माइटोकॉन्ड्रियल डीएनए संश्लेषण और वितरण की उच्च-थ्रूपुट छवि-आधारित परिमाणीकरण

सेलुलर प्रक्रियाओं के विशाल बहुमत को ऊर्जा की निरंतर आपूर्ति की आवश्यकता होती है, जिनमें से सबसे आम वाहक एटीपी अणु है। यूकेरियोटिक कोशिकाएं ऑक्सीडेटिव फॉस्फोराइलेशन द्वारा माइटोकॉन्ड्रिया में अपने अधिकांश एटीपी का उत्पादन करती हैं। माइटोकॉन्ड्रिया अद्वितीय अंग हैं क्योंकि उनके पास अपना जीनोम है जिसे अगली पीढ़ी की कोशिकाओं में दोहराया और पारित किया जाता है। परमाणु जीनोम के विपरीत, कोशिका में माइटोकॉन्ड्रियल जीनोम की कई प्रतियां होती हैं। माइटोकॉन्ड्रियल जीनोम की प्रतिकृति, मरम्मत और रखरखाव के लिए जिम्मेदार तंत्र का विस्तृत अध्ययन सामान्य और रोग दोनों स्थितियों के तहत माइटोकॉन्ड्रिया और पूरी कोशिकाओं के उचित कामकाज को समझने के लिए आवश्यक है। यहां, एक विधि जो विट्रो में सुसंस्कृत मानव कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रियल डीएनए (एमटीडीएनए) के संश्लेषण और वितरण के उच्च-थ्रूपुट परिमाणीकरण की अनुमति देती है, प्रस्तुत की गई है। यह दृष्टिकोण 5-ब्रोमो-2'-डीऑक्सीयूरिडीन (बीआरडीयू) निगमन द्वारा लेबल सक्रिय रूप से संश्लेषित डीएनए अणुओं के इम्यूनोफ्लोरेसेंस का पता लगाने और एंटी-डीएनए एंटीबॉडी के साथ सभी एमटीडीएनए अणुओं की समवर्ती पहचान पर आधारित है। इसके अतिरिक्त, माइटोकॉन्ड्रिया को विशिष्ट रंगों या एंटीबॉडी के साथ देखा जाता है। एक बहु-अच्छी तरह से प्रारूप में कोशिकाओं का संवर्धन और एक स्वचालित प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का उपयोग अपेक्षाकृत कम समय में विभिन्न प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत एमटीडीएनए की गतिशीलता और माइटोकॉन्ड्रिया की आकृति विज्ञान का अध्ययन करना आसान बनाता है।