Para começar, puxe capilares de vidro borossilicato com um diâmetro externo de dois milímetros e um diâmetro interno de 1,56 milímetros, seguindo as configurações apropriadas. Antes de preencher o capilar antes de cada experimento, use uma pinça fina para abrir a ponta do capilar. Para carregar o capilar, use a solução estimulante em três a cinco vezes a concentração normal do estimulante necessária.
Com uma pipeta de transferência de plástico fina, injete lentamente a solução estimulante no capilar até que 3/4 de seu comprimento seja preenchido. Elimine quaisquer bolhas de ar que possam se formar durante o processo de enchimento, agitando suavemente o capilar. Em seguida, monte o capilar preenchido no micromanipulador.
Defina as configurações do sistema de entrega de célula única para fornecer um pulso de 10 segundos a cinco psi. Conecte o capilar de borossilicato montado no micromanipulador ao suporte da pipeta do sistema de entrega de célula única. Aplicar um breve sopro com duração de dois segundos a uma pressão de 20 psi, enquanto observa a ponta capilar para confirmar que a solução está sendo dispensada através da extremidade da ponta.
A configuração agora está pronta para uso com microscopia para imagens em tempo real de um único esperma de camundongo.
