A doença cardíaca isquemia é uma das principais causas de morte no mundo. Esse procedimento pode ser realizado para induzir lesão de isquemia-reperfusão no coração. Este protocolo consiste em ligar a LAD de forma precisa, segura e consistente.
Para preparar bolas de algodão molhadas salinas, aperte uma pequena porção de algodão estéril e enrole-a repetidamente para formar uma bola. Mergulhe as bolas de algodão em soro fisiológico 0,9% estéril e esprema o excesso de soro fisiológico. Guarde as bolinhas de algodão em caixa limpa esterilizada com etanol 75%.
Para preparar ganchos de contenção, esterilize clipes e elásticos com etanol 75%. Para preparar uma alça de ligadura, coloque o meio de um ponto de seda 7-0 no olho de mola de três tamanho de meio círculo de uma agulha cirúrgica cônica não enfaixada. Para preparar um controlador de laço de laço, corte um tubo de polietileno 10 de cinco milímetros usando uma tesoura.
Em seguida, para o experimento, anestesiar um rato macho Sprague Dawley de oito semanas de idade e verificar os reflexos beliscando a cauda e as patas traseiras. Em seguida, abra o tecido entre os dois anéis de cartilagem abaixo da glote usando tesoura e insira um tubo de polietileno 50 de três centímetros para atuar como um tubo endotraqueal. Conecte o tubo endotraqueal a um ventilador.
Toque o tórax e encontre o manúbrio e o ângulo esternal. Em seguida, identifique a costela do lado esquerdo que se conecta com o ângulo esternal. Identifique o espaço intercostal abaixo da costela A.Use pinças de ponta fina para levantar suavemente a pele perto do espaço intercostal.
Em seguida, use uma tesoura para criar uma incisão oblíqua de um centímetro ao longo das linhas de tensão da pele a partir do ponto aproximadamente cinco milímetros à esquerda do corpo esternal. Separe as camadas de pele e músculo da incisão usando tesoura. Em seguida, prenda as camadas musculares fora da parede torácica anterior esquerda para baixo com clipes dobrados para expor as costelas abaixo.
Depois de identificar a costela B abaixo da costela A, corte a costela B com uma tesoura romba do meio da cartilagem da costela. Toque suavemente e comprima a ferida com uma bola de algodão molhada de soro fisiológico por vários segundos se ocorrer sangramento. Em seguida, prenda os quatro clipes dobrados ao músculo intercostal e às costelas para espalhar suavemente a parede torácica em quatro direções e crie uma janela cirúrgica retangular para abrir o tórax cuidadosamente a partir do corte da costela B.Hook suavemente contra o pulmão esquerdo e tecidos adjacentes cobrindo o pericárdio com outro clipe dobrado para evitar danos acidentais ao tecido durante o procedimento.
Expor o coração removendo o pericárdio fino com pinças. Em seguida, identifique o primeiro ramo do tronco da coronária esquerda, ou TCE, entre a artéria pulmonar e a aurícula esquerda. Usando uma agulha cirúrgica, crie uma alça de ligadura aberta inserindo e passando o ponto de seda sob a DAE em um local imediatamente distal ao primeiro ramo do TCE na direção da esquerda para o lado direito da DAE para evitar a punção acidental da aurícula esquerda.
Se a DAE for invisível por causa do líquido ou sangue que cobre a superfície do coração, esfregue suavemente a superfície do coração para visualizar as artérias coronárias. Insira as duas extremidades da sutura de seda de um lado da alça aberta no círculo do outro lado para formar uma alça de laço. Em seguida, insira as duas extremidades da sutura de seda da alça de laço no controlador de laço preparado antes de fechar a alça.
Deslize o controlador de laço de laço ao longo da sutura de seda enquanto estica suavemente a seda para fechar o laço de laço. Cessar o fluxo coronariano da DAE para induzir isquemia miocárdica por uma hora. Uma vez que o laço tenha sido amarrado com segurança, segure a seda para fixar a posição do controlador de laço com pinças Kelly.
Coloque a outra extremidade da pinça Kelly sobre a mesa cirúrgica. Cobrir a janela cirúrgica com algodão úmido soro fisiológico durante a ligadura do DAD. Abra a pinça de Kelly e solte o controlador de alça de laço para reperfusão do fluxo coronariano por duas horas.
A validação da qualidade da ligadura da LAD com o azul de Evans é mostrada. O miocárdio com perfusão coronariana foi corado de azul em comparação com uma região não perfundida, que permaneceu vermelha. Uma baixa variação na área de risco, ou porcentagem de AAA entre os animais do estudo, indicou a localização precisa da ligadura da DAD.
Além disso, o tamanho do infarto foi estimado como a razão entre a área do infarto e o RAA nos grupos controle e tratado. A porcentagem de tamanho do infarto do grupo de tratamento é menor do que a do grupo de ligadura controlada da LAD. Essa técnica abre caminho para que os pesquisadores explorem novas abordagens terapêuticas contra a doença cardíaca isquêmica.
