A Wellcome Trust para a concessão de financiamento de Acesso Aberto para a Universidade de Oxford. Robert Deacon é um membro do grupo Oxion Oxford, financiado pelo Wellcome Trust concessão WT084655MA.

<html> 1. As piscinas infantis Oxford A piscina infantil tem sido feita de acordo com três projetos sucessivos, Mc 1-3. Todos empregar (2 cm) de água superficial contida em uma base branca (para aumentar a sua aversão), que é rodeado por paredes de Perspex transparente feito de plástico ou de acrílico transparente. Estes têm de verdadeiro / falso sai definidos neles. Os falsos saídas são ocluídas por negros cavilhas de madeira pintados, ao passo que a verdadeira saída está aberta e juntou-se a um tubo de plástico preto, que podem ser removidos com o rato no interior. O mouse é, então, de forma rápida e atraumaticamente retornou à sua gaiola, enquanto no interior do tubo. Depois da primeira publicação do tanque, foi relatado que o retorno para a gaiola casa também era um motivador eficaz para a aprendizagem do labirinto Lashley III 2. A temperatura da água de 20-25 ° C, é utilizado. 20-21 ° C é ideal, tem sido observado que alguns ratos parecem menos motivados a temperaturas mais elevadas. conteúdo &quot;&gt; A primeira labirinto 5 era circular. No entanto, por vezes, ratinhos (particularmente aqueles com lesões no hipocampo) parece não notar o tubo de saída aberta. Um desenho octogonal, com os tubos de saída colocados nos cantos, de modo a atrair o atenção dos ratinhos, melhorou grandemente este problema. No entanto, a taxa de erro no desempenho possibilidade seria 4/trial, em oposição a 6/trial com o desenho circular 12 de tubo. Portanto, um pool de dodecagonal é agora utilizada com 11 e um falso verdadeira saída definido nos ângulos feitos pelos cruzamentos das paredes. 1.1. Evolução e características das piscinas infantis Mc 1, uma piscina circular 85 centímetros de diâmetro, com 12 verdadeiro / falso saídas (Figura 1). Mc 2, uma piscina octogonal 86 centímetros de diâmetro, com oito verdadeiro / falso saídas definidas nos cantos. Mc 3, um (12 lados) piscina dodecagonal 120 centímetros de diâmetro, com 12 true / false exit definido no milhores (Figura 4). Em todos os itens acima (ea remar Y-maze, veja abaixo) os tubos de saída foram 40 mm de diâmetro. No entanto, foi detectada ocasionalmente, que os ratinhos foram relutantes em introduzir estes, e o desempenho do controlo no labirinto Y-se, por vezes, depois de mergulhar que tinham reagido bem. Assim, e considerando quão prontamente eles entraram no aparelho buraqueira (ver publicação JOVE &quot;Avaliando construção de galerias, construção do ninho e acumulação em ratos&quot;), ainda que os orifícios de saída no labirinto Barnes são 50 mm de diâmetro, foi considerado se 40 milímetros era muito pequeno. Um teste foi realizado na gaiola de seis ratinhos C57BL / 6. (Parecem mais pronto para entrar em 40 tubos de milímetro a gaiola de origem presumivelmente como o stress é menor do que em uma parte do aparelho, de modo a fazer o teste da gaiola de origem iria minimizar as diferenças de entrada se os tubos foram ligeiramente menores aversivo, tornando o testar mais conservador). Dois tubos de 40 milímetros e dois tubos de 50 mm foram colocados no chão em umpadrão alternado. Como previsto, houve mais entradas para tubos de 50 mm (28 entradas) de 40 mm (nove entradas). Portanto, testes piloto são planejadas em um novo Y-labirinto com tubos de saída de 50 milímetros, se esta for bem sucedida dos antigos tubos de 40 milímetros na piscina dodecagonal e remar Y-maze serão substituídos por novos 50 milímetros queridos. Como a piscina infantil, remando Y-maze e novidade Y-maze espacial são todos os testes espaciais, contando com a sala de pistas que o mouse enxerga através das paredes transparentes do aparelho, o quarto deve ser bem decorado com sinais distintos (por exemplo, prateleiras, Os armários, as formas de plástico preto nas paredes). 2. Executando a Piscina Infantil <ol><li> Coloque um rato no centro da piscina de frente para um dos quatro posições no perímetro (9, 12 ou 3:00 se o tubo de escape é de 6 horas). A colocação é semi-aleatórios, um máximo de três tentativas consecutivas pode ser na mesma direcção. Isto pode ser difícil de alcançar na prática, porque, comoaprendizado prossegue os ratos tendem a orientar-se para a saída correta, como eles são rebaixados para a piscina pela cauda. Se fizerem isso, também deve ser feita nenhuma tentativa de forçá-los na posição planejada, uma vez que são simplesmente demonstrando aprendizado. </li><li> Liberá-los quando eles estão um pouco acima da água, como então eles caem e instantaneamente saber que eles não estão mais sendo realizada. Lentamente, liberando-os resultados neles lutando para libertar-se e isso pode prejudicar a orientação inicial. Isto também se aplica a remar Y-maze. </li><li> Comprimento máximo de julgamento é de 60 segundos. Se o mouse não consegue escapar até então, guiá-lo manualmente para a saída usando um par de remos perspex claro, cada uma