날파리는 사프로-네크로파구스(sapro-necrophagous)뿐만 아니라 의무성 또는 통성 기생충일 수 있는 다양한 파리 그룹입니다. 오블리게이트 기생 종은 살아있는 조직만을 먹고 척추동물에서 근육증을 일으키는 반면, 사프로-네크로파구스 종은 썩어가는 유기물을 먹습니다. 통성 기생충은 살아 있거나 썩어가는 물질을 모두 먹을 수 있으며 기생충으로 살 수도 있고 그렇지 않을 수도 있습니다.
유충 단계가 가장 문제가 되는 단계이지만, 암컷은 산란할 위치를 선택할 때 결정적인 역할을 하므로 유충이 먹이를 먹고 발달할 위치를 크게 제어합니다. 여기에 제시된 방법의 전반적인 목표는 날파리에서 유충 먹이 기질 선호도와 암컷 산란 부위 선택을 모두 평가하는 것입니다. 애벌레 먹이 선호도.
1 단계, 한천 2 %로 페트리 요리 준비2 % 한천으로 페트리 요리를 준비합니다. 그렇게 하려면 물 300ml에 세균 한천 6g을 넣고 이 혼합물을 전자레인지에 녹입니다. 그런 다음 볼륨을 4개의 페트리 접시로 나눕니다.
원하는 복제 횟수에 따라 한천으로 페트리 접시의 수를 준비하십시오. 한천이 응고된 후 페트리 접시의 양쪽에 2개의 구멍이 있는 직경 3cm의 50밀리리터 원뿔형 튜브에 종이에 제공된 절단 페터를 사용하여 한천에 4개의 구멍을 뚫습니다. 2 단계, 기판 준비.
신선한 고기를 피로 준비하려면 희석된 소 혈액 12ml를 항응고제 용액과 반으로 여과된 물로 반은 섞은 소의 피를 사용하십시오. 그런 다음 이 용액을 신선한 소 갈은 쇠고기 200g에 넣고 잘 저어줍니다. 기질 사이의 다른 오염을 피하기 위해 고기 유형별로 다른 눈금 실린더와 숟가락을 사용하는 것을 잊지 마십시오.
썩은 기질을 준비하려면 썩은 고기 12g에 여과수 200ml를 넣고 신선한 고기로 한 것처럼 저어줍니다. 실험을 시작하기 전에 고기를 인큐베이터에서 섭씨 25도에서 5일 동안 썩게 합니다. 고기 기질을 준비한 후 한천의 구멍을 양쪽에 신선하고 썩은 고기로 채웁니다.
여기에 표시된 것처럼 페트리 접시에서 고기의 위치를 무작위로 지정하는 것을 잊지 마십시오. 3단계, 실험 설정. 섭씨 25도의 방에서 가열 패드를 광원 바로 아래에 설정하여 빛에 대한 광범위한 행동 편향으로 선호도 분석을 고르게 비춥니다.
그런 다음 가열 패드 주변의 판지를 지지대로 사용하여 모두 같은 높이를 유지합니다. 모든 세트, 가열 패드 및 지지 판지 위에 검은색 판지를 놓아 모든 기판 위에 동일한 색상 패턴을 유지합니다. 두 개의 기판이 있는 검은색 판지 위에 한천과 고기 기판이 있는 6개의 페트리 접시를 가열 패드에 각 유형 중 하나씩, 가열 패드 표면 외부에 다른 두 개를 놓습니다.
이렇게 하면 페트리 접시 각각에 신선함과 차갑음, 썩은 것과 차가운, 신선함과 뜨거움, 마지막으로 썩은 것과 뜨거운 것의 네 가지 기질이 있을 수 있습니다. 기판을 약 10분 동안 가열합니다. 4단계, 유충 테스트.
적외선 온도계로 기판의 온도를 확인하십시오. 추운 쪽은 섭씨 25도 정도, 더 더운 쪽은 섭씨 33도 정도여야 합니다. 원하는 온도에 도달한 후 핀셋을 사용하여 각 페트리 접시의 중앙에 5개의 세 번째 인스타 유충을 놓습니다.
그런 다음 페트리 접시를 뚜껑으로 덮고 선택 실험을 정확히 10분 동안 실행합니다. 실험하는 동안 유충은 페트리 접시 주위를 기어 다니며 네 가지 옵션 중 하나를 선택합니다. 유충이 탈출하면 핀셋을 사용하여 페트리 접시 중앙에 다시 놓습니다.
10분 후 모든 실험 페트리 접시를 가열 패드에서 꺼내 다른 표면에 놓습니다. 그런 다음 각 기질에 얼마나 많은 유충이 있는지 세십시오. 우리는 다채로운 유충이 선택한 기질에 머무르는 것을 관찰했습니다.
여성 산란 부위 선호. 1단계, 실험 설정. 이 작업은 이전에 검은색 판지로 덮여 있던 일반 선반에서 수행할 수 있습니다.
이 판지는 유충 분석에서와 마찬가지로 필요하므로 성인 암컷에게는 시각적 단서가 제공되지 않습니다. 선반은 또한 LED 스트립으로 고르게 늘어서야 합니다. 섭씨 25도의 방에서 선반 중앙에 가열 패드를 놓습니다.
가열 패드 주변의 판지를 지지대로 사용하여 모두 같은 높이를 유지하십시오. 모든 세트 위에 검은색 판지, 가열 패드, 지지 판지를 놓아 모든 기판 위에 동일한 색상의 패턴을 유지합니다. 두 개의 다른 십자가 사이에 있는 동일한 십자가의 두 팔 아래에 가열 패드를 배치합니다.
