JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

В данной работе представлен метод изучения постнатального коронарного коллатерального роста, индуцированного повторяющейся ишемией у мышей, включая хирургическую имплантацию пневматического окклюдера на левую переднюю нисходящую артерию, автоматизированную систему надувания для протокола повторяющейся ишемии и потенциальные методы оценки коллатерального роста.

Аннотация

Коронарные коллатерали являются естественным обходным путем при ишемической болезни сердца (ИБС), и поэтому в течение многих лет коронарный коллатеральный рост (ККГ) был многообещающей терапевтической мишенью для лечения ИБС, особенно у пациентов с сахарным диабетом 2 типа или метаболическим синдромом, при котором КБГ нарушена. Тем не менее, этот процесс недостаточно изучен, отчасти из-за отсутствия мышиных моделей ККИ, хотя были созданы и другие животные модели, такие как свиньи, собаки и крысы. Мышиная модель может использовать многие генетические модификации, доступные для данного вида, включая отслеживание родословной и регуляцию генов (сверхэкспрессия или нокаут), чтобы пролить свет на процесс и механизм ККИ, включая участвующие в ней пути и типы клеток. Поэтому мы решили разработать мышиную модель ККИ, индуцированной повторяющейся ишемией (RI) через транзиторную ишемию, повторная окклюзия левой передней нисходящей артерии (ПМЖ). В данной рукописи подробно описывается модель ККИ мыши, в том числе операция по имплантации пневматического окклюдера на ПМЖ, автоматизированная система надувания на основе давления, используемая для контроля давления и времени надувания, а также последовательность протокола RI. Этот метод уже породил одну публикацию для разъяснения процесса ККГ, индуцированного RI, показывающей, что прорастающий ангиогенез приводит к образованию зрелых коронарных артерий в ККГ в сердцах взрослых мышей.

Введение

Ишемическая болезнь сердца (ИБС) является основной причиной смертности в Соединенных Штатах, и ежегодно проводится более 200 000 операций по шунтированию коронарных артерий с цельюлечения этого заболевания. Коронарные коллатерали, анастомозы между ветвями коронарного артериального дерева, являются естественным обходным средством, которое может снабжать кровью ишемизированную ткань ниже по течению от закупорки2; Тем не менее, люди демонстрируют широкий разброс в протяженности своих родных коллатеральных сетей 3,4. Пациенты с ИБС с более обширной коронарной коллатерацией имеют лучшие исходы во время сердечных событий, включая уменьшение размера инфаркта и смертность. Следовательно, коронарный коллатеральный рост (ККГ) является терапевтической целью на протяжении более десяти лет 5,6,7. Это представляет особый интерес в связи с растущим числом пациентов с метаболическим синдромом8, у которых наблюдается более слабая коллатерация коронарных артерий9. Тем не менее, до тех пор, пока процесс и механизм ХКГ не будут лучше изучены, попытки индуцировать ККГ для лечения ИБС вряд ли будут плодотворными.

Коронарные коллатерали были изучены на крупных животных моделях, а краткие, повторяющиеся окклюзии основных коронарных артерий были использованы для индуцирования ККГ у свиней10, собак11 и крыс12. Мышиная модель ККИ, однако, будет иметь больше преимуществ при изучении молекулярных и клеточных механизмов ККИ из-за множества генетически модифицированных мышиных линий, включая отслеживание линии, ген-специфические или клеточно-специфические трансгенные и нокаутные линии. Интересно, что в отличие от людей, у мышей, как сообщается, нет нативных коронарных коллатералей13,14, что делает их привлекательной моделью для изучения формирования коронарных коллатералей. Действительно, недавнее исследование показало, что у пациентов с обструктивной болезнью артерий почти половина (47%) не имели коллатерации (степень Рентропа 0)3; таким образом, мышиная модель ККГ может быть клинически значимой для пациентов с минимальной нативной коллатерацией.

Поэтому мы разработали мышиную модель ККГ, индуцированной повторяющейся ишемией, с надувным баллонным окклюдером над левой передней нисходящей артерией (ПМЖ), которая использует систему надувания на основе давления, автоматизированную с таймером. Протокол повторяющейся ишемии способен стимулировать коллатеральный рост, как показано в недавней публикации14. Эта мышиная модель ККИ обеспечит новое понимание процесса ККИ на клеточном и молекулярном уровнях и может быть использована для проверки потенциальных мишеней для продвижения ККИ.

