АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Мы описать систему, которая использует три метода для оценки безопасности и эффективности препарата плаценты целевой доставки: в vivo imaging для мониторинга наночастиц накопления, высокочастотный ультразвук для мониторинга развития плаценты и плода и ВЭЖХ для количественного определения доставку лекарственного препарата в ткани.

Аннотация

В настоящее время нет эффективного лечения существуют для осложнений беременности, плацента связанные, и разработки стратегий для целенаправленной доставки препаратов плаценты при сведении к минимуму побочные эффекты матери и плода остается сложным. Целевые наночастиц перевозчики обеспечивают новые возможности для лечения плацентарной расстройств. Недавно мы продемонстрировали, что пептид синтетических плацентарной хондроитин сульфат A привязки (plCSA-BP) могут использоваться для руководства наночастиц для доставки препаратов плаценты. В этом протоколе, мы подробно описать систему для оценки эффективности доставки наркотиков в плаценту, plCSA-BP, которая использует три отдельных методов, используемых в комбинации: в vivo изображений, высокочастотный ультразвук (HFUS) и высокая производительность Жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Используя в естественных условиях изображений, plCSA ВР руководствуясь наночастиц были подробно освещены в плаценты живых животных, в то время как HFUS и ВЭЖХ показали, что plCSA ВР конъюгированных наночастиц эффективно и конкретно доставлен метотрексата плаценты. Таким образом сочетание этих методов может использоваться как эффективный инструмент для целенаправленной доставки препаратов плаценты и разработки новых стратегий лечения ряда осложнений беременности.

Введение

Осложнения беременности, плацента опосредованной, включая преэклампсии, потери беременности, отслойка и малые гестационного возраста (SGA), являются общими и приводят к существенной плода и материнской заболеваемости и смертности1,2, 3и очень немногие лекарства доказали быть эффективным для лечения беременность болезни4,5. Разработка стратегий для более избирательный и безопасной доставки плаценты целевой лекарств во время беременности остается сложным в современной медикаментозной терапии.

В последние годы несколько докладов были сосредоточены на целевой доставки наркотиков uteroplacental тканей наночастицами покрытие с пептидами или антител как плаценты ориентированных инструментов. К ним относятся антитела анти эпидермального фактора роста рецепторов (EGFR)6 , опухоль самонаведения пептиды (CGKRK и iRGD)7, плаценты целевой пептиды8, плацентарной пептиды, ориентированные на сосудистую9 и антител против рецепторов окситоцина10.

Здесь мы демонстрируем, что пептид синтетических плацентарной хондроитин сульфат A привязки (plCSA-BP) может использоваться для целенаправленной доставки наночастиц и их полезных препарата плаценты11. PlCSA ВР руководствуясь наночастиц дополняют сообщил uteroplacental, ориентация методы, потому что они ориентированы на плацентарный трофобласта.

Неинвазивный метод в естественных условиях изображения была использована для контроля экспрессии плаценты конкретных генов мышей12, а indocyanine Грин (ГСИ) широко используется для отслеживания наночастиц с помощью флуоресценции визуализации систем13, 14,15. Таким образом мы внутривенно вводят plCSA BP-конъюгированных наночастиц, загружен с ГСИ (plCSA-INPs) для визуализации распределения plCSA-INP в беременных мышей с флуоресцентным тепловизор. Затем мы внутривенно вводят метотрексата (MTX)-plCSA НПС загружается беременных мышей. Высокочастотный ультразвук (HFUS), другой неинвазивный, реальном времени обработки изображений инструмент16,17 был использован для мониторинга развития плода и плаценты в мышей. Наконец мы использовали высокой производительности жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для количественной оценки распределения MTX плаценты и плода.

В этом протоколе мы подробно описываются три метода система, используемая для оценки эффективности препарата плаценты целевой доставки plCSA ВР руководствуясь nanocarriers.

протокол

Все эксперименты строго следовал протоколы мыши (SIAT-IRB-160520-YYS-FXJ-A0232) утверждена животное уход и использование Комитета из Шэньчжэнь передовых технологических институтах, Китайской академии наук.