medindo cerca de 30 x 20 cm. As medidas tomadas são o tempo para encontrar a saída (definição: toda a cabeça dentro do tubo) e erros. Erros foram definidos como vem dentro do comprimento de uma cabeça de um tubo (incluindo o real saída). Passando por perto a verdadeira saída, sem entrada, geralmente ocorre infrequently após os primeiros ensaios. Apesar de um caso pode ser feito que este é um problema, uma visão alternativa é que os ratos com deficiência na cognição espacial fazer isso, porque eles não sabem que há uma saída por aí. Controles sei, e, portanto, investigar mais detalhadamente. Um limite máximo de 11 ensaios / erros é imposto sobre o número de erros na análise, para impedir que muita inclinação dos dados. Isso mitigar contra um déficit, sendo encontrado em camundongos espacialmente com deficiência, ou seja, é uma medida conservadora. Ratos que não conseguem alcançar a saída dentro de 60 segundos são atribuídos uma pontuação de 11 erros para que julgamento. Então, 60 seg vezes sempre tem 11 erros. </li></ol> 3. O Y-maze Palmatória Para simplificar o procedimento piscina infantil e do aparelho foi decidido a experimentar com a Y-maze, operado de acordo com os mesmos princípios que as piscinas infantis. O aparelho é constituído por três braços de poliestireno ou de perspex transparente, a cada 30x 8 x 20 cm. Esta é montada sobre uma base branca (Figura 7). O branco foi escolhido para maximizar a aversão a cor de chão e assim encorajar a fuga do raso (2 cm de profundidade). Como no labirinto da água, existe apenas uma verdadeira saída, com os outros dois braços, que encerra em falsas saídas têm a mesma aparência que a partir do interior do labirinto (Figura 8). Executando a remar Y-maze Coloque um rato, no final de um dos braços fechados, de costas para o centro. A sequência de braços escolhido como a posição de partida é definida por uma sequência de semi-aleatórios, não mais do que três tentativas consecutivas com a mesma posição, e um número igual de os braços esquerdo e direito. Cada prova tem a duração de 60 segundos. Se o rato não consegue sair (cabeça inteira no tubo de saída) dentro deste tempo incentivar a entrar no braço com o auxílio de uma peça de perspex transparente. A base do braço de saída está bloqueada pelo perspex e permitiu o rato para a saída encontra por si só, istodeve incentivar a aprendizagem melhor do que empurrá-lo para a direita no tubo. Mas isso pode ser necessário recorrer a se o rato é relutante para entrar no tubo depois de 15 seg. Tomar medidas do tempo total para sair eo número de erros (corpo inteiro sem cauda entra em um braço blind). Marcando a remar Y-maze Existem duas definições de um ensaio correcto: em primeiro lugar, uma em que o rato encontra a saída em &lt;60 seg e não faz entradas nos braços cegos, com erros ser marcado, se os braços cegos são inseridos e / ou se a saída não se encontra dentro de 60 seg. Esta análise confunde falhas para começar a mover-se com erros de entradas nos braços. Em segundo lugar, uma análise experimental que enfatiza a capacidade cognitiva pode ser realizada através da exclusão, para cada rato, todos os ensaios em que o rato não deixou o braço de início dentro de 60 segundos (ou seja, excluir todos os 0 60 pontos), em seguida, calcular a% de acerto da restantes ensaios. 4. Dois tipos de Y-mazeCombinado 1. Aparelho Ao construir um tanque Y-maze, é útil para incorporar duas portas para permitir que ele seja executado como um (a seco) espacial novidade experimento memória 6 (Figura 13). Uma porta de guilhotina transparente cobre o orifício de saída na parede de extremidade do braço de saída, enquanto uma porta de guilhotina opaco pode ser inserido para vedar de um braço do outro dois durante a fase de recolha de amostras do ensaio. É importante que os corredores para essas portas não estão ao alcance dos ratos, caso contrário, eles podem desviar sua atenção, porque eles parecem possíveis rotas de fuga. Idealmente devem estender 7 centímetros para baixo a partir do topo da parede do labirinto. 2. Set-up Coloque um (0.5 cm) de camada fina de madeira de material de cama de chip no chão do Y-maze. Este é redistribuído entre as duas fases de teste para os ratos individuais, e entre ratos. Para as melhores práticas, para tornar o ambiente olfativo more semelhante para os primeiros contra subseqüente ratos, colocar um ou dois ratos não-experimentais no labirinto por alguns minutos antes do experimento começa. 3. Procedimento Com o braço de saída bloqueada pela porta opaca e seu orifício de saída bloqueado pela porta transparente, colocar o rato no braço de início (um dos dois braços não-saída do labirinto) e permitir que ele explore durante 5 min. Em seguida, removê-lo, levantar a porta opaco para permitir o acesso a todos os três braços, substituí-lo no braço do início e observá-lo durante 2 min. Observe que o número de entradas e o tempo despendido em cada braço. Camundongos de controle deve se lembrar que os primeiros dois braços, e passar mais tempo no braço anteriormente inacessíveis.