протокол

Описанные эксперименты на животных проводились в соответствии с Руководством по уходу за лабораторными животными и их использованию и были одобрены Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию Медицинского университета Северо-Восточного Огайо.

1. Хирургическая подготовка

ПРИМЕЧАНИЕ: Для протокола RI используйте мышей C57BL/6 любого пола весом не менее 25 г. Используйте асептическую технику на протяжении всей операции.

  1. Настройка
    1. Стерилизуйте все инструменты в автоклаве или стерилизаторе для шариков. Стерилизуйте деликатные материалы и имплантаты, такие как окклюдер, страховочный трос и полиэтиленовые трубки, с помощью этиленоксида (EtO).
    2. Очистите операционную область, протерев все участки 70% этанолом. Подготовьте помещение, разложив все инструменты и принадлежности на стерильных шторах. Полный список расходных материалов см. в Таблице материалов .
  2. Интубация мышей
    1. Кратковременно обезболите мышь 3% изофлураном с кислородом (скорость потока 1 л/мин) до тех пор, пока не будет утрачен рефлекс коррекции. Побрейте область груди, центр спины и за правым ухом; Полностью удалите выпавшие волосы. Внутримышечно вводят гликопирролат в дозе 0,01-0,02 мг/кг.
    2. Снова обезболить 3%-4% изофлураном в течение 5 мин. Положите мышь лежа на спину под наклоном, ограниченным от ее верхних резцов, и с помощью тупых щипцов отодвиньте язык в сторону. Быстро интубируйте мышь с помощью ангиокаты 20G с помощью оптоволоконного фонаря и увеличительного ларингоскопа.
    3. Положите мышь лежа на согревающую хирургическую прокладку и подключите интубационную трубку к аппарату искусственной вентиляции легких для мелких животных с 3% изофлураном. Подтвердите интубацию, проверив ритмичный двусторонний подъем грудной клетки. Подтвердите достаточную глубину анестезии отсутствием реакции на защемление пальца ноги.
  3. Подготовка операционного поля
    1. Нанесите офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить высыхание.
    2. Очистите выбритые участки бетадином, а затем 70% этанолом, протирая один раз в одном направлении.
    3. Нанесите электродный крем на контакты электрокардиограммы (ЭКГ) на операционной подушечке и прикрепите к ним конечности мыши. Накиньте стерильную марлю на нижнюю половину мыши.
    4. Контролируйте частоту дыхания, температуру и глубину анестезии в течение операции с помощью программного интерфейса хирургической прокладки.
  4. Левая торакотомия и имплантация окклюдера
    1. Уменьшите изофлуран до 2%. Сделайте разрез по средней линии в 2-3 см на коже на груди с помощью ножниц, затем с помощью изогнутых щипцов аккуратно отделите кожу и мышечные слои на левой стороне груди (рисунок 1А).
    2. Используя тупые щипцы, аккуратно сделайте отверстие через грудную стенку, чтобы обнажить сердце, обычно между3-м и5-м межреберьями.
    3. Используйте ретрактор, чтобы аккуратно раздвинуть ребра и визуализировать сердце. С помощью тупых щипцов разорвите перикард, чтобы обнажить сердце. Найдите левое ушное предсердие (рисунок 1B) и визуализируйте базальную часть левой передней нисходящей артерии (ПМЖ), если это возможно.
    4. Пас 8-0 полипропиленовый шов через миокард под ПМЖ.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Расстояние между входом и выходом должно быть примерно равно ширине окклюдера и перпендикулярно LAD.
    5. Удалите втягивающие устройства. С помощью заостренных щипцов выведите наружу конец окклюдерной трубки через грудную стенку во втором нижнем межреберье и вытяните окклюдерную трубку через грудную стенку до тех пор, пока окклюдер не будет расположен над сердцем в грудной полости.
    6. Надежно завяжите окклюдер к сердцу с помощью хирургического узла (рисунок 1C) так, чтобы окклюдер лежал на сердце, но не вдавливался в него.
    7. Кратковременно надуйте окклюдер (~10 с) при давлении 10 фунтов на квадратный дюйм с помощью кнопочного устройства для надувания (Рисунок 2). Проверьте ЭКГ, чтобы подтвердить повышение сегмента ST во время раздувания и, по возможности, визуально подтвердить побледнение верхушки сердца. При необходимости отрегулируйте положение или натяжение шва для подтверждения ишемии.
  5. Закрытие
    1. Закройте боковые ребра полипропиленовым швом 6-0, вставив плевральную дренажную трубку. Удалите воздух и кровь из грудной клетки, затем извлеките плевральную дренажную трубку. Нанесите 2% лидокаин на закрытый разрез в области грудной стенки.
    2. С помощью заостренных щипцов проведите окклюдерную трубку под кожей правого плеча, чтобы вывести трубку наружу через кожу за правым ухом. Замените мышцы груди и закройте кожу полиглактиновым швом 6-0 (Рисунок 1D).
    3. Переверните мышь в положение лежа. Вводите кетопрофен подкожно в дозировке 3 мг/кг (с использованием разведения 1 мг/мл в 0,9% стерильном физрастворе) не менее чем за 30 минут до окончания операции.
  6. Имплантация Tether
    1. С помощью маленьких ножниц сделайте небольшой (1 см) разрез на коже в центре спины и аккуратно отделите кожу от подкожного жира и мышечной ткани.
    2. Проложите трубку окклюдера к разрезу в центре спины, выведите его наружу и проденьте через страховочный трос. С помощью шва 6-0 закройте небольшое отверстие возле уха.
    3. Используйте полипропиленовые швы 6-0 для фиксации привязи к мышцам спины (рисунок 1E). Закройте кожу над кнопкой привязи швами 6-0.
  7. Выздоровление
    1. Снимите интубационную трубку, как только мышь сможет дышать самостоятельно; поместить мышь в послеоперационную клетку для RI (для одного животного; Рисунок 3) как только реакция на щипывание ноги вернется. Непрерывно следите за мышью, пока она не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения за грудиной. Поместите клетку на грелку до тех пор, пока мышь не восстановит полную подвижность.
    2. На следующий день введите вторую дозу кетопрофена подкожно в дозе 3 мг/кг.
    3. Дайте мыши отдохнуть в течение 5-7 дней перед началом протокола RI. Ежедневно контролируйте мышей на предмет целостности приборов и при необходимости меняйте клетки. При необходимости обеспечьте соответствующее обогащение, так как мыши содержатся в одиночном помещении в течение всего срока действия протокола RI.

