Мы изучаем сердечно-сосудистые заболевания, в частности, роль внеклеточных везикул в патологическом кальцификации сердечно-сосудистых тканей, таких как клапаны и кровеносные сосуды. Исследователи из нашей группы недавно определили методы извлечения ткани и захваченных внеклеточных везикул из фиброкальцифицирующей сердечно-сосудистой ткани для определения их протеомного профиля. Наша группа продемонстрировала, что эти внеклеточные везикулы содержат важный белковый груз для инициации кальцификации в патологических тканях.
Специализированные пробирки, используемые на этапе ультрацентрифугирования для выделения внеклеточных везикул, могут быть очищены и стерилизованы для повторного использования. Однако протеомный анализ требует особого внимания, так как любое загрязнение может сильно повлиять на последующие результаты. Здесь мы проверяем протокол повторного использования расходных материалов, в частности, поликарбонатных ультрацентрифужных пробирок для выделения внеклеточных везикул, который подходит для последующих низкозатратных протеомных приложений.
Наш протокол прост и эффективен, и он позволит исследователям сократить как затраты на расходные материалы, так и отходы, обычно связанные с этими протоколами изоляции.