Este protocolo fornece um modelo murino de extração de molares mandibulares que raramente é introduzido nos estudos de regeneração óssea disponíveis. O desenvolvimento de um modelo murino de extração de molares mandibulares é necessário como uma mandíbula mais comparável e consistente entre os diferentes grupos de intervenção. As implicações dessa técnica não se estendem para o tratamento de nenhuma doença.
No entanto, pode ajudar a cicatrização clínica e regeneração óssea da mandíbula a longo prazo, ajudando a rever os mecanismos subjacentes a este processo. Esta técnica foi desenvolvida para auxiliar os estudos, revelando os mecanismos de cura e regeneração disponíveis. Lamentavelmente, este método não pode ser aplicado a outros sistemas.
Comece a eliminar a resistência distal do camundongo anestesiado segurando o molar com uma pinça medialmente. Em seguida, forçar uma agulha de calibre 23 no osso alveolar bucal da raiz distal e fazer um intervalo. Em seguida, mude para uma agulha calibre 25 para continuar a expansão do intervalo.
Progredir delicadamente em direção à área periapical enquanto gira lentamente a agulha para frente e angulosamente para pressionar a raiz para fora da fossa alveolar. Para eliminar a resistência mesial, insira uma agulha calibre 23 no garfo radicular e levante o molar de forma oclusal. Depois de segurar o molar com força, pegue outra agulha de calibre 23 e force-a na membrana periodontal mesial lingual para criar um intervalo.
Em seguida, use uma agulha calibre 25 e gire lentamente para frente e bucalmente. Se algum obstáculo subjacente impedir a luxação do molar, use uma agulha de calibre 26 para penetrar no ápice da raiz e repetir as operações. Durante a extração final, extraia o dente garantindo que a coroa se eleve acima do plano oclusal e que duas raízes intactas possam ser claramente vistas.
Depois de extrair com sucesso o primeiro molar inferior, aplique algodão seco para parar o sangramento, reposicione a língua, administre analgesia e coloque o mouse em uma almofada de aquecimento de temperatura constante até que ele se recupere da anestesia. O alvéolo dentário imediatamente preenchido com coágulo pós-extração. O processo de cicatrização do alvéolo foi observado durante uma semana.
Alguns ossos trabeculares semelhantes a esponjas foram formados, mas o coágulo permaneceu. No processo de cicatrização, o alvéolo foi preenchido com ossos esponjosos após duas semanas, indicando o término da regeneração. Um regulador mestre nas diferenciações osteoblásticas Sp7 foi amplamente expresso nas células da medula óssea na margem que é o osso formando a frente.
Sob o estado de homeostase, os ossos trabeculares eram consistentes e confluentes com blocos de células da medula óssea polvilhados como ilhas. Uma semana após a cirurgia, numerosas células Sp7 que expressavam preenchiam o alvéolo de extração com osso trabecular recém-formado espalhado ao redor. Com quatro semanas de pós-cirurgia, o quadro se reverteu e passou a se fundir em grande parte ao osso trabecular.
A atividade de Sp7 expressando células declinou para um nível próximo ao estado de homeostase. O também pode ser realizado para demonstrar o processo de regeneração do recém-nascido. Esta técnica pode ajudar os pesquisadores a desvendar os mecanismos subjacentes do processo de cura e regeneração disponíveis, fornecendo um novo modelo murino.