2. Повторяющаяся ишемия

  1. Проверьте расположение окклюдера с помощью эхокардиографии в 0-й день протокола RI, как описано ранее15. Наблюдайте снижение сердечной функции во время надувания окклюдера.
  2. Подсоедините окклюдерную трубку мыши к системе надувания RI (рис. 4). Система будет надувать окклюдер до 10 фунтов на квадратный дюйм в течение 6 минут, 4 раза в день, с 3-часовым перерывом между каждым надуванием (Рисунок 5).
  3. После 17 дней RI повторно проверьте сердечную функцию, как описано в шаге 2.1.

3. Полимерная перфузия и забор тканей

  1. Во время жертвоприношения обезболите мышь 3%-4% изофлураном и введите гепарин (500 ЕД/кг) внутрибрюшинно. Используйте носовой конус для продолжения введения изофлурана в концентрации 2% в течение не менее 5 минут, затем подтвердите достаточную глубину анестезии отсутствием реакции на защемление пальца ноги.
  2. Откройте грудную полость, чтобы обнажить сердце и грудную аорту. Канюлезируйте нисходящую грудную аорту с помощью трубки PE20 и рассеките нижнюю полую вену (IVC) для обеспечения оттока; перфузируйте сердце ретроградно с помощью 1x PBS до тех пор, пока жидкость, выходящая из IVC, не станет прозрачной, затем 3 мл 1% лидокаина, затем 3 мл 4% параформальдегида (PFA) в PBS. Сделайте постоянное лигирование ПМЖ в точном положении окклюдера.
  3. Ретроградно перфузируйте сердце рентгеноконтрастным реагентом до тех пор, пока артериальный контур не будет заполнен. Зажмите трубку PE20 гемостатиком и дайте полимеру застыть в течение 90 минут. Представьте себе сердце под эндоскопом для вскрытия.