<ol>
	<li>Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+deficits+associated+with+senescence:+a+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat.">Memory deficits associated with senescence: a neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 93, 74-104 (1979).</li><li>Blizard, D. A., Cousino Klein, L., Cohen, R., McClearn, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Mouse-Friendly+Cognitive+Task+Suitable+for+Use+in+Aging+Studies.">A Novel Mouse-Friendly Cognitive Task Suitable for Use in Aging Studies.</a> Behav. Genetics. 33, 181-189 (2003).</li><li>Deacon, R. M. J., Cholerton, L. L., Talbot, K., Nair-Roberts, R. G., Sanderson, D. J., Romberg, C., Koros, E., Bornemann, K. D., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+and+-independent+behavioral+deficits+in+Tg2576+mice.">Age-dependent and -independent behavioral deficits in Tg2576 mice.</a> Behav. Brain Res. 189, 126-138 (2008).</li><li>Deacon, R. M. J., Bannerman, D. M., Kirby, B. P., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+cytotoxic+hippocampal+lesions+in+mice+on+a+cognitive+test+battery.">Effects of cytotoxic hippocampal lesions in mice on a cognitive test battery.</a> Behav. Brain Res. 133, 57-68 (2002).</li><li>Deacon, R. M. J., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+impairments+of+hippocampal+lesioned+mice+in+a+paddling+pool.">Learning impairments of hippocampal lesioned mice in a paddling pool.</a> Behav. Neurosci. 116, 472-478 (2002).</li><li>Dellu, F., Mayo, W., Cherkoaoui, J., Le Moal, M., Simon, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+two-trial+memory+task+with+automated+recording:+study+in+young+and+aged+rats.">A two-trial memory task with automated recording: study in young and aged rats.</a> Brain Res. 558, 132-139 (1992).</li><li>Morris, R. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+localization+does+not+require+the+presences+of+local+cues.">Spatial localization does not require the presences of local cues.</a> Learn. Motiv. 12, 239-260 (1981).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The principles of humane experimental technique. , (1959).</li><li>Sanderson, D. J., Gray, A., Simon, A., Taylor, A. M., Deacon, R. M. J., Seeburg, P. H., Sprengel, R., Good, M. A., Rawlins, J. N. P., Bannerman, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+glutamate+receptor-A+(GluR-A)+AMPA+receptor+subunits+impairs+one-trial+spatial+memory.">Deletion of glutamate receptor-A (GluR-A) AMPA receptor subunits impairs one-trial spatial memory.</a> Behav. Neurosci. 121, 559-569 (2007).</li><li>Sunyer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barnes+maze,+a+useful+task+to+assess+spatial+reference+memory+in+the+mice.">Barnes maze, a useful task to assess spatial reference memory in the mice.</a> Protocol Exchange. , (2007).</li><li>Wahlsten, D., Rustay, N. R., Metten, P., Crabbe, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+search+of+a+better+mouse+test.">In search of a better mouse test.</a> TINS. 26, 132-136 (2003).</li></ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Em conclusão, parece remar um motivador geralmente eficaz para ratos, e evita o estresse associado com a natação em águas profundas. Remover o comprimento do percurso e medidas de tempo de fuga no labirinto de água de Morris, a taxa de erro no tanque para ratos lesionados hipocampo permaneceu constante durante todo o período de treino de 5, de modo que este representa uma medida da memória espacial pura, ao contrário de se escapar do tempo ou caminho comprimento, que ambos diminuem à medida que os ratos se familiarizar com os elementos não-espaciais da tarefa. A medida erros também proporciona uma maior magnitude de diferença entre camundongos deficientes e controles (por exemplo, hipocampo lesionado). Na publicação original, foram realizados testes de sonda para verificar se os ratos foram realmente usando pistas espaciais 5. Na sonda 1, o labirinto foi feito rodar 120 °, mas a localização geográfica do tubo de escape permaneceu a mesma que na formação. Desempenho manteve-se praticamente inalterada. Na sonda 2, semelhante ao ensaio de extinção padrão no labirinto de Morris, o tubo de saída foi bloqueada. O tempo despendido no quadrante de treino no labirinto, onde o tubo de saída foi localizada anteriormente, foi de 50% para ratos de controlo, 25% para os ratos com lesões do hipocampo. Num terceiro ensaio de sonda em que a posição do tubo de saída foi mudado, os controles de novo passado mais tempo no quadrante de treino inicial. Estes testes com sondas confirmou que os ratos não foram utilizando pistas intramaze mas foram guiados pelas pistas espaciais no laboratório externa para o labirinto. Essa falta de influência de pistas intramaze coloca o tanque em vantagem sobre o labirinto de Barnes. Apesar de não ter tentado ratos em labirintos remar, isso pode ser possível, embora possa ser uma vantagem para fazer a água mais fria do que a 20-25 ° C, normalmente usado no labirinto Morris. No entanto, uma vez que os seus corpos não ser imerso na água, tal não deve ter efeitos adversos de bem-estar.