이렇게 하면 선반의 공간을 더 잘 사용할 수 있습니다. 실험을 시작하기 전에 LED 조명과 가열 패드를 켜십시오. 테스트 사이에 냄새 오염을 방지하기 위해 항상 70% 에탄올로 십자형 유리를 청소하는 것을 잊지 마십시오.
2 단계, 기판 준비. 신선하거나 썩은 고기 5g으로 플라스틱 페트리 접시를 준비합니다. 기질은 유충 테스트와 동일하며 신선하고 5 일 된 썩은 것입니다.
각 십자가에는 총 4 개의 페트리 요리가 필요하며, 2 개는 신선한 고기, 2 개는 썩은 고기가 필요합니다. 신선한 고기의 경우 희석된 소의 혈액 1mm(혈액의 절반은 항응고제, 절반은 물)를 넣으십시오. 썩은 고기의 경우 정수된 물 1mm를 넣으십시오.
두 기질을 잘 저어주고 썩은 고기와 신선한 고기 사이의 냄새 교차 오염을 방지하기 위해 다른 숟가락을 사용하는 것을 잊지 마십시오. 십자가에서 알코올이 완전히 증발했는지 확인하십시오. 그런 다음 십자가의 팔 끝에 고기가 담긴 페트리 접시 4개를 놓고 각 종류의 고기 중 하나는 가열 패드에 놓고 다른 두 개는 가열 패드 표면 외부에 놓습니다.
이렇게 하면 각 십자가가 신선함과 차갑음, 썩은 것과 차갑게, 신선함과 뜨거움, 마지막으로 썩은 것과 뜨거운 것의 네 가지 기질을 가질 수 있습니다. 십자가의 개구부를 닫고 기판을 약 10분 동안 가열합니다. 3단계, 여성 테스트.
파리 새장에서 암컷을 잡으십시오. 복부가 커지고 희끄무레한 노란색을 띠는 것이 특징이다. 개별 튜브에서 각 십자가에 대해 하나의 암컷을 분리합니다.
적외선 온도계로 기판의 온도를 확인하십시오. 추운 쪽은 섭씨 25도 정도, 더 더운 쪽은 섭씨 33도 정도여야 합니다. 각 십자가의 중앙 개구부에 움켜쥔 암컷이 있는 튜브 하나를 놓습니다.
암컷이 십자가에 들어간 후 뚜껑으로 구멍을 막으십시오. 각 십자가에 모든 암컷을 배치한 후 외부 광원으로부터 보호하기 위해 검은색 판지로 선반의 열린 부분을 닫습니다. 실험을 정확히 4시간 동안 실행합니다.
이 시간이 끝나면 튜브를 사용하여 십자가에서 암컷을 제거합니다. 그런 다음 기판에 다른 위치가 있는지 확인하십시오. 각 페트리 접시의 뚜껑을 기질의 이름으로 식별합니다.
70% 에탄올을 사용하여 테스트에서 발생하는 모든 냄새로부터 십자가를 청소하십시오. 4단계, 달걀 개수. 페트리 접시는 계산하기 전에 얼릴 수 있습니다.
이 경우 페트리 접시를 해동하십시오. 그런 다음 실체현미경을 사용하여 각 기질의 계란 수를 계산합니다. 데이터 분석 및 통계.
1단계, 선호도 지수 계산. 행동 테스트의 각 반복실험에 대해 선호도 지수는 기판 유형과 온도에 대해 별도로 계산됩니다. 기질 유형에 대한 선호도 지수는 신선한 육류 기질의 유충 또는 알의 수를 모든 기질의 총 유충 또는 알의 수로 나눈 값으로 표시됩니다.
온도에 대한 선호도 지수는 뜨거운 기질의 유충 또는 알의 수를 모든 기질의 총 유충 또는 알의 수로 나눈 값으로 표시됩니다. 두 가지 지수 선호도를 모두 고려할 때, 1에 가까운 값은 신선하거나 뜨거운 기질에 대한 선호도를 반영합니다. 그리고 0에 가까운 값은 썩거나 차가운 기판에 대한 선호도를 의미합니다.
2단계, 관찰된 선호도와 무작위 선택의 비교. Y축에서는 온도에 대한 선호도 지수를, X축에서는 육류에 대한 선호도 지수를 시각화할 수 있습니다. 유충 및/또는 암컷이 특정 조건에 대한 선호도를 보이는지 확인하기 위해 시뮬레이션 데이터를 사용하여 결과를 무작위 선택과 비교했습니다.
우리의 유충 결과는 온도 및 육류 선호도 측면에서 시뮬레이션된 모든 데이터 세트에서 크게 지연되었습니다. 그래픽으로 볼 때, 유충은 썩고 차가운 기질에 대한 강한 선호도를 보였다는 것이 분명합니다. 육류 종류에 대한 여성의 선호도는 비교의 약 30%에서 무작위 선택과 유의한 차이가 있음을 발견했습니다.
온도의 경우, 비교의 약 70%가 상당한 선호도를 보였습니다. 두 프로토콜 모두 육류의 종류와 온도라는 두 가지 상호 작용 요인에 대해 유충과 암컷의 선호도를 테스트할 수 있는 가능성을 제공합니다. 테스트는 간단하며 동일한 크기 및/또는 다른 조건의 다른 종의 선호도를 테스트하도록 조정할 수 있습니다.
동물의 행동은 매우 다양하고 여러 환경 요인의 영향을 받으므로 불균등한 조명, 남아 있는 냄새 및 공유 기구를 통한 기타 기질 오염을 피하기 위해 특별한 주의를 기울여야 합니다. 시청해 주셔서 감사합니다.