1. синтеза наночастиц A-целевой липидов полимер плацентарной хондроитин сульфат

  1. Синтезировать MTX-ГСИ загружены и липидов полимер наночастиц (MNPs и ИНПС соответственно) и plCSA ВР конъюгированных наночастиц (plCSA-MNPs и plCSA-INPs), как описано в разделе подробно других18.

2. в естественных условиях Imaging флуоресцирования

  1. Подготовка беременных мышей
    1. Место самок мышей CD-1 (8-12 недель) с плодородные мужчин же штамма в одной клетке (мужчины: женщины = 1:2) в послеобеденное время и проверить вагинальные пробки следующее утром. Если наблюдается Вагинальные вилка, определите мыши как эмбриональные день 0,5 (E0.5).
    2. Дом беременных мышей только в комнате возбудителя бесплатный животных с 14 h свет/10 h темные цикл и обеспечивать свободный доступ к продовольствию и воде до E14.5.
  2. Внутривенные инъекции наночастиц
    1. Перед процедурой стерилизуйте наночастиц путем фильтрации через фильтр шприц 0,22 мкм. Весят беременных мыши на E11.5, чтобы определить количество и объем впрыска наночастиц.
      Примечание: Объем впрыска наночастиц должна быть менее 1% (объем/вес) массы тела беременной мыши. Например объем впрыска наночастиц должно быть меньше 0,25 мл в 25 g мышь.
    2. Чтобы разбавить хвост вен, теплый хвост на 5-10 мин с грелку.
    3. Перед инъекцией аспирационная INPs или plCSA-INPs в шприц 28 g инсулина.
    4. Передать удерживающее устройство, что сдерживает мыши позволяя доступ к хвост Вену беременных мыши. Очистите хвост с спиртом. Затем вставьте шприц в Вену хвост. Медленно вводить INPs или plCSA-INPs (5 мг/кг эквивалент ГСИ) с даже давление над 5-10 s.
      Примечание: Остановка инъекционных если волдырь на хвост появляется потому, что этот результат указывает, что игла не в духе. Шприцы не должны распределяться между мышей для сведения к минимуму передачи болезни и перекрестного загрязнения.
    5. Запишите время впрыска. Тем временем примените нежное давление в месте инъекции до кровотечение остановится, который обычно занимает 30-60 сек.
  3. В естественных условиях изображений
    1. 30 мин после инъекции, изображение беременных мышей, используя флуоресценции в vivo изображений системы.
    2. Анестезировать беременных мышей с расходом кислорода 1,0 Л/мин и изофлюрановая на 2-4% в камеру связанного подразделения анестезии и проверьте полной анестезии, медленно и регулярного дыхания. Затем переместите их в тепловизионной камеры. Поместите наркотизированных беременных мышей в тепловизионной камеры, содержание животных в лежачем положении.
    3. Место носовой конус над рот и нос, чтобы позволить ингаляции 1-2% изофлюрановая с расходом кислорода 1,0 Л/мин для поддержания анестезии.
    4. Выберите 2D-флуоресценции и фотографические параметры изображения сигналов флуоресценции ГСИ. Воздействие на Авто и длины волны возбуждения/выбросов для 710/820 Нм.
    5. В конце процедуры обработки изображений выключите приток изофлюрановая чтобы остановить анестезии и осторожно вернуть беременных мышей в их клетках.
    6. 48 ч после инъекции наночастиц, анестезировать беременных мышей с isofluorane, а затем пожертвовать плотины шейки матки дислокации. Сбор плодов и плаценты с помощью Грефе щипцы, Грефе ткани щипцами и рассекает ножницы.
    7. Поместите плаценты и плода в тепловизионной камеры и изображение с помощью метода, описанного в шаге 2.3.4.

