이 연구는 안경 돋보기와 진공 추출 튜브 시스템을 사용하여 마우스에서 꼬리 정맥에서 혈액 샘플링을보고합니다. 우리의 방법은 연습하기 쉽고 마우스에서 반복 혈액 샘플링에 사용할 수 있습니다. 마우스는 처음에 플라스틱 제지 홀더에 배치됩니다.
꼬리는 70%에탄올로 청소하고 닦아냅니다. 그런 다음 작업자는 마우스 꼬리의 시야를 개선하기 위해 안경 돋보기를 착용합니다. 나비 바늘 끝은 그 때 넓힌 측측 꼬리 정맥 의 하나에 삽입되고, 혈액은 나비 바늘의 고무 끝을 통해 진공 수집 관으로 수집됩니다.
마지막으로 바늘이 제거되고 혈액 수집 과정이 완료됩니다. 꼬리 정맥은 혈액 샘플링을위한 바람직한 위치입니다. 이러한 혈액 샘플링 방법은 마우스에 대한 최소한의 상해와 관련이 있지만, 마우스의 꼬리 정맥은 매우 얇기 때문에 때로는 천명이 어렵고, 여기서 우리는 진공 추출 튜브 시스템을 사용하여 실험실 시험 마우스에서 간단한 꼬리 정맥 혈액 샘플링 방법을 설명한다.
이 방법은 간단하고 효율적이며 마우스에서 반복적으로 필요한 혈액을 얻는 데 사용할 수 있습니다. 이 절차는 우리 실험실의 두 구성원에 의해 입증됩니다, 샤오얀 리우와 우송 주 시작, 우리는 플라스틱 억제 홀더, 고무 스토퍼진공 튜브, 이중 뾰족한 바늘, 멸균 표면에 안경 돋보기를 배치합니다. 다음으로, 플라스틱 제지 홀더에 마우스를 놓습니다.
마우스의 앞발과 뒷발은 편안한 위치에 있어야 합니다. 혈액 샘플을 얻으려면 따뜻한 물로 꼬리를 20 ~ 30 섭씨로 씻고 70 %의 에탄올 포화 면 볼로 꼬리를 닦아 정맥을 확장하십시오. 혈액 샘플링을 위해 오른쪽 또는 왼쪽 꼬리 정맥을 선택합니다.
꼬리의 아래부분을 부드럽게 잡고 혈액 샘플 수집 중에 꼬리를 똑바로 유지합니다. 테일 정맥의 구멍을 용이하게하기 위해 시야를 개선하기 위해 안경 돋보기를 착용하십시오. 22 게이지 나비 바늘 끝을 약 10도 각도로 꼬리 끝에서 반 말단 의 주위에 측면 꼬리 정맥 중 하나에 삽입하고 여러 샘플에 대한 꼬리의 베이스를 향해 이동합니다.
진공 혈액 수집 튜브에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입하여 진공 수집 튜브에 혈액을 수집합니다. 쥐의 꼬리는 승인 된 프로토콜에 따라 필요에 따라 자주 여러 혈액 수집에 사용할 수 있습니다. 전통적인 방법으로 마우스의 얇고 낮은 혈류 꼬리 정맥으로부터 충분한 혈액 량을 얻는 것은 항상 쉬운 일이 아닙니다.
우리의 방법은 간단하고 효율적이며 마우스에서 반복적으로 적절한 혈액 량을 얻는 데 사용할 수 있습니다. 총 혈액량의 최대 10%가 건강한 동물로부터 2주 간격으로 안전하게 제거될 수 있으므로, 약 175개의 마이크로리터 혈액 샘플을 윤리 교장에 따라 매번 수집하였다. 둘째, 혈액 샘플링 과정에서의 움직임을 피하기 위해 꼬리를 확장하는 것이 중요합니다.
바늘의 혈액 응고를 피하기 위해 혈액이 15 초 이상 흐르는 것을 멈추면 또 다른 펑크 위치를 선택해야합니다. 성공적인 혈액 수집은 매번 175 마이크로리터 혈액을 얻는 것으로 정의되었습니다. 최대 천자 시간은 세 번의 시험으로 설정되었습니다.
총 혈액 량이 제 3 천자 후 175 마이크로 리터가 낮아지면 실패한 혈액 수집으로 정의되었습니다. 적절한 샘플 부피가 수집되면 정맥에서 바늘을 철회하고 삽입 부위에 압력을 간략하게 적용하여 출혈을 막습니다. 플라즈마를 수집하려면 항응고제인 EDTA가 포함된 튜브를 사용하여 항응고제를 혈액과 혼합하고 샘플을 수직으로 얼음에 놓습니다.
냉장 원심분리기에서 전혈 샘플 수집 튜브를 10분 간 회전시합니다. 혈장 추출, 적혈구 층과 백혈구 층을 방해하지 않도록주의 복용. 세린을 수집하려면 항응고제없이 튜브를 사용하십시오.
두 유형의 샘플은 즉시 사용하거나 최대 1년 동안 섭씨 80도 미만으로 저장할 수 있습니다. 이 연구는 진공 혈액 수집 시스템과 안경 확대를 통해 마우스의 꼬리 정맥에서 반복 혈액 샘플 수집의 우수성을 조사하는 것을 목표로했다. 실험군은 종래의 혈액 샘플링 방법에 비하면.
종래의 그룹은, 각각 초보자와 전문가에 의해, 수집된 혈액 량 및 샘플링 기간은 전문가를 위한 2단 사이에서 유사했습니다, 그러나, 증가한 혈액 부피 및 짧은 샘플링 기간은 초보자를 위한 기존 단에 비해 실험군에서 보였습니다. 더 높은 성공률은 또한 초보자를 위한 전통적인 단에 비해 실험 군에서 보였습니다. 이 혈액 샘플링 방법은 마스터하기 쉽고 성공률이 높습니다.
실패한 천지의 수는 기존 방법을 사용하는 것과 비교하여 감소될 수 있습니다. 더욱이 이 절차는 마우스에 최소한의 상해를 야기하고, 마취가 필요 없이 마우스의 꼬리 테이프일 뿐이며, 혈액 샘플에 대한 마취제에서 스트레스 반응의 영향을 피할 수 있었다.