Os Morris e Barnes Mazes Desde os primórdios da psicologia experimental, estudos de aprendizagem animal confiaram pesadamente em labirintos, geralmente construído de madeira opaca ou metal. Inevitavelmente, devido às habilidades olfativas extraordinários de roedores, muitos estudos utilizando-los foram comprometidos de alguma forma, quando o experimentador se que ele / ela tinha conseguido ensinar um animal a discriminação visual ou posição, o rato ou o rato tinha de fato sido principalmente usando olfacto para resolver o problema. Este é sintetizado pela controvérsia sobre se os ratos com lesões no hipocampo podem executar tarefas de memória de referência espacial, discutidos em detalhes em 2002 4. Essencialmente, David Olton e colegas, para além do início do trabalho com o labirinto radial, não parecem ter sempre rodado sistematicamente os labirintos. Isto levou ao hipocampo animais lesionados resolver a tarefa, presumivelmente através de pistas de odor e que fezach braço distintivo. Em Oxford, a (naturalmente) rato cego já foi observado em um labirinto radial de seis braço. Ele deixou seu braço de início e virou à direita. Em seguida, ele atravessou o centro e escolheu o braço oposto. Posteriormente, caiu em uma estratégia estereotipada de sempre virar à direita, mas quando se re-encontrou a base do primeiro braço que tinha entrado, demorou um momentâneo cheirar ele (~ 0,2 seg), então rejeitou e mudou-se para o próximo braço. Se a informação olfativa numa única visita pode ser lembrado, é claro que durante o teste de tentativas repetidas sobre um labirinto estático com o mesmo braço sempre iscado conduziria a uma associação forte com a recompensa olfactivos, e aprendizagem seria facilmente ocorrer mesmo se a lesão impedido qualquer puramente aprendizagem espacial. Problemas como esses foram o estímulo para Morris a desenvolver o seu labirinto de água 7, a água não iria fornecer pistas olfativas localizadas constantes. O tanque é essencialmente um híbrido entre a tradiçãolabirinto aquático internacional desenhado por Morris 7 e seco Barnes um labirinto. No labirinto de água de Morris, os banhos dos animais em águas profundas, a fuga a partir do qual a água é rasa cobrindo uma plataforma submersa localizada ligeiramente no sentido do centro do labirinto. No labirinto Barnes, o animal é colocado sobre uma plataforma circular (seco) com orifícios de saída em torno da periferia, dos quais apenas um de escape oferece a uma caixa colocada por baixo. O uso de remar como uma fuga motivador surgiu de problemas relatados ao número desproporcional de algumas linhagens de camundongos transgênicos não conseguiu nadar corretamente no labirinto de Morris. Eles nem mergulhou ou passivamente flutuava 11. Uma vez que esta pode representar uma resposta ao estresse relacionado, foi fundamentado que a redução da água a uma profundidade rasa pode ser suficiente para superar este problema, o que de fato aconteceu. Decidiu-se também para permitir o escape de um tubo seco fixado no lado do aparelho, em vez de à água superficial que cobre uma plataforma. EsteSeria uma resposta de fuga mais &quot;natural&quot;, e aumentar a componente espacial do teste, uma vez que uma grande parte do aprendizado inicial no labirinto Morris é processual, os animais devem primeiro superar sua tendência inata para nadar ao longo das paredes do labirinto antes aprendizagem espacial pode começar. O labirinto Barnes também podem sofrer de animais não estão sendo suficientemente motivados para escapar da plataforma circular 10,11.

