Estudiamos las enfermedades cardiovasculares, concretamente el papel de las vesículas extracelulares en la calcificación patológica de los tejidos cardiovasculares, como válvulas y vasos sanguíneos. Los investigadores de nuestro grupo han definido recientemente métodos para extraer tejido y vesículas extracelulares atrapadas del tejido cardiovascular fibrocalcificado para determinar su perfil proteómico. Nuestro grupo ha demostrado que estas vesículas extracelulares contienen una importante carga proteica para iniciar la calcificación en los tejidos enfermos.
Los tubos especializados utilizados en la etapa de ultracentrifugación del aislamiento de vesículas extracelulares se pueden limpiar y esterilizar para su reutilización. Sin embargo, el análisis proteómico requiere una consideración especial, ya que cualquier contaminación podría afectar en gran medida los resultados posteriores. Aquí validamos un protocolo para la reutilización de consumibles, específicamente tubos de ultracentrífuga de policarbonato para el aislamiento de vesículas extracelulares que es adecuado para aplicaciones de proteómica de baja entrada aguas abajo.
Nuestro protocolo es sencillo y eficaz, y permitirá a los investigadores reducir tanto los costes de consumibles como los residuos típicamente asociados a estos protocolos de aislamiento.