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Neste Artigo

  • Resumo
  • Resumo
  • Introdução
  • Protocolo
  • Resultados
  • Discussão
  • Divulgações
  • Agradecimentos
  • Materiais
  • Referências
  • Reimpressões e Permissões

Resumo

Apresentamos aqui um modelo de rato de ansiedade induzido por isolamento social (SI) que utiliza camundongos selvagens do tipo C56BL/6J para induzir estresse e comportamento semelhante à ansiedade com manuseio mínimo e sem procedimentos invasivos. Este modelo reflete os padrões da vida moderna de isolamento social e é ideal para estudar ansiedade e distúrbios relacionados.

Resumo

Os transtornos de ansiedade são uma das principais causas de incapacidade nos Estados Unidos (EUA). Os tratamentos atuais nem sempre são eficazes e menos de 50% dos pacientes atingem a remissão completa. Um passo crítico no desenvolvimento de um novo ansiolítico é desenvolver e utilizar um modelo animal, como camundongos, para estudar mudanças patológicas e testar alvo(s) de drogas, eficácia e segurança. As abordagens atuais incluem manipulação genética, administração crônica de moléculas indutoras de ansiedade ou administração de estresse ambiental. Esses métodos, no entanto, podem não refletir realisticamente a ansiedade induzida ao longo da vida diária. Este protocolo descreve um novo modelo de ansiedade, que imita os padrões intencionais ou não intencionais de isolamento social na vida moderna. O modelo de ansiedade induzida pelo isolamento social minimiza as distrações percebidas e a invasividade e utiliza camundongos selvagens do tipo C57BL/6. Neste protocolo, camundongos de 6 a 8 semanas de idade (macho e fêmea) são alojados individualmente em gaiolas opacas para bloquear visualmente o ambiente externo, como camundongos vizinhos, por 4 semanas. Nenhum enriquecimento ambiental (como brinquedos) é fornecido, o material de cama é reduzido em 50%, qualquer tratamento da droga é administrado como uma forma de ágar e a exposição / manuseio dos ratos é minimizada. Camundongos socialmente isolados gerados usando este protocolo exibem maior comportamento semelhante à ansiedade, agressão, bem como diminuição da cognição.

Introdução

Os transtornos de ansiedade representam a maior classe e carga de doenças mentais nos Estados Unidos (EUA), com custos anuais relacionados superiores a US$ 42 bilhões 1,2,3. Nos últimos anos, a ansiedade e o estresse aumentaram a prevalência de suicídio e ideação suicida em mais de 16%4. Pacientes com doenças crônicas são especialmente vulneráveis a efeitos secundários não intencionais de sofrimento mental ou função cognitiva reduzida5. Os tratamentos atuais para a ansiedade incluem psicoterapia, medicamentos ou uma combinação d....

Protocolo

Todos os experimentos em animais são realizados de acordo com os protocolos aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade do Sul da Califórnia (USC), e todos os métodos são realizados de acordo com diretrizes, regulamentos e recomendações relevantes.

1. Animais

  1. Obter a aprovação dos comitês de cuidados com os animais apropriados para o estudo.
  2. Ajuste o biotério para um ciclo escuro-claro de 12 h com temperatura e umidade controladas entre 24 ± 2 °C e 50%-60%, respectivamente.
  3. Obtenha camundongos machos e/ou fêmeas do tipo selvagem C57BL/6 com idade entre 6-8 s....

Resultados

Todos os resultados e números representativos foram modificados a partir de nossas publicações recentes22,23. Para avaliar os efeitos do isolamento social sobre a ansiedade e o comportamento exploratório, foram realizados testes EPM e OF 24 h após a data de término do período de isolamento social de 4 semanas. Camundongos socialmente isolados passaram significativamente menos tempo no braço aberto (1,28 ± 0,17 min) em comparação com o controle (2,31 ±.......

Discussão

As etapas críticas do protocolo incluem a configuração adequada das gaiolas de isolamento social (ou seja, o embrulho de sacos opacos e a redução da quantidade de cama), minimizando o manuseio e a perturbação dos ratos durante todo o período de isolamento e certificando-se de que os ratos obtenham e consumam o ágar com a droga completamente. É fundamental que o biotério ou a condição de alojamento seja mantido a uma temperatura e umidade constantes, bem como minimizadas as interferências externas. .......

Divulgações

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Agradecimentos

Este trabalho foi financiado pelo National Institute of Health grant AA17991 (para J.L.), Carefree Biotechnology Foundation (para J.L.), University of Southern California (USC), USC Graduate School Travel/Research Award (para S.W.) Bolsa de Estudo da Missão Cultural da Arábia Saudita (para A.A.O.), e Programa de Bolsas de Estudo para Profissões de Saúde do Exército (para A.S.S.).

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Materiais

NameCompanyCatalog NumberComments
Black Plastic BagsOffice Depot79193224" x 32"
Elevated Plus MazeSD InstrumentsNABlack color
Open Field enclosureSD InstrumentsNAWhite color
Select AgarInvitrogen30391-023
Square cotton for nesting (nestlet)Ancare CorporationNC9365966Divide a 2" square piece into 4 pieces to create a 1" square piece for isolation group
SucroseSigmaS1888-1KG
Weigh boatSIgmaHS1420ASmall, square white polystyrene

Referências

  1. Craske, M. G., et al. Anxiety disorders. Nature Reviews Disease Primers. 3 (1), 17024 (2017).
  2. Kasper, S., den Boer, J., Ad Sitsen, J. . Handbook of Depression and Anxiety: A Biological Approach. , (2003).
  3. Konnopka, A., König, H.

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