shallow water (paddling) variants of water maze tests in mice

Quando Richard Morris concebeu seu labirinto de água de 7 em 1981, a maior parte do trabalho comportamental foi feito em ratos. No entanto, a maior compreensão da genética do rato levou à rato tornando cada vez mais importante. Mas os pesquisadores descobriram que algumas linhagens de camundongos mutantes eram propensos a problemas como passivamente flutuante ou mergulho quando eles foram testados no labirinto de água Morris 11. Este foi surpreendente considerando seu habitat natural; ratos nadar naturalmente (classicamente, o &quot;rato de esgoto&quot;), enquanto que camundongos evoluíram nas áreas secas da Ásia central. Para superar estes problemas, foi examinado se as águas rasas seria um estímulo suficiente para proporcionar uma evacuação motivação para ratinhos. Isto também evitar os problemas de secagem das pequenas criaturas com uma toalha e, em seguida, colocá-los em uma câmara de recuperação para evitar a hipotermia aquecida, o que é um problema muito mais grave do que com os ratos, a grande proporção de área de superfície para volume de um rato torna que particular vulneráveis ​​à perda de calor rápida. Outra consideração é se a estratégia de fuga mais natural pode ser utilizado para facilitar a aprendizagem. Uma vez que os animais que caem na água e nadar para longe da segurança da praia são susceptíveis de transmitir seus genes, os animais evoluíram uma tendência natural para nadar para a borda de um corpo de água. O labirinto de água de Morris, no entanto, requer a nadar até uma plataforma escondida na direcção do centro do labirinto - exactamente oposto ao comportamento evoluiu. Por conseguinte, o labirinto tanque deve incorporar fuga para a borda do aparelho. Esse recurso, juntamente com o uso de água relativamente não-aversivo rasa, incorpora o aspecto de &quot;refinamento&quot; dos &quot;3 Rs&quot; de Russell e Burch 8. Vários tipos de cartão labirinto foram provados; característica comum é que a água estava sempre raso (2 cm de profundidade) e a fuga era através de um tubo de perfuração da parede transparente do aparelho. Outros tubos (&quot;falsa saídas &quot;) também foram colocados em torno das paredes, mas estes foram bloqueadas. partir do interior do labirinto todos os falsos saídas e o único verdadeiro saída parecia igual. Actualmente dodecagonal um labirinto (12 lados) está em uso em Oxford, com 12 verdadeiro / falso sai definir nos cantos. Em um recente desenvolvimento de um remar Y-maze transparente foi testado com sucesso.

<html> As lesões do hipocampo prejudicar grandemente a aprendizagem no tanque 5. Usando um Y-maze remo, um défice dependente da idade foi demonstrada em 10 e 14, mas não a 3 meses de idade (ratinhos Tg2576 um modelo de amilóide a sobre-expressão). Idade (21 meses) ratos controle também se apresentou mal 3. Um experimento de memória novidade espacial correr no seco Y-maze revelou deficiências em camundongos com knockout do glutamato (GluR-A) subunidades dos receptores AMPA-A 9. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig1.jpg" /> Figura 1. Um rato no Mc 1 tanque circular. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig2.jpg" /> Figura 2. O rato encontra o tubo de saída do tanque. Figura 3 &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/2608/2608fig3.jpg &quot;/&gt; Figura 3. Rato O escape para o tubo de saída. O tubo é então separado do labirinto e o rato devolvido à sua gaiola de origem. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig4.jpg" /> Figura 4. Um rato na piscina infantil dodecagonal. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig5.jpg" /> Figura 5. Um rato prestes a cometer um erro, uma vez que se aproxima de uma falsa saída. <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig6.jpg" /> Figura 6. Um erro é cometido, como o nariz do rato vem a uma distância de um chefe de uma falsa saída. A verdadeira saída está à sua direita, com o tubo de saída conectado. Figura 7. Uma remar Y-maze. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig8.jpg" /> Figura 8. Pormenor da extremidade do braço de saída do Y-maze. Uma calha em forma de U pouco profunda adjacente ao orifício de saída na parede de extremidade. Isto suporta o tubo de saída, mostrada abaixo do apoio na imagem acima. O tubo de saída pode ser removida do apoio para levar o rato volta à sua gaiola de origem. Todos os braços estão equipadas com uma parede de extremidade esta configuração, mas apenas o braço tem um orifício circular em corte para permitir o escape. <img alt="Figura 9" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig9.jpg" /> Figura 9. Um rato em um beco sem saída do tanque Y-maze. <img alt="Figura 10" src = &quot;/ files/ftp_upload/2608/2608fig10.jpg&quot; /&gt; Figura 10. O rato encontra o tubo de saída. <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig11.jpg" /> Figura 11. Um rato, depois de ter escapado do remar Y-maze, espera para ser devolvido à sua gaiola. <img alt="Figura 12" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig12.jpg" /> Figura 12. Mice geralmente pode ser invocado para ficar no tubo, enquanto eles são levados de volta para sua gaiola casa nas proximidades. <img alt="Figura 13" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig13.jpg" /> Figura 13. Combinando um Y-maze remar com uma configuração Y-maze novidade espacial. Uma porta de guilhotina opaco é inserida uma lâmina na extremidade proximal de um dos braços, e uma guilhotina transparenteselos de porta fora do orifício de saída.

