Надежная модель фасцио-кожного лоскута свиней для биоинженерных исследований васкуляризированных композитных аллотрансплантатов

Резюме

Настоящий протокол описывает модель фасцио-кожного лоскута свиней и ее потенциальное использование в исследованиях васкуляризированных композитных тканей.

Аннотация

Васкуляризованные композитные аллотрансплантаты (VCA), такие как трансплантация рук, лица или полового члена, представляют собой передовое лечение разрушительных дефектов кожи, которое потерпело неудачу на первых ступенях реконструктивной лестницы. Несмотря на многообещающие эстетические и функциональные результаты, основным ограничивающим фактором остается необходимость резко применяемой пожизненной иммуносупрессии и ее хорошо известные медицинские риски, препятствующие более широким показаниям. Поэтому снятие иммунного барьера при VCA имеет важное значение для того, чтобы склонить этическую шкалу и улучшить качество жизни пациентов с использованием самых передовых хирургических методов. De novo создание специфического для пациента трансплантата является предстоящим прорывом в реконструктивной трансплантации. Используя методы тканевой инженерии, VCA могут быть освобождены от донорских клеток и настроены для реципиента посредством перфузии-децеллюляризации-рецеллюляризации. Для разработки этих новых технологий необходима крупномасштабная модель VCA животных. Следовательно, фасцио-кожные лоскуты свиней, состоящие из кожи, жира, фасций и сосудов, представляют собой идеальную модель для предварительных исследований в VCA. Тем не менее, большинство моделей VCA, описанных в литературе, включают мышцы и кости. В этой работе сообщается о надежной и воспроизводимой технике сбора подкожно-кожного лоскута у свиней, практическом инструменте для различных областей исследований, особенно васкуляризированной композитной тканевой инженерии.

Введение

Васкуляризованные композитные аллотрансплантаты (VCA) произвели революцию в лечении трудновосстанавливаемых потерь частей тела, таких как руки, лицо и пенис ^1,2,3. К сожалению, первые долгосрочные исходы⁴ показали, что пожизненное введение высоких доз иммуносупрессантов может привести к тяжелым сопутствующим заболеваниям, включая диабет, инфекции, неоплазию и рено-сосудистую дисфункцию⁵. В последнее время экспертным командам VCA пришлось управлять риском хронического отторжения, приводящего к потере трансплантата, и выполнять пе....

протокол

Все животные получали человеческую помощь в соответствии с Руководством Национального института здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных. Институциональный комитет по уходу за животными и их использованию одобрил экспериментальный протокол (протокол IACUC #2020N000015). Для всех экспериментов использовались семь самок йоркширских свиней (20-25 кг).

1. Предоперационный уход

1. Постигайте животное за твердую пищу за 12 ч до операции.
2. Успокаивайте животное 4,4 мг/кг телазола, 2,2 мг/кг ксилазина и 0,04 мг/кг (в/м) атропина сульфата (см. Таблицу материалов).
3. Поме....

Результаты

Этой работе на живых животных предшествовало определение подкожной перфорасомы на трех трупных экземплярах (рисунок 2). Цветной пломбировочный раствор вводили в подкожную артерию для помутнения специфической сосудистой сети, исходящей из артерии. Раствор состоит из 10 .......

Обсуждение

В данной статье описывается надежный и воспроизводимый фасциокожный лоскут, заготовленный на задних конечностях свиней. Следование этому пошаговому хирургическому протоколу позволит приобрести два лоскута только на одном животном менее чем за 2 часа. Наиболее важным этапом операции .......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
18 G angiocatheter	BD Insyte Autoguard	381409
20 G angiocatheter	BD Insyte Autoguard	381411
Adson Tissue Forceps, 11 cm, 1 x 2 Teeth with Tying Platform	ASSI	ASSI.ATK26426
Atropine Sulfate	AdvaCare	212-868
Bipolar cords	ASSI	228000C
Buprenorphine HCl	Pharmaceutical, Inc	42023-179-01
Dilating Forceps	Fine science tools (FST)	18131-12
Endotrachel tube	Jorgensen Labs	JO615X	size from 6 to 15mm depending on the pig weight
Ethilon 3-0 16 mm 3/8	Ethicon	MPVCP683H
Euthasol	Virbac AH	200-071
Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL	BD PosiFlush	306424
Isoflurane	Patterson Veterinary	14043-704-06
Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter	ASSI	ASSI.BPNS11223
Metzenbaum scissors 180 mm	B Braun	BC606R
Microfil blue	Flow tech	LMV-120
Microfil dilution	Flow tech	LMV-112	colored filing solution
Monopolar knife	ASSI	221230C
N°15 scalpel blade	Swann Morton	NS11
Omnipaque	General Electric	4080358	contrast product
Perma-Hand Silk 3-0	Ethicon	A184H
Small Ligaclip	Ethicon	MCM20
Stevens scissors 115 mm	B Braun	BC008R
Telazol	Zoetis	106-111
Xylamed (xylazine)	Bimeda	200-529