Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

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•

09:02 min

•

June 10th, 2020

DOI :

10.3791/61138-v

June 10th, 2020

•

Yohei Niikura*¹, Lei Fang*², Risa Kitagawa*³, Peizhao Li¹, Yao Xi¹, Ju You¹, Yan Guo², Katsumi Kitagawa³

¹MOE Key Laboratory of Model Animal for Disease Study, Model Animal Research Center, Nanjing University, ²Jiangsu Key Laboratory of Molecular Medicine, Medical School of Nanjing University, ³Greehey Children's Cancer Institute, Department of Molecular Medicine, UT Health Science Center San Antonio

요약

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Coomassie Blue Staining

Gel Extraction

Acetonitrile Washing

Protein Lysate Normalization

이 비디오의 챕터

0:04

Introduction

0:44

In Vivo Ubiquitylation Assays Using pQCXIP-EYFP-CENP-A

2:19

Mass Spectrometry to Identify the Ubiquitylation Site of the EYFP-CENP-A K124R Mutant

4:55

Data Analysis

6:22

Results: EYFP-CENP-A K124 Mutant is Ubiquitylated and Interacts with HJURP

8:12

Conclusion

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