이 프로토콜은 순환기 사망 후 임상 심장 이식을 정확하게 모방하는 흉복부 정상 체온 국소 관류가 뒤따르는 대규모 동물 기증 모델을 설명합니다. 이것은 중개 연구의 잠재적 전략을 평가하는 데 사용될 수 있습니다. 이 프로토콜의 주요 이점은 멧돼지와 인간 심장 사이의 해부학적 및 외과적 기술의 유사성을 감안할 때 심장 이식에 적합한 전임상 모델을 제공한다는 것입니다.
소작 펜을 사용하여 마취된 동물의 자궁경부 중간에서 검상돌기까지 정중선 절개를 수행하는 것으로 시작합니다. 그런 다음 전기 소작을 사용하여 정중선을 따라 피하 지방을 층별로 나누어 흉골 주위까지 도달시킵니다. 흉골 노치 주위를 자른 후 손가락을 사용하여 흉골 아래에서 연조직을 수축시키고 쓸어냅니다.
뼈 톱으로 흉골을 열어 흉골이 완전히 갈라지도록 하고 흉골 윗부분 아래의 정맥을 조심합니다. 그런 다음 흉골을 소작하거나 뼈 왁스를 바르면 적절한 지혈이 이루어집니다. 다음으로 전기소작을 이용하여 흉선을 심낭에서 들어 올려 해부 및 제거하고 대동맥과 대정맥에서 흉선을 공급하는 혈관을 소작하여 출혈을 예방합니다.
조심스럽게 심낭을 소작으로 자릅니다. 절단하는 동안 심장 부상을 방지하기 위해 심낭 아래에 손가락을 삽입하십시오. 그런 다음 헤파린 킬로그램당 300단위를 정맥 주사하여 전신 항응고를 달성합니다.
테스트가 가능한 경우 활성화된 응고 시간이 300초 이상인지 확인하십시오. 프로포폴 킬로그램 당 3 밀리그램의 볼루스를 정맥 주사하십시오. 그런 다음 기계적 환기를 중지하고 기관내관을 분리합니다.
동맥압 및 말초 산소 포화도를 모니터링합니다. 수축기 혈압이 수은 50mm 미만일 때 기능적 온찜 허혈 시간을 시작하십시오. 수축기가 있고 동맥 박동이 없을 때 순환 정지를 설정하십시오.
생명 유지 요법을 중단하고 사망을 확인한 후 우심실 유출로를 아래쪽으로, 폐동맥을 왼쪽으로, 대동맥을 오른쪽으로 후퇴시킵니다. 그런 다음 소작을 사용하여 대동맥 폐 공간을 조심스럽게 해부합니다. 대동맥 상부 혈관 위에 큰 크로스 클램프를 적용하여 대뇌 관류를 피하고 배제합니다.
다음으로, 메첸바움(Metzenbaum)과 직각 겸자를 사용하여 상대정맥과 무명동맥 사이, 하대정맥과 심낭 사이를 섬세하게 해부합니다. 그리고 탯줄 테이프 또는 간단한 제로 실크 봉합사를 사용하여 상대정맥과 하대정맥에 동그라미를 치고 지혈대로 고정합니다. 3-0 봉합사를 사용하여 원위 상행 대동맥 외막에 두 개의 동심원 지갑 끈 봉합사를 놓고 전체 두께 봉합사를 피합니다.
그런 다음 지혈대로 모든 봉합사를 고정하기 전에 오른쪽 심방에 지갑 끈 봉합사를 놓습니다. 다음으로, 정상 체온 지역 관류 시스템을 설정하고 프라이밍합니다. 그런 다음 17-21 프랑스 동맥 캐뉼라를 사용하여 대동맥을 캐뉼러내고 지갑 끈 봉합사를 잡고 지혈대를 조여 제자리에 고정합니다.
우심방의 지갑 끈 중앙에 5mm 절개를 만들고 직각이나 스냅과 같은 작은 각진 도구를 사용하여 확장합니다. 과도한 출혈을 피하기 위해 손가락으로 절개 부위를 덮으십시오. 다음으로, 2 단계 정맥 캐뉼라를 사용하여 우심방을 캐뉼라로 만듭니다.
그런 다음 지혈대를 사용하여 지갑 끈 봉합사를 조여 캐뉼라를 고정합니다. 8인치 커넥터를 사용하여 캐뉼라를 정상 체온 지역 관류 회로의 정맥 라인에 연결하여 시스템의 에어록을 피하기 위해 완전한 공기 제거를 보장합니다. 사망 선언과 정상 체온 국소 관류 시작 사이에 최소 15분이 경과하여 임상 실습 준비, 드레이핑 및 심장 접근에 필요한 시간을 포함합니다.
기능적 온열 허혈 시간 시작 15분 후, 정상 체온 국소 관류를 시작하고 유속을 점진적으로 조정하여 평방 미터당 분당 2.5리터의 관류 지수에 도달합니다. 흡기 산소의 50% 비율과 일회 호흡량 킬로그램당 6밀리리터로 기계 환기를 다시 시작합니다. 이유 기준이 충족되면 정상 체온 지역 관류를 중지하십시오.
우심방에서 캐뉼라를 제거하고 지갑 끈 봉합사를 빠르게 조여 혈액 손실을 최소화하십시오. 매듭으로 봉합사를 고정하십시오. 그런 다음 동일한 절차에 따라 대동맥 캐뉼라를 제거하십시오.
표준 경식도 프로브와 심장에 직접 배치된 경흉부 프로브를 사용하여 심초음파를 통해 심장 기능을 분석합니다. 심장 기능의 대표적인 결과는 순환기 사망 후 기증 후 심장 기능의 현저한 감소를 보여주었습니다. 그러나 이러한 장기는 기존 이식된 심장과 비교할 때 이식 후 유사한 기능 회복을 보여주었습니다.
대동맥상 혈관이 고정된 상태에서 정상 체온 국소 관류 동안 대뇌 산소 측정 측정은 적절한 대뇌 관류의 부재를 확인한 반면, 정상 체온 국소 관류 중 및 지지체에서 떼어낸 후 폐 순응도 측정은 기준선에서 유의미한 변화를 나타내지 않았습니다. 이 기술의 개발은 순환기 사망 및 정상 체온 국소 관류 후 기증의 맥락에서 폐, 신장 및 간과 같은 다른 장기의 이식 가능성을 평가하는 것의 중요성을 도입했습니다.
