와이어를 드러내고 메쉬의 등쪽 팔을 잡고 밖으로 잡아 당깁니다. 팔을 긴장없이 유지하고 반대편에서 반복하십시오. </li><li> 평평하게하고 팔에 장력을가하면서 메쉬의 위치를 ​​조정하십시오. 그러나 메쉬를 긴장없이 유지하십시오 ( 그림 2, 패널 I, 그림 3 ). </li><li> 그것의 꼬리 테두리의 중간에 간단한 중단 3/0 폴리 프로필렌 봉합과 메쉬의 시체를 수정, 주변 결합 조직에 그것을 확보. </li><li> 피부 레벨에서 팔을 잘라내고 모든 중단 부위를 닫습니다. 3/0 polyglecaprone 봉합사 ( 그림 2 , 패널 H). </li><li> 실행중인 3 / 0 polyglecaprone 봉합과 질 절개를 닫습니다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/55706/55706fig3.jpg" /> 그림 3 : 폐색 구멍을 통과하는 두개골 팔과 꼬리 접힘을 통과하는 꼬리 팔을 포함한 양의 골반의 개략도. 넓은 sacrotuberous 인대 파란색입니다. 작은 패널은 과도한 양의 물질을 줄이기 바로 직전 위치에있는 동물의 팔 위치를 보여줍니다. 메인 패널은 동일하지만 피부와 근육을 제거한 상태로 보여줍니다.

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양의 모델에 관한이 연구 프로그램은 Medri와 Blasingame, Burch, Garrard and Ashley (Atlanta GA, USA)의 무조건적인 보조금으로 지원되었습니다. 계약은 루벤 연구 개발 이전 사무소를 통해 처리됩니다. 스폰서는이 실험의 계획, 실행 또는보고를 방해하지 않으며 결과를 소유하지도 않습니다. NS와 LH는 FP7- 프레임 워크 (Bip-Upy 프로젝트; NMP3-LA-2012-310389)에서 EC의 보조금 수령자입니다. AF는 산학 협력 프로그램 (251356)에서 EC의 보조금으로 지원되었습니다.

여기에서는 고정 암을 사용하거나 사용하지 않고 임플란트의 질식 해부 및 질식 메쉬 삽입을 모방하기위한 양의 실험 절차에 대해 설명합니다. 후속 단계와 도구는 POP 및 스트레스 요실금 15 , 16 , 19 , 20에 대한 수술 절차에서 영감을 받았습니다. 초기 해부학 적 절개 후, 실험적인 메쉬 삽입 중 몇 가?...

