Detección de mitofagia en Caenorhabditis elegans y células de mamíferos utilizando colorantes específicos de orgánulos

Las mitocondrias son esenciales para diversas funciones biológicas, incluida la producción de energía, el metabolismo de los lípidos, la homeostasis del calcio, la biosíntesis del hemo, la muerte celular regulada y la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS). Las ROS son vitales para los procesos biológicos clave. Sin embargo, cuando no se controlan, pueden provocar lesiones oxidativas, incluido el daño mitocondrial. Las mitocondrias dañadas liberan más ROS, intensificando así la lesión celular y el estado de la enfermedad. Un proceso homeostático llamado autofagia mitocondrial (mitofagia) elimina selectivamente las mitocondrias dañadas, que luego son reemplazadas por otras nuevas. Existen múltiples vías de mitofagia, siendo el punto final común la descomposición de las mitocondrias dañadas en los lisosomas.

Varias metodologías, incluidos los sensores genéticos, la inmunofluorescencia de anticuerpos y la microscopía electrónica, utilizan este criterio de valoración para cuantificar la mitofagia. Cada método para examinar la mitofagia tiene sus ventajas, como la orientación específica de tejidos/células (con sensores genéticos) y gran detalle (con microscopía electrónica). Sin embargo, estos métodos a menudo requieren recursos costosos, personal capacitado y un largo tiempo de preparación antes del experimento real, como para crear animales transgénicos. Aquí, presentamos una alternativa rentable para medir la mitofagia utilizando tintes fluorescentes disponibles comercialmente dirigidos a mitocondrias y lisosomas. Este método mide eficazmente la mitofagia en el nematodo Caenorhabditis elegans y las células hepáticas humanas , lo que indica su eficiencia potencial en otros sistemas modelo.