Результаты

Из 136 мышей C57BL/6, включая самцов и самок, выживаемость после операции RI составила 93,4%, при этом 80,9% мышей выжили в течение всего 17-дневного протокола RI.

Протокол RI у мышей был оптимизирован на основе предыдущих моделей RI на животных 12,16, которые имеют короткие эпизоды ишемии без постоянного повреждения миокарда. Во время операции можно провести функциональную оценку окклюдера путем наблюдения за видимым побледнением верхушки ЛЖ и повышением ST на ЭКГ во время раздувания окклюдера, которые возвращаются к норме после сдувания (Рисунок 6). После периода послеоперационного восстановления функция окклюдера была повторно проверена на 0-й день с помощью эхокардиографии как до, так и во время надувания окклюдера. Как фракция выброса (ФВ), так и фракционное укорочение (ФС) снижаются во время надувания, что указывает на то, что окклюдер был установлен правильно и вызывает ишемию и снижение функции при надувании (Рисунок 7А). Эти параметры можно оценить повторно на 17-й день; Если сердечная функция во время надувания окклюдера улучшилась в течение 17 дней, как видно на рисунке 7A, это говорит о том, что ишемия, вызванная раздуванием окклюдера, была улучшена за счет коллатералей, выращенных в течение периода RI, которые теперь повторно снабжают коллатеральную зависимую зону (CZ).

Помимо функционального анализа с помощью эхокардиографии, еще одной оценкой ККГ является визуализация наличия коллатеральных сосудов путем перфузии рентгеноконтрастного полимера. Сообщается, что у мышей отсутствуют нативные коллатерали13, поэтому в нативном сердце мыши (без хирургического вмешательства или РИ) лигирование ПМЖ с последующей ретроградной перфузией полимера приводит к образованию незаполненной области ЧЗ после лигирования, где артерии не заполнены полимером, поскольку кровоток был остановлен (рис. 7В). Напротив, наличие заполненных артерий в ЧЗ указывает на наличие коллатерального кровообращения. У мышей, перенесших протокол RI, после лигирования в позиции окклюдера CZ перфузируется полимером через коллатерали, развившиеся в период RI (рис. 7C).

figure-results-2493
Рисунок 1: Хирургический вид основных этапов. (A) Место для торакотомии, обозначенное наконечниками щипцов после разреза по средней линии и втягивания кожи и мышц. (В) Сердце после торакотомии; Желтая звездочка указывает на расположение левой ушной раковины. (В) Размещение окклюдера на сердце (белая стрелка) и наружная трубка через второе нижнее межреберье (синяя стрелка). (D) Вид после закрытия сундука; Белой стрелкой обозначена подкожная окклюдерная трубка, а желтой стрелкой показано, где наружная трубка находится на правом плече. (E) Фиксация страховочного троса на спине. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-3538
Рисунок 2: Кнопочное устройство для надувания окклюдера. Устройство накачивания состоит из: (A) регулятора, (B) электрического электромагнитного клапана, (C) кнопки включения/выключения и (D) манометра; он сужается на конце (E) для соединения с окклюдерной трубкой. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-4263
Рисунок 3: Послеоперационная клетка для мышей. Компоненты включают в себя: (A) вертлюг с пластиковым тросом, (B) трубку из углеродного волокна и (C) противовес из вертлюга и грузил. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-4870
Рисунок 4: Автоматизированная система накачки. Он состоит из (A) нормально закрытого электрического электромагнитного клапана, (B) манометра, (C) нормально открытого электрического электромагнитного клапана и (D) электрической панели, подключенной к цифровому программируемому таймеру. Когда таймер включает систему, соленоиды переключаются, и CO2 поступает в систему, чтобы надуть окклюдер. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-5715
Рисунок 5: Хронология протокола RI. После операции RI мыши отдыхают в течение 5-7 дней перед первичной эхокардиографией и началом протокола RI, который затем продолжается в течение 17 дней до окончательной эхокардиографии и жертвоприношения. Протокол RI состоит из 4 ежедневных надуваний (6 мин при 10 psi каждое) с 3-часовым отдыхом между надуваниями. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-6442
Рисунок 6: Репрезентативные электрокардиограммы до, во время и после надувания окклюдера. (A) ЭКГ до надувания (красная стрелка указывает на начало надувания). (B) ЭКГ во время надувания, показывающая подъем ST. (В) ЭКГ, после сдувания, нормализовалась. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-7121
Рисунок 7: Оценка коронарного коллатерального роста (ККИ). (A) У мышей дикого типа фракция выброса (ФВ) и фракционное укорочение (ФС) снижались во время надувания окклюдера в день 0, что указывает на правильное размещение окклюдера. На 17-й день изменение ЭФ% и ФС было достоверно меньше, чем на 0-й день, что указывает на ККГ (n=14 на 0-й день, n=9 на 17-й день, для анализа статистической значимости использовался непарный U-критерий Манна-Уитни, *p < 0,05. Эта цифра была изменена с14. (В, В) Рентгеноконтрастная полимерная перфузия с RI и без него. Белыми стрелками обозначена точка лигирования ПМЖ. Белым пунктирным кругом обозначена коллатерозависимая зона (CZ); в сердцах без RI наполнения нет, но в сердцах RI сосуды CZ наполняются через коллатерали. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Обсуждение