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Shallow Water Paddling Variants of Water Maze Tests in Mice

Ratos<em&gt; Pode</em&gt; Nadar, mas muitas cepas parecem encontrar esta atividade estressante. Para ultrapassar este problema labirintos foram concebidas onde escapar água rasa é usada para motivar o comportamento. Estes têm sido demonstrados para apoiar a aprendizagem pelo menos tão bom como o labirinto tradicional e amplamente utilizado de água de Morris.

Água (Palmatória) Variantes de água rasa testes de labirinto em ratos

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

Shallow Water (Paddling) Variants of Water Maze Tests in Mice

23.3K visualizações.  University of Oxford. Ratos Pode Nadar, mas muitas cepas parecem encontrar esta atividade estressante. Para ultrapassar este problema labirintos foram concebidas onde escapar água rasa é usada para motivar o comportamento. Estes têm sido demonstrados para apoiar a aprendizagem pelo menos tão bom como o labirinto tradicional e amplamente utilizado de água de Morris.

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Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food deprivation, and may introduce scent cue confounds. The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs. Specifically, subjects are required to avoid the arms previously used for escape during each testing day (working memory) as well as avoid the fixed arms, which never contain escape platforms (reference memory). Re-entries into arms that have already been used for escape during a testing session (and thus the escape platform has been removed) and re-entries into reference memory arms are indicative of working memory deficits. Alternatively, first entries into reference memory arms are indicative of reference memory deficits. We used this maze to compare performance of rats with neonatal brain injury and sham controls following induction of hypoxia-ischemia and show significant deficits in both working and reference memory after eleven days of testing. This protocol could be easily modified to examine many other models of learning impairment.

The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs.

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

Comportamento

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a significant public health concern, particularly in children. Both of these conditions are highlighted by the repeated expression of meaningless behaviors. Individuals with OCD often show checking, frequent hand washing, and counting. Children with ASDs also engage in repetitive tapping, arm or hand flapping, and rocking. These behaviors can vary widely in intensity and frequency of expression. More intense forms of repetitive behaviors can even result in injury (e.g.&#160;excessive grooming, hand washing, and self-stimulation). These behaviors are therefore very disruptive and make normal social discourse difficult. Treatment options for repetitive behaviors in OCD and ASDs are somewhat limited and there is great interest in developing more effective therapies for each condition. Numerous animal models for evaluating compulsive-like behaviors have been developed over the past three decades. Perhaps the animal models with the greatest validity and ease of use are the marble burying test and the nestlet shredding test. Both tests take advantage of the fact that the target behaviors occur spontaneously in mice. In the marble burying test, 20 marbles are arrayed on the surface of clean bedding. The number of marbles buried in a 30 min session is scored by investigators blind to the treatment or status of the subjects. In the nestlet shredding test, a nestlet comprised of pulped cotton fiber is preweighed and placed on top of cage bedding and the amount of the nestlet remaining intact after a 30 min test session is determined. Presently, we describe protocols for and show movie documentation of marble burying and nestlet shredding. Both tests are easily and accurately scored and each is sensitive to small changes in the expression of compulsive-like behaviors that result from genetic manipulations, disease, or head injury.

