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Abstract

Bioengineering

미세유체 혼합으로 제조된 mRNA-지질 나노입자의 In vitroIn vivo 효율 테스트

Published: January 20th, 2023

DOI:

10.3791/64810

1Department of Bioengineering, University of Pennsylvania

지질 나노입자(LNP)는 최근 모더나와 화이자/바이오엔테크의 코로나19 mRNA 백신 개발에 성공하면서 주목을 받고 있다. 이 백신은 mRNA-LNP 치료제의 효능을 입증하고 향후 임상 적용의 문을 열었습니다. mRNA-LNP 시스템에서 LNP는 뉴클레아제에 의한 분해로부터 mRNA 화물을 보호하고 세포 내 전달을 매개하는 전달 플랫폼 역할을 합니다. LNP는 일반적으로 이온화 가능한 지질, 인지질, 콜레스테롤 및 지질 고정 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 접합체(지질-PEG)의 네 가지 구성 요소로 구성됩니다. 여기서, 반딧불이 루시페라아제를 인코딩하는 mRNA를 캡슐화하는 LNP는 LNP 지질 성분을 함유하는 유기상과 mRNA를 함유하는 수성상의 미세유체 혼합에 의해 제형화된다. 그런 다음 이러한 mRNA-LNP를 체외에서 테스트하여 생물 발광 플레이트 기반 분석을 사용하여 HepG2 세포에서 transfection 효율을 평가합니다. 또한 mRNA-LNP는 측면 꼬리 정맥을 통한 정맥 주입 후 C57BL/6 마우스에서 in vivo로 평가됩니다. 전신 생물 발광 이미징은 in vivo 이미징 시스템을 사용하여 수행됩니다. 대표적인 결과는 mRNA-LNP 특성, HepG2 세포에서의 transfection 효율 및 C57BL/6 마우스의 총 발광 플럭스에 대한 것입니다.

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