Коронарные коллатерали являются естественным шунтированием для пациентов с ИБС. После неудачных клинических испытаний, нацеленных на ангиогенез17, стимулирование развития коронарных коллатералей может быть лучшим терапевтическим подходом для этих пациентов. В отличие от капилляров, полученных в результате ангиогенеза, которые имеют только один слой эндотелиальных клеток, коллатерали представляют собой зрелые артерии с покрытием гладкомышечных клеток. Коллатерали пополняют кровоток к областям ишемии миокарда, вызванной обструктивными артериями. Понимание норм регулирования КБО имеет жизненно важное значение для разработки новых мишеней для лечения ИБС.

Модели крупных животных, использующие повторяющуюся ишемию для изучения ККИ, оказались полезными 10,11,12, особенно когда они автоматизированы для уменьшения дисперсии и повышения эффективности использования времени18, но не могут в полной мере использовать преимущества современных генетических технологий. Масштабирование такой модели ККИ до размера мыши сопряжено с определенными трудностями, но преимущества многочисленны, как практические, так и научные: мыши стоят дешевле в помещении и требуют меньше места, предоставляя при этом больший набор генетических моделей.

Несмотря на то, что в последние годы было опубликовано несколько мышиных моделей ККИ 13,16,19,20,21, эта модель имеет несколько отличий 14. Повторяющаяся ишемия (ИП) индуцирует коллатеральный рост без потери или повреждения миокарда, вызванного инфарктом миокарда. После имплантации окклюдера процесс RI может быть отрегулирован, а программа автоматизирована, что положительно сказывается на экономии времени и воспроизводимости. Автоматизированная система надувания недорога и проста в программировании и эксплуатации, не требуя компьютерной системы. Коллатеральный рост можно оценить путем измерения сердечной функции с надуванием окклюдера и без него, что является хорошим косвенным индикатором существования коронарного коллатерального потока. Более того, перфузия рентгеноконтрастным полимером для визуализации сосудистой сети сердца проста и недорога. Несмотря на то, что общая процедура сложна и требует квалифицированного хирурга, мышиная модель ККГ позволяет индуцировать коллатеральный рост в сердце взрослого человека, открывая новую область для изучения регуляции ККГ и предоставляя инструмент для тестирования терапевтических мишеней для стимулирования коллатерального роста при ИБС.

В то время как представленные здесь данные относятся к мышам дикого типа в возрасте 4-6 месяцев, протокол может быть адаптирован для различных потребностей различных исследований, изучающих вопросы факторов, влияющих на ККИ, таких как регуляция генов, половые различия, старение и сердечно-сосудистые патологии. Мы рекомендуем использовать мышей весом не менее 25 г из-за размера окклюдера по отношению к мышиному сердцу. Мы также знаем, что старение является фактором риска для всех сердечно-сосудистых заболеваний, и его влияние на ККГ неизвестно. Мы ожидаем, что показатели хирургической выживаемости или исход коллатерального роста у старых мышей могут отличаться от дикого типа из-за длительности и сложности операции или фенотипа системного старения.

