Limpeza óptica e marcação para microscopia de fluorescência de folha de luz em imagens cerebrais humanas em larga escala

O cérebro humano é um órgão complexo que abrange diferentes habilidades. Para entender sua funcionalidade, é essencial construir sensores celulares detalhados em todo o cérebro. Nosso protocolo de alto rendimento permite a análise da citoarquitetura 3D de áreas volumétricas do cérebro humano com resolução micrométrica, possibilitando sua caracterização estrutural.

A reconstrução volumétrica de grandes áreas do cérebro humano apresenta vários desafios experimentais ligados às dimensões maciças das amostras cerebrais, à complexa composição biológica, às variáveis condições de fixação e armazenamento post-mortem e aos sinais autofluorescentes dos pigmentos do tipo lipofuscina. Tudo isso pode comprometer a eficiência da limpeza óptica e a demonstração de qualidade. Em comparação com outras técnicas de clareamento, o método de transformação de tecido curto combinado com imagens de microscopia de folha de luz pode ser usado para processamento rápido e simultâneo de várias seções cerebrais humanas.

Estes resultam em reconstrução cerebral 3D com uma resolução subcelular.