3. HFUS оценки эмбрионального развития

  1. Животные модели
    1. Получения и подготовки беременных мышей, как описано в шаге 2.1.
    2. Используйте HFUS для беременных мышей изображения на E 6.5 (протоколы 3.2 и 3.3.3). Во-первых, подтвердить беременность посредством визуализации эмбрионов на день E6.5, а затем случайно выделить беременных мышей на три группы: Группа МНП, Группа plCSA МНП и фосфат амортизированное saline (PBS) группы.
    3. Inject PBS, MNPs или plCSA-MNPs (1 мг/кг эквивалент MTX) в венах хвост беременных мышей каждый день, начиная с E6.5, как описано в шаге 2.2.
  2. Подготовка изображений
    1. 24 ч после инъекции наночастиц, изображение беременных мышей, с использованием системы HFUS.
    2. Анестезировать беременных мышей, как описано в шаге 2.3.2. Включите элементы управления встроенным температурным изображений платформы и Разогрейте платформы до 37-42 ° C. Закрепите беременных мышей в лежачем положении на платформе с использованием ленты.
    3. Место носовой конус, подключенных к анестезии над морду. Применение 2% изофлюрановая с расходом кислорода 1,0 Л/мин поддерживать устойчивый анестезии.
    4. Химически удалите волосы из живота с помощью депиляционный крем. Уничтожать остаточные крем тщательно марлей, смоченной водой, а затем пальто живота с акустического контакта гель.
  3. Процедура обработки изображений
    1. Место датчика 40 МГц в механической рукой.
    2. Отрегулируйте положение датчика для получения продольного изображения с области интереса, расположенных в зоне фокуса плода и плаценты.
    3. B-режим визуализации и анализа
      Примечание: Смотреть фильм 1.
      1. Нажмите кнопку B-режим и опустите преобразователя через брюшную полость до плода и плаценты прийти в поле зрения. Нажмите Сканирования/замораживания , чтобы начать/остановить изображений, нажмите фильм магазин для хранения Кинопетля и нажмите кадр хранения для хранения кадр изображения.
      2. Нажмите кнопку измерения для анализа длина гестационного мешка (GS), крестца длины плода короны (CRL), бипариетальный диаметр (БЛД), окружность живота (AC), плацентарной диаметр (PD) и толщина плаценты (PT).
    4. PW-Doppler томографии и анализа
      Примечание: Смотреть фильм 1.
      1. Используя тот же сканировать проекции, нажмите кнопку PW , поместить поле объем выборки в центре пуповинной артерии и нажмите Сканирование/замораживание инициировать изображений. Нажмите кнопку Cine хранить для сбора пуповинной артерии изображения.
      2. Нажмите кнопку измерения для вычисления скорости работы пик пуповинной артерии (UA).
    5. Цветной Допплер режим визуализации и анализа
      1. Используя тот же сканировать проекции, нажмите кнопку Цвет и отрегулировать положение датчика для получения изображений сердца плода. Нажмите кнопку Scan/замораживание инициировать изображений и Cine хранить для сбора изображений.
      2. Нажмите кнопку измерения для вычисления ЧСС плода (HR).

4. ВЭЖХ анализ

  1. Подготовка тканей
    1. Придать беременных мышей с однократной дозы MNPs или plCSA-MNPs (1 мг/кг эквивалент MTX) на поздних сроках беременности (например., E14.5) как описано в пункте 3.1.3.
    2. После 24 часов анестезировать мышей по внутрибрюшинной инъекции Авертен на 240 мкг/тела вес (г). Обеспечить никакого ответа на щепотку ноги, чтобы убедиться, что мышей полностью находятся под наркозом.
    3. Спрей области груди с 75% этанола. Выполнять сердечной перфузии (вырезать правый предсердия и perfuse через левый желудочек) как описано в деталях19,20 с 50 мл ледяной 0,9% физиологического раствора для 10 мин для удаления несвязанных наночастиц.
    4. Усыпить плотины. Выполнение операции кесарева сечения для сбора плода и плаценты, используя пинцет Грефе, рассекает ножницы и Грефе ткани щипцы и хранить тканей в-80 ° C до анализа.
    5. Готовят раствор гомогенизации (10% хлорной кислоты) и держать на льду. Собирать примерно 200 мг ткани и добавьте 500 мкл раствора гомогенизации каждого образца. Однородный примеров с использованием гомогенизатора на полной скорости для 30 s и повторите эту процедуру два раза.
    6. Центрифугуйте образцы на 14 000 × g 20 мин при 4 ° C. Через фильтр шприц 0,45 мкм фильтр супернатант (примерно 300 мкл) и передать полученную жидкость во флаконе ВЭЖХ. Поместите образец флаконов в автоматический пробоотборник лоток для инъекций.
  2. Подготовка стандартов
    1. Подготовьте следующее решение для мобильных фазы: 40 мм калия фосфат двухосновной (pH 4.5) и ацетонитриле (88: 12, v/v). Через шприц фильтр размер поры 0,45 мкм фильтр решения и передавать полученную жидкость в чистую бутылку водохранилище ВЭЖХ.
      Примечание: Настройки рН 0,1 М фосфорной кислотой. Использование ультразвуковой вибрации для 15 мин Дега мобильных фазы каждый раз до использования.
    2. Весить 10 мг MTX в пластиковых пробирок 1.5 мл. Добавьте 1 мл раствора гидроксида натрия 1 М.
    3. Вихрь на высокой скорости до тех пор, пока MTX растворяется полностью.
      Примечание: Это основной запас и может храниться при температуре-20 ° C в течение нескольких месяцев.
    4. Для создания вторичного фондовых MTX (500 мкг/мл), разбавьте 50 мкл основного фонда в 950 мкл мобильных фазы.
      Примечание: Хранить на льду до использования и готовить свежий ежедневно. Важно использовать мобильные этап для подготовки стандартов для избежания пики, обусловленные смешивание разнородных решений после инъекции образца.
    5. Сделать дальнейшего разведения для создания стандартов (Таблица 1). Хранить стандарты на льду и готовить свежий ежедневно. Выполнения стандартов серии экспериментальных образцов.
НомерКонечная концентрация (мкг/мл)Стандарт, мкл 500 мкг/млМобильные phase(μL)
10.51999
212998
32.55995
41020980
52550950
650100900
7100200800