Хирургическая подготовка к протоколу RI действительно более длительная и сложная, чем типичная операция MI, включает в себя установку двух имплантатов и изменение положения мыши в середине операции. Внимание к нескольким ключевым шагам поможет облегчить процесс. Наиболее важным этапом процедуры является имплантация окклюдера, которая заключается в точном обрезании ПМЖ при прохождении шва через миокард, а также достижении правильного натяжения шва при завязывании окклюдера. Точное позиционирование окклюдера легко оценить: успешное размещение приведет к апикальному побледнению, а также к подъему ST тогда и только тогда, когда окклюдер надут; в противном случае миокард и ЭКГ кажутся нормальными. Важно проверить ЭКГ с надуванием и без него во время операции RI, а также сердечную функцию с надуванием и без него после операции в 0-й день. Если у мыши перенесен инфаркт миокарда без раздувания окклюдера, животное следует отстранить от исследования. Перед тем как окклюдеры будут имплантированы, их необходимо протестировать на оптимальное давление. Имплантация троса является еще одним ключевым этапом, поскольку трос защищает окклюдерную трубку от повреждения мышью, что может привести к преждевременному прекращению действия протокола RI. Неправильное размещение может стать причиной некроза кожи.

Таким образом, эта мышиная модель ККГ с помощью повторяющейся ишемии является ценным инструментом для изучения механизма и регуляции ККГ, а также для скрининговой терапии, разработанной для лечения ИБС.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Авторы благодарят Вэйго Вана, Коди Джугилона, Иянуолуву Огунмилуйи и Девана Ричардсона за их вклад в обсуждаемые здесь методы. Эта работа была поддержана 1R15HL115540-01 и 1 R01 HL137008-01A1.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
#5/45 degree forcepsFine Science Tools11251-35
1/4" Closed Brass Electric Solenoid ValveU.S. SolidUSS2-00054inflation system
1/4" Open Brass Electric Solenoid ValveAceCrewinflation system
1/4" pneumatic tubing‎China SNS Pneumatic Co.,Ltd‎APU1/4-32.8ftpush-button device
1/4" push-in connectorsRuoFeng543Ypush-button device
1/8" brass fittingsEdge Industrialinflation system
2 Position Pneumatic Electric Solenoid ValveU.S. SolidUSS- PSV00033push-button device
20G angiocathBD381703
45 degree Castroviejo needle holdersRobozRS-6421
6-0 polyglactin suturesDemeTECHG176011B13M
6-0 polypropylene suturesAD SugicalXS-P618R11
70% Ethanol
8-0 polypropylene suturesDemeTECHPM19800, 65G0P
BetadinePurdue Products367618150085
Blunt nosed scissorsWorld Precision Intruments500366
Carbon fiber arrow shaftpost-surgical cage; cut to 12.5 cm
Cotton swabs (3")Puritan872-PC DBL
Curity Gauze Sponges (2x2)Cardinal Health2146
Dipsey swivel sinkersWater Gremlinpost-surgical cage
Electrode creamSignacreme17-05
GlycopyrrolateWestward0143-9679-01
Hartman hemostatsFine Science Tools13003-10
IsofluraneCovetrus29404
Ketofen (ketoprofen)zoetis10004031
Lidocaine (2%)Covetrus14583
MICROFIL (yellow)Flow TekMV-122
Mini Push ButtonInteractiviaE-SWC-PBM-PBS-105push-button device
Miniature Air Pressure RegulatorPneumaticPlusPPR2-N02BG-4push-button device
Mini-Colibri spring retractorFine Science Tools17000-01
MiniVent ventilatorHarvard Apparatus73-0044
OccluderCustom made
Octagon handled forcepsFine Science Tools11041-08
Ohan Rodent Intubation SystemBMR SupplyOhan-201
Paraformaldehyde solution 4% in PBSSanta Cruzsc-281692
PE20 tubing
PE50 tubing
Plastic swivel (1 channel)Instech375/25PSpost-surgical cage
Premixed PBS Buffer, 10xRoche11666789001Diluted to 1x
Pressure GaugePIC Gauges102D-158D-10/32push-button device
Programmable Digital Outlet TimerBN-LINK‎BND-60/SU105inflation system
Puralube Vet Opthalmic OintmentDechra17033-211-38
Retractors w/ 18200-07 elastomerFine Science Tools18200-10 and 18200-11
Rodent Surgical Monitor+Scintica900-0053-01
Round handled suture tying forcepsFine Science Tools18026-10
Snap-lock barrel swivel (size 5)Eagle Claw‎01032-005post-surgical cage
Straight needle holdersFine Science Tools12060-01
TetherInstechPS62

