Повторное использование поликарбонатной ультрацентрифужной пробирки в протеомном анализе внеклеточных везикул

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

798 Views

•

02:36 min

•

March 8th, 2024

DOI :

10.3791/66126-v

March 8th, 2024

•

Rachel M. E. Cahalane*¹^,², Mandy E. Turner*¹, Cassandra L. Clift¹, Mark C. Blaser¹, Gabrielle Bogut¹, Sydney Levy¹, Taku Kasai¹, Tom A. P. Driedonks³^,⁴, Esther N. M. Nolte-‘t Hoen⁴, Masanori Aikawa¹^,⁵, Sasha A. Singh¹^,⁵, Elena Aikawa¹^,⁵

¹Center for Interdisciplinary Cardiovascular Sciences, Cardiovascular Division, Department of Medicine, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, ²Mechanobiology and Medical Device Research Group (MMDRG), Biomedical Engineering, College of Science and Engineering, University of Galway, ³Department of CDL Research, University Medical Center Utrecht, ⁴Department of Biomolecular Health Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Utrecht University, ⁵Center for Excellence in Vascular Biology, Cardiovascular Division, Department of Medicine, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School

Транскрипт

Мы изучаем сердечно-сосудистые заболевания, в частности, роль внеклеточных везикул в патологическом кальцификации сердечно-сосудистых тканей, таких как клапаны и кровеносные сосуды. Исследователи из нашей группы недавно определили методы извлечения ткани и захваченных внеклеточных везикул из фиброкальцифицирующей сердечно-сосудистой ткани для определения их протеомного профиля. Наша группа продемонстрировала, что эти внеклеточные везикулы содержат важный белковый груз для инициации кальцификации в патологических тканях.

Специализированные пробирки, используемые на этапе ультрацентрифугирования для выделения внеклеточных везикул, могут быть очищены и стерилизованы для повторного использования. Однако протеомный анализ требует особого внимания, так как любое загрязнение может сильно повлиять на последующие результаты. Здесь мы проверяем протокол повторного использования расходных материалов, в частности, поликарбонатных ультрацентрифужных пробирок для выделения внеклеточных везикул, который подходит для последующих низкозатратных протеомных приложений.

Наш протокол прост и эффективен, и он позволит исследователям сократить как затраты на расходные материалы, так и отходы, обычно связанные с этими протоколами изоляции.

Резюме

Смотреть дополнительные видео

205

Главы в этом видео

0:00

Introduction

1:21

Cleaning and Reusing Polycarbonate Ultracentrifuge Tubes for Sustainable Extracellular Vesicle Isolation

Похожие видео