골반 장기 탈출증은 임상 적으로 적어도 하나의 질식 분만을 한 여성의 절반으로 진단되어 있지만, 주관적, 그것은 (1) 전체 여성의 절반을 귀찮게. 치료의 주된 요소는 토종 조직이나 임플란트 재료를 이용한 외과 수술 재건이지만 재발이나 국소 적 합병증 2 , 3 , 4 등의 한계가 있습니다. 이상적인 임플란트는 아직 확인되지 않았습니다. 따라서 시장에 새로운 제품과 기술을 도입하기 전에 제품 혁신과 전임상 실험을위한 적절한 파이프 라인 개발에 대한 지속적인 요구가 있습니다. 이 트랙의 단계 중 하나는 적합한 동물 모델 5 , 6 에 대한 실험적 평가입니다. 이상적으로는 해부학 적, 생체 역학 및 생물학적 환경을 모방해야합니다. th에 관해서새로운 임플란트에 대한 실험적 평가는 일반적으로 생체 적합성 또는 복부 벽 결함의 재건을 위해 더 작은 모델에서 먼저 테스트됩니다. 임플란트는 관심 영역 (즉, 질) (7)에 삽입되지 않기 때문에 실험의 종류는 비판을 받아왔다. 질 수술 모델은 실험의 목표가 체외 이식편의 생체 역학적 특성을 문서화하는 것이 분명 할 때 더 희소합니다. 이런 이유로 토끼에서 양에게로 옮겨갔습니다 8 . 성충은 크기가 크고 접근 가능한 질이있는 큰 동물 모델입니다. 그들은 새로운 임플란트의 중간 평가에 사용될 수 있으며, 특정 물질 9 , 10 , 11 , 12 , 13로 질 노출을 재현 할 수 있습니다. 치수 및 해부학뿐만 아니라양의 질 및 골반저의 밀도는 인간의 것과 비슷하지만, 자궁 내 출혈의 자연 발생률은 15 %에서 발생합니다. Prolapse 위험 요소는 중첩되어있다 ( 예 : 다발성, POP의 이전 병력, 높은 몸무게에 의한 또는 언덕에서 방목했을 때의 복강 내압 증가 및 (식물성) 에스트로겐의 유사한 효과) 6 , 14 . 유럽에서는 비 - 인간 영장류에 대한 연구가 거의 완전히 금지되어 양이 유일한 합리적인 대안입니다. 이 모델은 횡격막과 중격에 메쉬가 인장없이 삽입되도록 트로 커와 가이드를 사용하여 임플란트의 질식 삽입을 모방하여 한 걸음 더 나아갔습니다. 그 다음에는 임플란트를 근육의 인대를 통해 고정시키는 방법을 사용하여 고정 시켰는데, 이는 임상 실습 15 , 16 과 동등한 것으로 간주 될 수 있습니다. 지금까지이 기법많은 사람들이 이러한 긴 스트립의 사용 및 / 또는 해부학 적 구조물의 피어싱으로 인해 특정 합병증이 발생할 수 있다고 생각하지만 연구되지 않았습니다. 이전의 상세한 해부학 연구에서, 양의 골반 바닥은 여성의 골반 17 과 비교되었습니다. 임플란트 고정에 관해서는 양들은 신 경주 인대가 없지만 매우 잘 발달 된 광범위한 sacrotuberous ligament를 가지고 있습니다. 음부 신경은 그 위로 통 주위로 달려있어이 경계표를 정지 지점으로 사용하는 것은 안전하지 못합니다. 반대로, coccygeus 근육과 그 근막뿐만 아니라 폐쇄 막은 직구 공간을 통해 접근 할 수 있습니다. 여기에서는 앵커 팔을 고정하기위한 해부학 구조의 접근 및 위치가 제안됩니다. 메쉬의 위치를 ​​정하는 데 사용할 수있는 도구에 대해 설명합니다. 마지막으로, 혈관과 신경과 같은 인접한 해부학 적 구조물에 대한 팔 또는 외과의의 관계는잠재적 인 수술 중 합병증 인 것으로도 설명된다.