Ссылки

  1. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association. Circulation. 147 (8), e93-e621 (2023).
  2. Chilian, W. M., et al. Coronary collateral growth--back to the future. J Mol Cell Cardiol. 52 (4), 905-911 (2012).
  3. Liu, Z., et al. Coronary collateralization shows sex and racial-ethnic differences in obstructive artery disease patients. PLoS One. 12 (10), e0183836(2017).
  4. Kinnaird, T., Stabile, E., Zbinden, S., Burnett, M. S., Epstein, S. E. Cardiovascular risk factors impair native collateral development and may impair efficacy of therapeutic interventions. Cardiovasc Res. 78 (2), 257-264 (2008).
  5. Traupe, T., Gloekler, S., de Marchi, S. F., Werner, G. S., Seiler, C. Assessment of the human coronary collateral circulation. Circulation. 122 (12), 1210-1220 (2010).
  6. Schaper, W. Collateral vessels reduce mortality. Eur Heart J. 33 (5), 564-566 (2012).
  7. Meier, P., et al. The impact of the coronary collateral circulation on mortality: a meta-analysis. Eur Heart J. 33 (5), 614-621 (2012).
  8. Hirode, G., Wong, R. J. Trends in the prevalence of metabolic syndrome in the United States, 2011-2016. JAMA. 323 (24), 2526-2528 (2020).
  9. Turhan, H., et al. Impaired coronary collateral vessel development in patients with metabolic syndrome. Coron Artery Dis. 16 (5), 281-285 (2005).
  10. Ishikawa, K., et al. Development of a preclinical model of ischemic cardiomyopathy in swine. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 301 (2), H530-H537 (2011).
  11. Rys, R., et al. An automated coronary artery occlusion device for stimulating collateral development in vivo. J Pharmacol Toxicol Methods. 48 (2), 111-118 (2002).
  12. Toyota, E., et al. Vascular endothelial growth factor is required for coronary collateral growth in the rat. Circulation. 112 (14), 2108-2113 (2005).
  13. Zhang, H., Faber, J. E. De novo collateral formation following acute myocardial infarction: Dependence on CCR2⁺ bone marrow cells. J Mol Cell Cardiol. 87, 4-16 (2015).
  14. Jamaiyar, A., et al. The essential role for endothelial cell sprouting in coronary collateral growth. J Mol Cell Cardiol. 165, 158-171 (2022).
  15. Yin, L., et al. Induction of vascular progenitor cells from endothelial cells stimulates coronary collateral growth. Circ Res. 110 (2), 241-252 (2012).
  16. Lavine, K. J., Kovacs, A., Weinheimer, C., Mann, D. L. Repetitive myocardial ischemia promotes coronary growth in the adult mammalian heart. J Am Heart Assoc. 2 (5), e000343(2013).
  17. Simons, M., et al. Clinical trials in coronary angiogenesis: issues, problems, consensus: An expert panel summary. Circulation. 102 (11), E73-E86 (2000).
  18. Leavesley, S. J., Ledkins, W., Rocic, P. A device for performing automated balloon catheter inflation ischemia studies. PLoS One. 9 (4), e95823(2014).
  19. Aghajanian, A., et al. Decreased inspired oxygen stimulates de novo formation of coronary collaterals in adult heart. J Mol Cell Cardiol. 150, 1-11 (2021).
  20. He, L., et al. Genetic lineage tracing discloses arteriogenesis as the main mechanism for collateral growth in the mouse heart. Cardiovasc Res. 109 (3), 419-430 (2016).
  21. Das, S., et al. A unique collateral artery development program promotes neonatal heart regeneration. Cell. 176 (5), 1128-1142.e18 (2019).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

JoVE219

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены