Измерение боли в доклинических моделях артрита трудно, но это важно для оценки как регенеративных и анальгетических методов лечения. Наш протокол чувствителен и воспроизводится для измерения как вызываемого, так и спонтанного болевого поведения. И это просто и относительно недорого.
Артрит является крупнейшим вклад в инвалидность, и боль является основной причиной инвалидности. Лечение артрита в настоящее время недостаточно. Доклинические модели являются важной частью развития лечения.
Демонстрация этой процедуры будет Кристофер Дорман, техник, и Сандра Frizelle, штатный ученый из моей лаборатории. Чтобы предотвратить иглу от вставки слишком глубоко и выхода из сустава задней, прикрыть точку 5-дюймовая игла с оболочкой полиэтиленовых труб до тех пор, пока только 2,5 миллиметра иглы выступают из оболочки. Затем побрить мех с колена обезболивающей мыши, чтобы быть введены, и стерилизовать открытые кожи с povidone йод скраб.
Затем вставьте оболочку иглы в сустав в средней линии через сухожилие patellar просто уступает нижней кромке коленной чашечки, и вводить вещество интереса. Прежде чем оценить вызванную боль в суставах, используйте высотомер уровня 4 на практике применения семисот граммовых сил на сантиметр в квадрате последовательного и твердого давления. Устройство будет излучать 4 звуковых сигнала при соответствующем уровне давления.
Когда соответствующее давление может быть надежно применено, scruff мыши на шее указательным пальцем и большим пальцем достаточно плотно, чтобы предотвратить случайные движения. И использовать четвертый и пятый пальцы, чтобы сдержать хвост. Мышь должна быть в состоянии сделать дискретные, краткие движения с усилием и когда стимулировали, но не должны быть в состоянии свободно или непрерывно.
Администрирование повторяющихся твердых пальпации одновременно с боковыми и медиальной сторонами каждого колена большим и указательным пальцами свободной руки примерно на совместной линии один раз в секунду в течение 1 минуты. И иметь наблюдателя подсчитать количество раз животное озвучивать и борется, чтобы избежать ограничения в течение этого 1 минутного периода применения давления. Сумма укусов и вокализации считается вызванным счетом боли.
Откройте расширенную динамическую программу подшипника веса, и выберите мышей "в качестве типа датчика. Перед каждым экспериментом выберите полную калибровку "под меню калибровки. И введите ноль"для тары значение.
И вес пены площадку, средней плотности волокна борту, пластиковый стакан, и вода, как калибровка веса. Выберите следующий "и таре"И покрыть датчик площадку с пеной площадку, средняя плотность волокна борту, и пластиковый стакан воды. Когда все материалы были размещены на сенсорной панели, выберите предварительный просмотр усиления"И отрегулируйте вес калибровки до тех пор, пока он равномерно распределен по отдельным датчикам.
Когда значение индикатора калибровки превышает девяносто пять, выберите определение усиления "для получения нормализованного среднего значения для отдельных датчиков и подтверждения целостности датчиков. Затем выберите следующий" и сохраните файл калибровки в папке калибровки. Выберите новый"и введите проект и имена животных для первой мыши, которая будет протестирована.
Выберите просмотр" и откройте файл калибровки, который был создан для проекта. Затем выберите следующий "подтвердить, что включить видео захвата" выбран, и выберите OK "Следующий, взвесить животное. Выберите захват" и записывают вес в программном обеспечении.
После выбора ОК "поместите мышь в камеру в течение 5 минут. И выберите запуск"Программное обеспечение будет записывать активность животного, захватывать видео, и синхронизировать с данными датчика, и автоматически разделить видео на анализируемые и неализируемые сегменты. В конце периода анализа выберите легкий скоринг"и независимую настройку паузы"И выберите быстрый форвард", чтобы перейти к первому анализируемому сегменту.
Если стабильная зона не имеет правильной лапы определены, удерживайте курсор над этой зоной, и нажмите соответствующий ключ ярлыка, соответствующий правильной части тела. Продвинутое динамическое программное обеспечение для подшипников веса автоматически вычисляет процент анализируемого времени, затраченного, и процент массы тела, размещенный на каждой из 4 конечностей. Затем выберите результаты "экспорт" и да "для экспорта первых 5 сводных строк данных в соответствующую программу электронной таблицы.
Для каждого дополнительного животного в одной группе выберите новое и введите уникальное название животного без изменения названия проекта. Затем захватить активность каждого животного в камере, как только что продемонстрировали. Вызванные боль результаты для острого воспалительного ухода-а-ген-индуцированного артрита, хронические воспалительные полный F-рой-нес добавить-джав-ent индуцированного артрита, и хронические невоспалительное Коул-аг-в-индуцированного артрита увеличение по отношению к тем, которые наблюдаются для наивных ООН-инъекционных животных для всех трех типов боли в суставах.
Самки, но не мужчины с хронической дегенеративной боли в суставах, демонстрируют аналогичные сокращения заранее динамические показатели подшипника веса по сравнению с наивными мышами при острой и хронической воспалительной боли в суставах. Самцы с острыми воспалительными болями в суставах передают больше веса 4 конечностям, чем наивные животные. Вес подшипника на 4 конечностей увеличивается у самок мышей по сравнению с наивными животными, но не у мужчин с хронической дегенеративной боли в суставах.
Как у мужчин, так и у женщин с хронической дегенеративной болью в суставах нет разницы во времени, проводимом на левых задних конечностях, по сравнению с наивными животными. И женщины с хронической дегенеративной боли в суставах тратят больше времени на не-артрит правой задней конечности по сравнению с ООН вводили мышей. Наконец, мышей мужского пола с острой воспалительной боли в суставах, и женщин с хронической дегенеративной боли в суставах, тратят значительно больше времени на их 4 конечностей, чем наивные животные.
Правильная идентификация задней части ног животного по отношению к его телу очень важна. Сосредоточьтесь на задней части животного, а не на голове. С помощью этого метода мы можем проверить аффективность новых, новых межсумочковых анальгетиков.