Disease, head injury, genetic modifications, and treatment of mice with drugs can have profound effects on behavior. Utilizing well-characterized and validated approaches such as marble burying and nestlet shredding, compulsive-like behaviors can be documented accurately in mice as models of human obsessive-compulsive disorder and autism spectrum disorder.

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of the most commonly used platforms to measure behaviors in animal models. It is a fast and relatively easy test that provides a variety of behavioral information ranging from general ambulatory ability to data regarding the emotionality of the subject animal. As it relates to rodent models, the procedure allows the study of different strains of mice or rats both laboratory bred and wild-captured. The technique also readily lends itself to the investigation of different pharmacological compounds for anxiolytic or anxiogenic effects. Here, a protocol for use of the open field maze to describe mouse behaviors is detailed and a simple analysis of general locomotor ability and anxiety-related emotional behaviors between two strains of C57BL/6 mice is performed. Briefly, using the described protocol we show Wild Type mice exhibited significantly less anxiety related behaviors than did age-matched Knock Out mice while both strains exhibited similar ambulatory ability.

A protocol is provided to use an Open Field Maze to access general locomotor activity, anxiety and emotionality in a laboratory mouse model.

A utilização do campo aberto Maze medir Locomotor e Ansiedade-like Comportamento no Mice

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris Water Maze Teste: Otimização para Mouse e Strain Testing Ambiente

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for examining how rats learn to use a place- or response-learning to successfully navigate in an open-field arena. Additionally, this protocol describes how the OFTM differs from other behavioral maze paradigms that are commonly used to study spatial learning in rodents. The OFTM described in this article was adapted from the one previously described by Cole, Clipperton, and Walt (2007). Specifically, the OFTM was created to test spatial learning in rodents without the experimenter having to consider how &#8220;stress&#8221; might play a role as a confounding variable. Experiments have shown that stress-alone can significantly affect cognitive function1. The representative results section contains data from an experiment that used the OFTM to examine the effects of estradiol treatment on place- and response-learning in adult female Sprague Dawley rats2. Future studies will be designed to examine the role of the hippocampus and striatum in place- and response-learning in the OFTM.

The Open-field Tower Maze (OFTM) is a maze created to study the behavioral and neural mechanisms of spatial learning (e.g., place- or response-learning) in rats. This maze is especially useful for experimenters who want to use a non-stressful maze paradigm to investigate spatial learning in their research.

Coloque e Aprendizagem Response no Open-campo Torre Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods require saccharin/sucrose fading, water deprivation and/or extended training to initiate operant responding in rats. This paper describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol that is convenient for experimenters and does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading, thus eliminating the potential confound of using sweeteners in ethanol operant self-administration studies. With this method, Wistar rats typically acquire and maintain self-administration of a 20% ethanol solution in less than two weeks of training. Furthermore, blood ethanol concentrations and rewards are positively correlated for a 30 min self-administration session. Moreover, naltrexone, an FDA-approved medication for alcohol dependence that has been shown to suppress ethanol self-administration in rodents, dose-dependently decreases alcohol intake and motivation to consume alcohol for rats self-administering 20% ethanol, thus validating the use of this new method to study the reinforcing properties of alcohol in rats.

This protocol describes a novel and efficient method to quickly initiate operant responding for ethanol in rats that, contrary to standard methods, does not require water deprivation or saccharin/sucrose fading to initiate responding.

Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

A Protocol of Manual Tests to Measure Sensation and Pain in Humans

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study demonstrates a quantitative sensory testing protocol using techniques to measure tactile sensation and pain threshold for pressure and heat using portable and easily accessed equipment. These techniques and equipment are ideal for new laboratories and clinics where cost is a concern or a limiting factor. We demonstrate measurement techniques for the following: cutaneous mechanical sensitivity on the arms and legs (von-Frey filaments), radiant and contact heat sensitivity (with both threshold and qualitative assessments using the Visual Analog Scale (VAS)), and mechanical pressure sensitivity (algometer, with both threshold and the VAS). The techniques and equipment described and demonstrated here can be easily purchased, stored, and transported by most clinics and research laboratories around the world. A limitation of this approach is a lack of automation or computer control. Thus, these processes can be more labor intensive in terms of personnel training and data recording than the more sophisticated equipment. We provide a set of reliability data for the demonstrated techniques. From our description, a new laboratory should be able to set up and run these tests and to develop their own internal reliability data.

The goal of this procedure is to demonstrate a battery of quantitative techniques for sensory and pain measurement in humans. The equipment and techniques described are commonly found in pain clinics or are easy to obtain.

Um protocolo de testes manuais para medir Sensation e a dor em humanos

Numerous qualitative and quantitative techniques can be used to test sensory nerves and pain in both research and clinical settings. The current study ...

Battery of Behavioral Tests Assessing General Locomotion, Muscular Strength, and Coordination in Mice

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects and outcomes that a particular disease or treatment has on the animal&#39;s wellbeing and health. There are numerous behavioral tests that may be applied. We selected a test for general locomotion, the open field test (OFT); a test for muscular strength, the mesh test (MT); and a test for coordination, the rotarod test (RR). Testing can be accomplished on a weekly or monthly basis. As a test for general locomotion, the OFT works by objectively monitoring movement parameters while the mouse is in an open field apparatus. The field is generally a 2&#39; x 2&#39; box, and the movements are recorded through laser sensing or through video capture. The mouse is placed in the center of the open field and allowed to move freely for the test. The MT uses the latency for a mouse to fall off an inverted screen as a measure of muscular strength. A mouse is placed on a screen, which is inverted over a clear box, and is timed for their latency to fall. Three trials are performed, with the best of the three trials scored for that day. A score of 60 s is the maximum time a mouse is left inverted. Mice are given a 5-min rest period between mesh test trials. Lastly, an accelerated protocol on the RR assesses motor coordination and endurance. During a trial, a mouse walks on a rotating rod as it increases in speed from 4 rpm to 40 rpm over 5 min. The trial ends when the mouse touches the magnetized pressure sensor upon falling. Each mouse undergoes three trials, and the best trial is scored for that day. This combined behavioral data allows for the global assessment of mobility, coordination, strength, and movement of the test animals. At least two out of the three behavioral testing measures must show improvement for an animal to qualify as having overall improved motor function.

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects of a disease or treatment on an animal's wellbeing. In order to globally assess motor functioning, we selected tests for general locomotion, muscular strength, and coordination: the open field test, the mesh test, and the rotarod test, respectively.

Bateria de comportamental testes de avaliação geral de locomoção, coordenação e força Muscular em camundongos

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects and outcomes that a particular disease or treatment has on the ...

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and validated for rat use. The Radial Water Tread (RWT) maze test of spatial memory (designed specifically for mice and requiring no swimming) has been shown previously to successfully distinguish between controlled cortical impact-induced TBI mice and sham controls. Here, a detailed protocol for this task is presented. The RWT maze capitalizes on the natural tendency of mice to avoid open areas in favor of hugging the sides of an apparatus (thigmotaxis). The walls of the maze are lined with nine escape holes placed above the floor of the apparatus, and mice are trained to use visual cues to locate the escape hole that leads out of the maze. The maze is filled with an inch of cold water, sufficient to motivate escape but not deep enough to require that the mouse swim. The acquisition period takes only four training days, with a test of memory retention on day five and a long-term memory test on day 12. The results reported here suggest that the RWT maze is a feasible alternative to rat-validated, swimming-based cognitive tests in the assessment of spatial memory deficits in mouse models of TBI.

Here we present a protocol for a mouse-specific test of cognition that does not require swimming. This test can be used to successfully distinguish controlled cortical impact-induced traumatic brain injury mice from sham controls.

Avaliando a insuficiência da memória espacial em um modelo de mouse de lesão cerebral traumática usando um labirinto de roda de água radial

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. The Barnes maze can also assess other mouse behaviors, such as general motivation to escape from the maze platform and exploratory behavior. The Barnes maze can measure whether a genetic mutation or environmental variable can impact the acquisition and retention of spatial memories, as well as provide information about the search strategy employed by the mice. Here we use the Barnes maze to detect a memory deficit in adult mice following a single developmental ethanol exposure event. The newly described Damsel-in-Distress paradigm exposes a male mouse to a female mouse trapped in a chamber in the open center field of the arena. It provides an opportunity for the mouse to socially respond to the trapped female and exhibit prosocial behavior. The Damsel-in-Distress paradigm can also be used to examine mouse behavior in a novel arena and measure locomotor activity. Both the Barnes Maze and the Damsel-in-Distress protocols require minimal financial investment and most aspects of the tests can be constructed from common lab supplies. These flexible and accessible tools can also be used to detect behavioral changes over the course of development.

This protocol measures spatial learning and memory using the Barnes maze. A novel Damsel-in-Distress paradigm is used to assess locomotor activity and prosocial behavior in mice.

Analisando a aprendizagem espacial e comportamento pró-social nos ratos usando o labirinto de Barnes e paradigmas de donzela em apuros

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. ...