Наша лаборатория работает над тем, чтобы понять, как модуляция рецепторов, активированных протеазой, может подавлять воспаление. Мы разработали новый класс малых молекул под названием пармодулины, которые модулируют активность PAR1. Цель состоит в том, чтобы обнаружить пармодулины с улучшенными свойствами для потенциального использования в качестве кандидатов в лекарственные препараты, а также понять их механизм действия.
В доклинических исследованиях с нашими коллегами мы определили, что пармодулины могут быть особенно перспективными для лечения расстройств, вызванных тромбовоспалением, включая заболевания почек, печени и сердечно-сосудистые заболевания. Их механизм действия также может позволить разработать соединения с лучшим профилем безопасности, чем предыдущие PAR1, нацеленные на кандидаты в лекарственные препараты. Рецептор PAR1 важен для активации тромбоцитов, но его передача сигналов в эндотелиальных клетках также важна и актуальна при многочисленных патологиях.
Поэтому мы хотели разработать дешевый и удобный протокол для тестирования активности пармодулинов и культивируемых эндотелиальных клеток. Мы здесь, чтобы поделиться обновленным протоколом измерения мобилизации кальция, который использует стандартный считыватель пластин и не требует автоматизированного обработчика жидкостей. Он подходит для скрининга лигандов PAR1 в эндотелиальных клетках, но теоретически его можно использовать для измерения активности любых соединений, влияющих на мобилизацию кальция.