Таблицы 1. Подготовка стандартной кривой для MTX. Конечная концентрация MTX стандартного раствора составляет от 0,5-100 мкг/мл.

  1. Оборудование ВЭЖХ и параметры операции
    Примечание: Образцы были проанализированы на ВЭЖХ системы, оснащена растворителя насоса, спектрофотометрический детектор УФ (313 нм) и столбец C18 (250 × 4.6 мм, размер частиц 5 мкм).
    1. Включите ВЭЖХ дегазатор для удаления воздуха из системы. Включите потока, equilibrating столбец с мобильных фазы для 30 минут, чтобы уменьшить шум базовых.
    2. Установите температуру столбца до 25 ° C, придать 20 мкл пример томов со скоростью потока 1 мл/мин и нажмите кнопку Выполнить метод , чтобы начать анализ.
    3. После завершения выполнения вручную измените мобильные фазы Ацетонитрил ВЭЖХ класс. Запуск приблизительно 15 мин для защиты системы.
      Примечание: Неспособность выполнить этот шаг после Рекомендуемое время может привести к повреждению столбце.
    4. Для количественного анализа расчета районы под стандартной MTX пики интерес с помощью ВЭЖХ системного программного обеспечения.

Результаты

В этой рукописи plCSA ВР конъюгированных наночастиц загружен с MTX (plCSA-MNPs) или ГСИ (plCSA-INPs) внутривенно вводили в беременных мышей. В естественных условиях изображений показал сильные сигналы ГСИ в регионе матки 30 мин после инъекции plCSA-INP. INPs главным образом были локали...

Обсуждение

В этой рукописи мы наметим систему трех метод для определения, являются ли plCSA ВР руководствуясь наночастиц эффективным инструментом для ориентации доставки препаратов плаценты. Использование в vivo imaging для мониторинга инфракрасный сигнал флуоресцентные ГСИ подтвердил плацентар?...

Раскрытие информации

Изобретателей на патентной заявки, переданную PCT/CN2017/108646, СИАТ, описывающая метод доставки плаценты конкретных наркотиков и ее применение являются X.F. и Б.З. Все другие авторы заявляют, что они имеют не конкурирующие интересы.