<table><tbody><tr><td>Animals:&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>parous female sheep (45 - 65 kg)</td><td>Zo&amp;ouml;technical Institute of the KU Leuven</td><td>NA</td><td>experimetnal animal</td></tr><tr><td>Sterile clothing:&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>sterile drape 45 x 75 cm</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>33002</td><td>other material</td></tr><tr><td>sterile OR drape 150 x 180 cm</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>33009</td><td>other material</td></tr><tr><td>sterile glowes 2x</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>16652</td><td>other material</td></tr><tr><td>sterile surgical gown 2x</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>19342</td><td>other material</td></tr><tr><td>surgical head cap 2x</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>17427</td><td>other material</td></tr><tr><td>surgical face mask 2x</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>11983</td><td>other material</td></tr><tr><td>Other surgical material</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>implant</td><td>FEG Textiltechnik GmbH, Aachen, Germany</td><td>NA</td><td>purposely designed implant</td></tr><tr><td>3/0 polypropylene suture</td><td>Prolene, Ethicon, Diegem, Belgium</td><td>8762H</td><td>suture material</td></tr><tr><td>3/0 polygecaprone suture</td><td>Vicryl, Ethicon</td><td>J311H</td><td>suture material</td></tr><tr><td>gauze swabs 10 x 10 cm 10x, 12-ply</td><td>Lohmann &amp;amp; Rauscher, Regensdorf, Germany</td><td>11574</td><td>other material</td></tr><tr><td>syringe 10 mL</td><td>Becton Dickinsosn S.A., Madrid, Spain</td><td>300613</td><td>aqua-dissection</td></tr><tr><td>needle 16 gauge</td><td>Terumo, Leuven, Belgium</td><td>NN-2238R</td><td>aqua-dissection</td></tr><tr><td>Surgical equipment:</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>blade no.22</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>10022-00</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Allis tissue forceps 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>11091-15</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Standart pattern forceps 1 x 2 theeth 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>11023-14</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Standart pattern forceps straight serrated 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>11000-14</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Scalpel handle 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>10004-13</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Halstead-Mosquito forceps 2x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>13008-12</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Standart pattern scissors 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>14001-14</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Metzenbaum scissors 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>14016-18</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Crile Wood needle holder 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>12003-15</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Kell forceps 1x</td><td>Fine science isntruments, Heidelberg, Germany</td><td>13018-14</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Long Starr Self-Retaining Retractor with eight 5 mm sharp stay hooks</td><td>Cooper Surgical, Tumbull, USA</td><td>3704</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Heaney Simon Vaginal Retractor</td><td>Medical supplies &amp;amp; equipments co., Katy, Texas, USA</td><td>403-129FSI</td><td>surgical instruments</td></tr><tr><td>Trocar (Insnare)</td><td>Bard, West Sussex, United Kingdom</td><td>NA</td><td>any trocar on market for transvaginal mesh implantation</td></tr><tr><td>Medication:</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>amoxilicilline clavulanate 1000 mg / 300 mL (Ampiciline)</td><td>GSK, Wavre, Belgium</td><td>NA</td><td>antibiotics</td></tr><tr><td>buprenorfin 0.3 mg/mL + chlorocresol 1.35 mg/mL (Vetregesic)</td><td>Ecuphar, Oostkamp, Belgium</td><td>NA</td><td>analgesia</td></tr><tr><td>ketamin HCL 100 mg/mL (Ketamine 1000)</td><td>Ceva Sante Animale, Brussels, Belgium</td><td>NA</td><td>anesthesia</td></tr><tr><td>isoflurane (IsoFlo)</td><td>Abbott Laboratories Ltd, Maidenhead, Berkshire, UK</td><td>NA</td><td>anesthesia</td></tr><tr><td>polyvidone iodium 7.5% (Braunol)</td><td>B. Braun Medical, Machelen, Belgium</td><td>NA</td><td>local desinfection</td></tr><tr><td>saline solution 500 mL</td><td>B. Braun Medical, Machelen, Belgium</td><td>NA</td><td>aqua-dissection</td></tr><tr><td>Xxylazine HCl , 1 mL/50 kg&amp;nbsp;</td><td>Vexylan, Ceva Sante Animale, Belgium</td><td>NA</td><td>premedication</td></tr><tr><td>atropine Sulfate 15 mg/mL (),</td><td>Viatris, Belgium</td><td>NA</td><td>premedication</td></tr></tbody></table>

transvaginal mesh insertion in the ovine model

이 프로토콜은 앵커 팔의 트로 카 가이드 삽입 여부에 관계없이 단일 질 절개 기법을 사용하여 양의 직사각형 중격에 메쉬 삽입을 설명합니다. Parous sheep은 rectovaginal septum의 절개를 시행 한 다음, 양측의 고정 팔을 갖거나 갖지 않은 채 임플란트를 삽입하여 양측의 해부학 구조에 맞게 설계되었습니다. 앵커링 암은 트로 카 (trocar)와 &quot;바깥 쪽 (outside-in)&quot;기술을 사용하여 제자리에 고정되었습니다. 두개골 팔은 폐색기, gracilis 및 전두근의 magnus 근육을 통과했다. 꼬리 팔은 엉덩이 근육을 통해 sacrotuberous 인대 근처에 고정되었다. 이 기술은 골반 장기 탈출증을 앓고있는 여성에서 수행되는 외과 수술의 모방을 허용합니다. 해부학 적 공간과 요소는 쉽게 식별됩니다. 가장 중요한 부분은 복막 투석기를 삽입하는 것인데, 이는 복막강이나 주변 골반 장기에 쉽게 침투 할 수 있습니다. 티보다 광범위한 후 복막 절개와 트로 카를 더 옆으로 유도함으로써 피할 수 있습니다. 이 접근법은 trocar 유도 삽입이 현재 임상 적으로 사용되지 않기 때문에 대형 동물 모델에서 신규 임플란트의 실험적 테스트를 위해서만 설계되었습니다.

