수술 후 MRI와 결합 된 혈관 내 천공 모델은 출혈의 검증과 다른 두개간 병리의 배제를 허용합니다. 이 접근법의 장점 중 하나는 추가 하위 그룹 분석을 위해 출혈량을 정량화하는 옵션입니다. 마우스의 목 머리카락을 면도하는 것으로 시작하십시오.
절차 중에 안과 연고를 바르십시오. 70 % 에탄올로 피부를 살균 한 다음 Betadine 또는 chlorhexidine을 바르고 1 % 리도카인을 바르십시오. 마우스를 머리와 몸통이 위쪽 방향을 향하도록 수핀 위치에 놓습니다.
네 사지에 테이프를 사용하여 마우스를 등쪽으로 안정화하십시오. 목의 피부를 스트레칭하고 들어 올립니다. 턱에서 유방 뼈의 위쪽 가장자리까지 목 피부를 펼치고 인접한 결합 조직에서 타액선을 분리하십시오.
기관의 한쪽을 따라 근육을 분리하여 일반적인 경동맥 외피를 노출시킵니다. 수축기 또는 멸균 거즈 면봉으로 수술 현장을 노출시키고 경동맥을 분리하고 자유 8-0을 남겨 둡니다. 실크 봉합사를 결찰하지 않고 미주 신경을 손상시키지 않도록합니다. ECA의 원위 말단을 해부하고 원위 위치에서 혈관을 두 번 절제하십시오.
두 번 결찰 된 필라멘트 세그먼트의 중간 지점에서 ECA를 분리하고 용기 그루터기를 만듭니다. 실크 봉합사를 닫지 않고 ICA 주위에 두십시오. ECA 그루터기 주위의 필라멘트에 대한 하나의 결찰을 미리 배열하십시오.
필라멘트 삽입이 성공할 때까지 닫지 마십시오. 봉합사 또는 마이크로 클립을 사용하여 ICA 및 CCA를 일시적으로 닫습니다. 미세 혈관 가위를 사용하여 ECA를 절개하고 5-0 대안으로 4-O Prolene 필라멘트를 삽입하고 CCA로 전진시킵니다.
ICA 및 CCA의 마이크로 클립을 분리하면서 ECA의 합자를 닫습니다. 필라멘트를 부드럽게 뒤로 당기고 ECA 그루터기를 두개골 방향으로 조정하면서 ICA로의 분기를 통해 필라멘트를 질질합니다. 필라멘트 팁을 수평면의 기관 미드라인에 약 30도 각도로 중앙에 놓고 ICA 내부로 밀어 넣습니다.
ACA-MCA 분기에서 저항이 관찰됩니다. 필라멘트를 앞으로 세 밀리미터까지 이동하고 오른쪽 ACA를 천공합니다. 필라멘트를 ECA 그루터기로 신속하게 철수시켜 지주막하 공간에서 혈류를 허용합니다.
필라멘트를 이 위치에 10초 동안 놓습니다. 필라멘트를 철회하십시오. CCA는 과도한 혈액 손실을 피하기 위해 사전에 일시적으로 폐쇄 된 다음 필라멘트를 철회 할 수 있습니다.
미리 배열 된 봉합사를 사용하여 ECA를 취소하고 이전에 닫은 경우 CCA를 다시 엽니 다. 근육 떨림, 동측성 근증, 호흡을 위해 헐떡이는 것, 변경된 심장 리듬 및 요실금의 존재는 성공적인 수술의 증거를 뒷받침 할 수 있습니다. 출혈 누출이 없는지 확인하고 피부를 소독하십시오.
상처를 봉합하십시오. 마우스를 열 상자에 넣고 동물이 흉골 잔해를 갖기에 충분한 의식을 가질 때까지 기다리십시오. 통증을 완화하려면 파라세타몰 밀리리터 당 1.2 밀리그램을 투여하십시오.
마우스 머리 공진기에 설치류 스캐너를 사용하여 수술 24 시간 후 MRI를 수행하고 마우스를 섭씨 37도에서 가열 된 순환 물 담요에 놓습니다. 먼저 세 개의 직교 슬라이스 패키지를 획득하는 빠른 참조 스캔을 수행합니다. 그런 다음 이미징을 위해 고해상도 T2 가중 2D 터보 스핀 에코 시퀀스를 사용하십시오.
데이터를 DICOM 이미지 형식으로 전송하고 혈전의 SAH 등급 및 체적 측정을 위해 Imagej 소프트웨어를 사용하십시오. 정확한 출혈 부위를 보장하고 다른 두개내 병리를 배제하기 위해, MRI 스캔은 수술 후 24시간 동안 수행되었다. SAH 출혈 등급은 T2 가중 MRI 스캔을 기준으로 정량화되었다.
조사된 마우스 중에서, 동물의 14%는 SAH 또는 출혈에 대한 방사선학적 증거 없이 출혈 등급 0으로 분류되었다. 대부분의 동물은 한 명에서 세 명 사이의 출혈 등급을 보였고 10 %는 뇌졸중 및 / 또는 ICH를 따라 SAH로 정의 된 출혈 등급 네 번째 등급을 보였습니다. SAH 두께를 기준으로 각 SAH 등급의 총 출혈 부피를 정량화하여 출혈 부위를 결정하는 데 도움을줍니다.
축방향 SAH 두께에 기초하여 계산된 출혈 부피는 그들의 상응하는 하위군 등급에서 하나 내지 세 등급에서 유의한 차이를 보였다. 전체 수술 전반에 걸쳐, 봉합사의 올바른 위치를 위해 주변 연결 조직의 철저한 해부가 중요합니다. ECA 그루터기의 길이가 충분하여 필라멘트의 결찰, 절개 및 삽입을위한 편안한 작업 공간을 확보하십시오.
조기 혈관 천공을 방지하기 위해 MCA-ACA 분기 전에 저항을 느낄 때 필라멘트를 앞으로 밀지 마십시오.