Благодарности

Эта работа была поддержана субсидий из национального фонда естественных наук (81771617) и естественные науки фонд провинции Гуандун (2016A030313178) присуждена X.F.; Грант от Шэньчжэнь основной исследовательский фонд (JCYJ20170413165233512) присуждена X.F; Юнис Кеннеди Шрайвер национального института здоровья ребенка и развития человеческого потенциала национальных институтов здоровья под награду номер R01HD088549 (содержание является исключительно ответственности авторов и не обязательно отражают официальной виды национальных институтов здравоохранения) для н.н.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
CD-1 miceBeijing Vital River201Female (8-12 week)
Insulin syringeBD328421for IV injection
Ethanol absoluteSinopharm Chemical10009218for nanoparticles synthesis
Soybean lecithinAvanti Polar Lipids441601for nanoparticles synthesis
DSPE-PEG-COOHAvanti Polar Lipids880125for nanoparticles synthesis
PLGASigma-Aldrich719897for nanoparticles synthesis
Ultrasonic processorSonicsVCX130for nanoparticles synthesis
Methotrexate (MTX)Sigma-AldrichV900324for nanoparticles synthesis
Indocyanine green (ICG)Sigma-Aldrich1340009for in vivo imaging
phosphate-buffered saline (PBS)HycloneSH30028.01
IVIS spectrum instrumentPerkin Elmerfor in vivo imaging
Ultrasound transmission gelGuanggongZC4252418for ultrasound imaging
IsofluraneLunan PharmaceuticalI0040for maintain the anesthesia
Depilatory creamNairTMG001for removing fur
40 MHz transducerVisualSonicsMS550Sfor ultrasound imaging
High-frequency ultrasound imaging systemVisualSonicsVevo2100for ultrasound imaging
AvertinSigma-AldrichT48402for anesthesia
Syringe pumpMindraySK-500IIIforcardiac perfusion
0.9% saline solutionMeilunbioMA0083forcardiac perfusion
1.5 mL Polypropylene tubesAXYGENMCT-150-C
-80 °C freezerThermo Fisher Scientific88600V
CentrigugeCenceH1650R
Perchloric acidSigma-Aldrich311421for precipitating protein
HomogenizerSCIENTZSCIENTZ-48for homogenizing tissue
Syringe filter (0.45 μm)MilliporeSLHV033RS01
Sodium hydroxideSinopharm Chemical10019763for solving MTX
HPLC vialsWaters670650620for HPLC
Potassium phosphate dibasicSinopharm Chemical20032117for HPLC
AcetonitrileJKchemical932537for HPLC
C18 columnWaters186003966for HPLC
HPLC systemShimadzufor HPLC