장기 관찰 설정 관리 외과 수술 후, 질 패킹 (수술 직후 질 내에 삽입 된 식염수 용액 담금질 거즈 패키지)을 삽입하여 24 시간 동안 임플란트 위치를 고정 할 수 있습니다. 양은 회복 장치에 넣고 호흡 기능을 회복시켜야합니다. 나중에, 안정의 양을 배치하고 자유롭게 이동할 수 있도록 광고 임의로 마시고 ...

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Transvaginal Mesh Insertion in the Ovine Model

이 프로토콜은 앵커 팔을 트로 카 가이드 방식으로 삽입하거나 삽입하지 않고 단일 질식 절개 기법을 사용하여 양의 직구 중간 격벽에서의 메쉬 삽입을 설명합니다.

양돈장 모델에서의 질식 삽입

This protocol describes mesh insertion into the rectovaginal septum in sheep using a single vaginal incision technique, with and without the trocar-guided ...

transvaginal-mesh-insertion-in-the-ovine-model

Research

JoVE Journal

Medicine

15.9K 조회수.  Clinical Specialties Research Groups, Faculty of Medicine, KU Leuven.  이 프로토콜은 앵커 팔을 트로 카 가이드 방식으로 삽입하거나 삽입하지 않고 단일 질식 절개 기법을 사용하여 양의 직구 중간 격벽에서의 메쉬 삽입을 설명합니다. 

비디오: Transvaginal Mesh Insertion in the Ovine Model

An Orthotopic Endometrial Cancer Model with Retroperitoneal Lymphadenopathy Made From In Vivo Propagated and Cultured VX2 Cells

Endometrial cancer is the most common gynecologic malignancy in North America and the incidence is rising worldwide. Treatment consists of surgery with or without adjuvant therapy depending on lymph node involvement as determined by lymphadenectomy. Lymphadenectomy is a morbid procedure, which has not been shown to have a therapeutic benefit in many patients, and thus a new method to diagnose lymph node metastases is required. To test novel imaging agents, a reliable model of endometrial cancer with retroperitoneal lymph node metastases is needed. The VX2 endometrial cancer model has been described frequently in the literature; however, significant variation exists with respect to the method of model establishment. Furthermore, no studies have reported on the use of cultured VX2 cells to create this model as only cells propagated in vivo have been previously used. Herein, we present a standardized surgical method and post-operative monitoring method for the establishment of the VX2 endometrial cancer model and report on the first use of cultured VX2 cells to create this model.

This protocol presents a standardized method to grow VX2 cells in culture and to create an orthotopic VX2 model of endometrial cancer with retroperitoneal lymph node metastases in rabbits. Orthotopic endometrial cancer models are important for the pre-clinical study of novel imaging modalities for the diagnosis of lymph node metastases.

생체 내 전파 및 배양 VX2 세포에서 만든 후각 성 림프절증을 가진 정형 외 자궁 내막 암 모델

Endometrial cancer is the most common gynecologic malignancy in North America and the incidence is rising worldwide. Treatment consists of surgery with or ...

연구

암 연구학

Anterior Cervical Discectomy and Fusion in the Ovine Model

Anterior cervical discectomy and fusion (ACDF) is the most common surgical operation for cervical radiculopathy and/or myelopathy in patients who have failed conservative treatment1,5. Since the operation was first described by Cloward2 and Smith and Robinson6 in 1958, a variety refinements in technique, graft material and implants have been made3. In particular, there is a need for safe osteoinductive agents that could benefit selected patients. The ovine model has been shown to have anatomical, biomechanical, bone density and radiological properties that are similar to the human counterpart, the most similar level being C3/44. It is therefore an ideal model in which preclinical studies can be performed. In particular this methodology may be useful to researchers interested in evaluating different devices and biologics, including stem cells, for potential application in human spinal surgery.

This video demonstrates the technique of anterior cervical discectomy and fusion in the ovine model.

양의 모델의 앞쪽에 자궁암 Discectomy와 퓨전

Anterior cervical discectomy and fusion (ACDF) is the most common surgical operation for cervical radiculopathy and/or myelopathy in patients who have ...

생물학

Methods for Studying Uterine Contributions to Pregnancy Establishment in an Ovariectomized Mouse Model

For pregnancy to be established, a viable blastocyst must successfully interact with a receptive uterine lining (endometrium) to facilitate implantation and placenta formation and enable ongoing pregnancy. The limitations to pregnancy success caused by embryonic defects are well known and have been largely overcome in recent decades with the rise of in vitro fertilization (IVF) and assisted reproductive technologies. As yet, however, the field has not overcome the limitations caused by an inadequately receptive endometrium, thus resulting in stagnating IVF success rates. Ovarian and endometrial functions are closely intertwined, as hormones produced by the ovary are responsible for the endometrium's menstrual cyclicity. As such, when using rodent models of pregnancy, it can be difficult to ascertain whether an observed result is due to an ovarian or uterine deficit. To overcome this, an ovariectomized mouse model was developed with embryo transfer or artificial decidualization to allow the study of uterine-specific contributions to pregnancy. This article will provide instructions on how to perform ovariectomy and offer insights into various techniques for supplying exogenous hormones to support successful artificial decidualization or pregnancy following embryo transfer from healthy donors. These techniques include subcutaneous injection, slow-release pellets, and osmotic mini pumps. The key advantages and disadvantages of each method will be discussed, enabling researchers to choose the best study design for their specific research question.

Pregnancy establishment is a dynamic process involving complex embryo and uterine crosstalk. The precise contributions of the maternal uterine environment to these processes remain an active area of investigation. Here, detailed protocols are provided to aid in designing in vivo animal models to address these research questions.

난소 절제된 마우스 모델에서 임신 확립에 대한 자궁 기여도를 연구하는 방법

For pregnancy to be established, a viable blastocyst must successfully interact with a receptive uterine lining (endometrium) to facilitate implantation ...

발생학

In Vivo Real-Time Study of Drug Effects on Carotid Blood Flow in the Ovine Fetus

The ability of an organism to maintain a constant blood flow to the brain in response to sudden surges in systemic blood pressure (BP) is known as cerebral autoregulation (CAR), which occurs in the carotid artery. In contrast to full-term neonates, preterm neonates are unable to reduce the cerebral blood flow (CBF) in response to increased systemic BP. In preterm neonates, this exposes the fragile cerebral vessels to high perfusion pressures, leading to their rupture and brain damage. Ex vivo studies using wire myography have demonstrated that carotid arteries from near-term fetuses constrict in response to the activation of adrenergic alpha1 receptors. This response is blunted in the preterm fetus. Thus, to examine the role of alpha1-AR in vivo, presented here is an innovative approach to determine the effects of drugs on a carotid arterial segment in vivo in an ovine fetus during the developmental progression of gestation. The presented data demonstrate the simultaneous measurement of fetal blood flow and blood pressure. The perivascular delivery system can be used to conduct a long-term study over several days. Additional applications for this method could include viral delivery systems to alter the expression of genes in a segment of the carotid artery. These methods could be applied to other blood vessels in the growing organism in utero as well as in adult organisms.

In Vivo Real-Time Study of Drug Effects on Carotid Blood Flow in the Ovine Fetus

The present protocol describes a method to deliver drugs and gene expression-modifying agents perivascularly in an in utero developing fetus. Importantly, the effect of drugs/agents on blood flow can be measured with the progression of pregnancy.

생체 내 난태아의 경동맥혈류에 대한 약물효과에 대한 실시간 연구

The ability of an organism to maintain a constant blood flow to the brain in response to sudden surges in systemic blood pressure (BP) is known as ...

Ovine Lumbar Intervertebral Disc Degeneration Model Utilizing a Lateral Retroperitoneal Drill Bit Injury

Intervertebral disc degeneration is a significant contributor to the development of back pain and the leading cause of disability worldwide. Numerous animal models of intervertebral disc degeneration have been developed. The ideal animal model should closely mimic the human intervertebral disc with regard to morphology, biomechanical properties and the absence of notochordal cells. The sheep lumbar intervertebral disc model fulfils these criteria. We present an ovine model of intervertebral disc degeneration utilizing a drill bit injury through a lateral retroperitoneal approach. The lateral approach significantly reduces the incision and potential morbidity associated with the traditional anterior approach to the ovine spine. Utilization of a drill-bit method of injury affords the ability to produce a consistent and reproducible injury, of precise dimensions, that initiates a consistent degree of intervertebral disc degeneration. The focal nature of the annular and nucleus pulposus defect more closely mimics the clinical condition of focal intervertebral disc herniation. Sheep recover rapidly following this procedure and are typically mobile and eating within the hour. Intervertebral disc degeneration ensues and sheep undergo necropsy and subsequent analysis at periods from eight weeks. We believe that the drill bit injury model of intervertebral disc degeneration offers advantages over more conventional annular injury models.

Intervertebral disc degeneration is a significant contributor to back pain and a leading cause of disability worldwide. Numerous animal models of intervertebral disc degeneration exist. We demonstrate an ovine model of intervertebral disc degeneration, utilizing a drill bit, which achieves a consistent disc injury and reproducible level of disc degeneration.

양측 Retroperitoneal 드릴 비트 손상을 활용하여 양의 요추 추간판 퇴화 모델

Intervertebral disc degeneration is a significant contributor to the development of back pain and the leading cause of disability worldwide. Numerous ...

의학

Intravitreal Injections in the Ovine Eye

There are several methods for the delivery of therapeutic agents to the retina, including intravitreal (IVT), subretinal, suprachoroidal, periocular, or topical administration. IVT drug delivery involves an injection into the vitreous humor of the eye, a gelatinous substance that fills the posterior chamber of the eye and maintains the shape of the eye globe. Although the IVT route is less specifically targeted than subretinal delivery, it is much less invasive and is widely used in clinical settings for a range of ocular diseases. 
We previously demonstrated the efficacy of intravitreal delivery of an adeno-associated virus (AAV)-mediated gene therapy product (AAV9.CLN5) in sheep with a naturally occurring CLN5 form of neuronal ceroid lipofuscinosis (NCL). Affected sheep received IVT gene therapy in one eye, with the other untreated eye serving as an internal control. Retinal structure and function were maintained in the treated eye up to 15 months after treatment, while the untreated eye displayed progressively declining function and severe atrophy during postmortem examination. Based on the sheep studies, the CLN5 gene therapy product was cleared as a candidate investigational new drug (IND) by the United States Food and Drug Administration in September 2021. This paper details the surgical protocol for IVT delivery of a therapeutic viral vector to the ovine eye.

Intravitreal injections were performed in the sheep eye with the aim of delivering viral-mediated gene therapy to the retina.

난소 눈의 유리체 내 주사

There are several methods for the delivery of therapeutic agents to the retina, including intravitreal (IVT), subretinal, suprachoroidal, periocular, or ...

Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately 10%-20% of women undergo pelvic floor repair surgery to treat prolapse in the United States. PFD cases result in an overall $26.3 billion annual cost in the United States alone. This multifactorial condition has a negative impact on the quality of life and yet the treatment options have only dwindled in the recent past. One common surgical option is uterosacral ligament suspension (USLS), which is typically performed by affixing the vaginal vault to the uterosacral ligament in the pelvis. This repair has a lower incidence of complications compared to those with mesh augmentation, but is notable for a relatively high failure rate of up to 40%. Considering the lack of standard animal models to study pelvic floor dysfunction, there is an urgent clinical need for innovation in this field with a focus on developing cost-effective and accessible animal models. In this manuscript, we describe a rat model of USLS involving a complete hysterectomy followed by fixation of the remaining vaginal vault to the uterosacral ligament. The goal of this model is to mimic the procedure performed on women to be able to use the model to then investigate reparative strategies that improve the mechanical integrity of the ligament attachment. Importantly, we also describe the development of an in situ tensile testing procedure to characterize interface integrity at chosen time points following surgical intervention. Overall, this model will be a useful tool for future studies that investigate treatment options for POP repair via USLS.

Pelvic organ prolapse affects millions of women worldwide and yet some common surgical interventions have failure rates as high as 40%. The lack of standard animal models to investigate this condition impedes progress. We propose the following protocol as a model for uterosacral ligament suspension and in vivo tensile testing.

자궁천골 인대 서스펜션 쥐 모델 개발

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately ...

Chronic Ovine Model of Right Ventricular Failure and Functional Tricuspid Regurgitation

The pathophysiology of severe functional tricuspid regurgitation (FTR) associated with right ventricular dysfunction is poorly understood, leading to suboptimal clinical results. We set out to establish a chronic ovine model of FTR and right heart failure to investigate the mechanisms of FTR. Twenty adult male sheep (6-12 months old, 62 &#177; 7 kg) underwent a left thoracotomy and baseline echocardiography. A pulmonary artery band (PAB) was placed and cinched around the main pulmonary artery (PA) to at least double the systolic pulmonary artery pressure (SPAP), inducing right ventricular (RV) pressure overload and signs of RV dilatation. PAB acutely increased the SPAP from 21 &#177; 2 mmHg to 62 &#177; 2 mmHg. The animals were followed for 8 weeks, symptoms of heart failure were treated with diuretics, and surveillance echocardiography was used to assess for pleural and abdominal fluid collection. Three animals died during the follow-up period due to stroke, hemorrhage, and acute heart failure. After 2 months, a median sternotomy and epicardial echocardiography were performed. Of the surviving 17 animals, 3 developed mild tricuspid regurgitation, 3 developed moderate tricuspid regurgitation, and 11 developed severe tricuspid regurgitation. Eight weeks of pulmonary artery banding resulted in a stable chronic ovine model of right ventricular dysfunction and significant FTR. This large animal platform can be used to further investigate the structural and molecular basis of RV failure and functional tricuspid regurgitation.

Right ventricular failure and functional tricuspid regurgitation are associated with left-sided heart disease and pulmonary hypertension, which contribute significantly to morbidity and mortality in patients. Establishing a chronic ovine model to study right ventricular failure and functional tricuspid regurgitation will help in understanding their mechanisms, progression, and possible treatments.

우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류의 만성 소 모델

The pathophysiology of severe functional tricuspid regurgitation (FTR) associated with right ventricular dysfunction is poorly understood, leading to ...

<meta charset="utf8"></head><body>복제 돼지의 난관 배아 이식 최적화

Embryo Transfer Surgery via Laparotomy in Gilts

This protocol aims to demonstrate the surgical technique for transferring cloned pig embryos to the oviduct, a method widely used in the production of genetically modified pigs for biomedical research. Nine gilts underwent hormonal synchronization and laparotomy for the transfer of cloned embryos produced by somatic cell nuclear transfer (SCNT) at stages of up to 4 cells on day 2 to the oviduct. Gestational diagnosis was conducted via ultrasound examination 30 days post-transfer surgery. Six out of the nine operated gilts exhibited signs of pregnancy on ultrasound examination. However, as there was no progression in fetal development as assessed by echography, the gilts underwent necropsy at 60 days for the collection of biological material and assessment of the reproductive system. Adhesions were observed in the uterine horns, ovaries, and oviducts. From the uterine lumen of two of the euthanized gilts, one and four embryonic structures with gestational ages ranging between 12 to 20 days were obtained. Despite the absence of live piglets, likely attributed to the low-efficiency rate of transferring cloned pig embryos, which is influenced by various factors, including the number and quality of transferred embryos, the presented surgical technique proved to be rapid and safe.

<meta charset="utf8"></head><body>저자 스포트라이트: 난관 복제 돼지 배아 이식의 수술 방법 및 결과

This protocol describes the application of the surgical technique used to transfer cloned pig embryos via laparotomy in gilts.

Gilts의 개복술을 통한 배아 이식 수술

This protocol aims to demonstrate the surgical technique for transferring cloned pig embryos to the oviduct, a method widely used in the production of ...

양돈장 모델에서의 질식 삽입

요약

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생체 내 전파 및 배양 VX2 세포에서 만든 후각 성 림프절증을 가진 정형 외 자궁 내막 암 모델

양의 모델의 앞쪽에 자궁암 Discectomy와 퓨전

난소 절제된 마우스 모델에서 임신 확립에 대한 자궁 기여도를 연구하는 방법

생체 내 난태아의 경동맥혈류에 대한 약물효과에 대한 실시간 연구

양측 Retroperitoneal 드릴 비트 손상을 활용하여 양의 요추 추간판 퇴화 모델

난소 눈의 유리체 내 주사

자궁천골 인대 서스펜션 쥐 모델 개발

우심실 부전 및 기능적 삼첨판 역류의 만성 소 모델

Gilts의 개복술을 통한 배아 이식 수술

Gilts의 개복술을 통한 배아 이식 수술