Ссылки

  1. Rodger, M. A., et al. The Association of Factor V Leiden and Prothrombin Gene Mutation and Placenta-Mediated Pregnancy Complications: A Systematic Review and Meta-analysis of Prospective Cohort Studies. PLOS Medicine. 7 (6), e1000292 (2010).
  2. Rodger, M. A., et al. Inherited thrombophilia and pregnancy complications revisited. Obstetrics & Gynecology. 112 (2 Pt 1), 320-324 (2008).
  3. Brenner, B., Aharon, A. Thrombophilia and adverse pregnancy outcome. Clinics in Perinatology. 34 (4), 527-541 (2007).
  4. Fisk, N. M., McKee, M., Atun, R. Relative and absolute addressability of global disease burden in maternal and perinatal health by investment in R&D. Tropical Medicine & International Health. 16 (6), 662-668 (2011).
  5. Fisk, N. M., Atun, R. Market failure and the poverty of new drugs in maternal health. PLOS Medicine. 5 (1), e22 (2008).
  6. Kaitu'u-Lino, T. u. J., et al. Targeted nanoparticle delivery of doxorubicin into placental tissues to treat ectopic pregnancies. Endocrinology. 154 (2), 911-919 (2013).
  7. King, A., et al. Tumor-homing peptides as tools for targeted delivery of payloads to the placenta. Science Advances. 2 (5), e1600349 (2016).
  8. Beards, F., Jones, L. E., Charnock, J., Forbes, K., Harris, L. K. Placental Homing Peptide-microRNA Inhibitor Conjugates for Targeted Enhancement of Intrinsic Placental Growth Signaling. Theranostics. 7 (11), 2940-2955 (2017).
  9. Cureton, N., et al. Selective Targeting of a Novel Vasodilator to the Uterine Vasculature to Treat Impaired Uteroplacental Perfusion in Pregnancy. Theranostics. 7 (15), 3715-3731 (2017).
  10. Paul, J. W., et al. Drug delivery to the human and mouse uterus using immunoliposomes targeted to the oxytocin receptor. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 216 (3), e281-e283 (2017).
  11. Zhang, B., et al. Placenta-specific drug delivery by trophoblast-targeted nanoparticles in mice. Theranostics. 8 (10), 2765-2781 (2018).
  12. Fan, X., et al. Noninvasive monitoring of placenta-specific transgene expression by bioluminescence imaging. PloS One. 6 (1), e16348 (2011).
  13. Murata, M., Tahara, K., Takeuchi, H. Real-time in vivo imaging of surface-modified liposomes to evaluate their behavior after pulmonary administration. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 86 (1), 115-119 (2014).
  14. Ito, A., et al. New whole-body multimodality imaging of gastric cancer peritoneal metastasis combining fluorescence imaging with ICG-labeled antibody and MRI in mice. Gastric Cancer. 17 (3), 497-507 (2014).
  15. Mazza, M., et al. Liposome-Indocyanine Green Nanoprobes for Optical Labeling and Tracking of Human Mesenchymal Stem Cells Post-Transplantation In Vivo. Advanced Healthcare Materials. 6 (21), (2017).
  16. Greco, A., et al. High frequency ultrasound for in vivo pregnancy diagnosis and staging of placental and fetal development in mice. PloS One. 8 (10), e77205 (2013).
  17. Spurney, C. F., Leatherbury, L., Lo, C. W. High-frequency ultrasound database profiling growth, development, and cardiovascular function in C57BL/6J mouse fetuses. Journal of the American Society of Echocardiography. 17 (8), 893-900 (2004).
  18. Zhang, B., et al. Synthesis and characterization of placental chondroitin sulfate A (plCSA) -targeting lipid-polymer nanoparticles. Journal of Visualized Experiments. , (2018).
  19. Devraj, K., Guerit, S., Macas, J., Reiss, Y. An In Vivo Blood-brain Barrier Permeability Assay in Mice Using Fluorescently Labeled Tracers. Journal of Visualized Experiments. (132), (2018).
  20. Beeton, C., Chandy, K. G. Isolation of mononuclear cells from the central nervous system of rats with EAE. Journal of Visualized Experiments. (10), 527 (2007).
  21. Watson, E. D., Cross, J. C. Development of structures and transport functions in the mouse placenta. Physiology. 20 (3), 180-193 (2005).
  22. Frangioni, J. V. In vivo near-infrared fluorescence imaging. Current Opinion in Chemical Biology. 7 (5), 626-634 (2003).
  23. Flores, L. E., Hildebrandt, T. B., Kuhl, A. A., Drews, B. Early detection and staging of spontaneous embryo resorption by ultrasound biomicroscopy in murine pregnancy. Reproductive Biology and Endocrinology. 12, 38 (2014).
  24. Khankin, E. V., Hacker, M. R., Zelop, C. M., Karumanchi, S. A., Rana, S. Intravital high-frequency ultrasonography to evaluate cardiovascular and uteroplacental blood flow in mouse pregnancy. Pregnancy Hypertension. 2 (2), 84-92 (2012).
  25. Phoon, C. K. Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development. Pediatric Research. 60 (1), 14-21 (2006).
  26. Pallares, P., Gonzalez-Bulnes, A. Non-invasive ultrasonographic characterization of phenotypic changes during embryo development in non-anesthetized mice of different genotypes. Theriogenology. 70 (1), 44-52 (2008).
  27. Parvani, J. G., Gujrati, M. D., Mack, M. A., Schiemann, W. P., Lu, Z. -. R. Silencing β3 integrin by targeted ECO/siRNA nanoparticles inhibits EMT and metastasis of triple-negative breast cancer. Cancer Research. 75 (11), 2316-2325 (2015).
  28. Zhang, B., et al. Targeted delivery of doxorubicin by CSA-binding nanoparticles for choriocarcinoma treatment. Drug Delivery. 25 (1), 461-471 (2018).
  29. Jenkins, D. E., et al. Bioluminescent imaging (BLI) to improve and refine traditional murine models of tumor growth and metastasis. Clinical & Experimental Metastasis. 20 (8), 733-744 (2003).
  30. Keelan, J. A., Leong, J. W., Ho, D., Iyer, K. S. Therapeutic and safety considerations of nanoparticle-mediated drug delivery in pregnancy. Nanomedicine. 10 (14), 2229-2247 (2015).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

139vivoA

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены