Fare Pulmoner Endotelyal Yüzey Katman in vivo ölçümü olarak

Özet

Endotelyal endotel / glycocalyx yüzey tabakası ideal intravital mikroskobu kullanılarak incelenmiştir. Intravital mikroskop teknik gibi akciğer gibi hareketli bir organ zordur. Biz eş zamanlı aydınlık ve floresan mikroskop serbestçe-hareket eden endotel yüzey tabakasının kalınlığını belirlemede nasıl kullanılabileceğini göstermek In vivo Fare akciğer.

Özet

Endotel glycocalyx vasküler lümeni döşeyen proteoglikanlar ve ilişkili glikozaminoglikanlar bir tabakadır. İn vivo olarak, glycocalyx endotel fonksiyonun korunmasında katkıda önemli bir endotel yüzey tabakası (ESL) oluşturan, son derece sulu olduğunu. Endotel glycocalyx genellikle in vitro olarak anormal bir doku ve standart tekniklerle tespit sırasında kaybolur gibi, ESL çalışma intravital mikroskopi kullanımını gerektirir. Alveoler mikrovasküler iyi yaklaşık karmaşık fizyolojisi için, pulmoner intravital görüntüleme ideal bir serbestçe hareket eden akciğer gerçekleştirilir. Bu preparatlar, bununla birlikte, genelde geniş hareket artefaktı muzdarip. Bir serbestçe hareket eden bir fare akciğer bölgesinin, kapalı göğüs intravital mikroskopisi endotel yüzey floresan-etiketli yüksek molekül ağırlıklı dekstranlar ve ESL dışlama yoluyla glycocalyx bütünlük ölçmek için nasıl kullanılabileceğini göstermektedir. Gerektirir Bu non-kurtarma cerrahi teknik,eşzamanlı aydınlık ve fare akciğer floresan görüntüleme, karıştırıcı akciğer hasarı inducing delil olmadan subplevral mikrovasküler uzunlamasına gözlem için izin verir.

Giriş

Endotel glycocalyx damar intima astar proteoglikanlar ve ilişkili glikozaminoglikanların bir hücre dışı bir tabakadır. İn vivo olarak, glycocalyx nötrofil endotel sıvı geçirgenliği, ¹ de dahil olmak üzere endotel çeşitli fonksiyonları düzenler önemli bir endotel yüzey tabaka (ESL) şekillendirme, yüksek hidratlanır yapışma ^2, ve sıvı makaslama kuvveti ³ mechanotransduction.

Tarihsel olarak, glycocalyx dolayı standart doku fiksasyonu ve işleme ⁶ sırasında kültürlü Hücre preparatlarının ^{4, 5} ve degradasyon yılında aberrance için underappreciated olmuştur. Artan kullanımı intravital mikroskopi ⁷ (in vivo mikroskopi, IVM) sağlık ve hastalık sırasında damar işlev ESL önemi artan bilimsel ilgi ile çakıştı. ESL ışık mikroskobu ile görülemez ve kolayca etiketli edilemezRBC aglütinasyon ⁸ ve fatal pulmoner emboli (yayınlanmamış gözlemler) neden floresan glycocalyx-bağlayıcı lektin eğilimini verilen vivo,. Birçok dolaylı yaklaşımlar dolayısıyla böyle kremaster ve mezenterik mikrodolaşımını olmayan hareketli vasküler yataklarda ESL kalınlığı (ve, uzatma, glycocalyx bütünlüğü) anlamak için geliştirilmiştir. Bu teknikler, endotel yüzeyinden endotel zar (Mikropartikül görüntü velosimetri ⁹⁾ yanı sıra, hantal, floresan-etiketli damar işaretleyicileri (örneğin dekstranlar) kapsamından ölçüm mesafe bir fonksiyonu olarak hız mikropartikül dolaşan farklılıklar ölçümü, (dekstran dışlama tekniği ^{10, 11).} Bu teknikler, sadece dekstran dışlanma zaman içinde tek bir noktada yapılan ölçümlerden ESL kalınlığı tahmin yeteneğine sahiptir. Eşzamanlı olarak aydınlık mikroskobu (genişliği kullanılarak vasküler genişlikleri ölçerek"görünmez" ESL) ve ESL dışlanmış bir vasküler tracer floresan mikroskop clusive, ESL kalınlığı vasküler genişlikleri ² arasındaki bir buçuk fark olarak hesaplanabilir.

ESL kalınlığı ani bir ölçü kullanılması pulmoner glycocalyx çalışmaları için çok uygundur. Akciğer intravital mikroskopi belirgin pulmoner ve kardiyak hareket artefaktı verilen zordur. Son gelişmeler vivo ^{12, 13} fare akciğer immobilizasyonu için izin iken, endişeleri akciğer staz fizyolojik etkileri ile ilgili hangi. Akciğer hareketsizlik ¹⁴ sinyalizasyon azalmış endotelyal nitrik oksit, nötrofil adezyonu ¹⁵ ve akciğer hasarı ¹⁶ hem de etkilediğini bir sinyal yolağı ile ilişkilidir. Dahası, klasik fizyolojik kavramlar doğrultusunda akciğer zararlı kesme kuvvetleri ("atelectrauma" denilen) mobil alveoller çevreleyen ortaya bir alanı immobilizasyonu,alveoler bağımlılık ^17.

2008 yılında, Arata Tabuchi, Wolfgang Kuebler ve arkadaşları serbestçe hareket eden fare akciğer ¹⁸ intravital mikroskopi için izin veren bir cerrahi tekniği geliştirdi. Bu teknik kaynaklanan Solunum dışlayıcı aydınlık ve floresan mikroskobu ile eş zamanlı ölçüm da dahil olmak üzere yüksek hızlı görüntülemede kullanımı tarafından etkisiz olabilir. Anlık dekstran dışlama görüntüleme in vivo, serbestçe hareket fare akciğer subplevral mikrosirkülasyon ESL kalınlığını ölçmek için istihdam edilebilir Bu yazıda ayrıntılı. Bu teknik, kolayca, fonksiyon özellikle glycocalyx belirlemek için endotel yüzeyinden dolaşan elemanları dışarıda bırakmak ESL bir bozulmamış bir yeteneklerini değiştirilebilir. Biz son zamanlarda, sepsis ² gibi sistemik inflamatuar hastalıklar sırasında akut akciğer hasarı gelişmesine pulmoner ESL bütünlüğünün önemini belirlemek için bu teknikler kullandık.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

1. Cerrahi Boru, Vasküler Kateterler, Göğüs Duvarı Pencere hazırlanması

1. Intravital mikroskop sahne. Biz anestezi fare mikroskopi sırasında yatıyor bunun üzerine pleksiglas sahne ısmarlama. Bu aşama 10 cm esnek plastik kesme tahtası (fare anestezi indüksiyonu, trakeostomi yerleştirme ve venöz kateterizasyon sırasında yatıyor bunun üzerine) yanı sıra, benzer bir büyüklükte bir ısıtma elemanı (kesme tahtası altında bulunan) bir 15 cm de barındırmaktadır.
2. Fare torakostomi tüpünün hazırlanması (Şekil 1). PE 50 tüpü (Intramedic, iç çapı 0.58 mm, dış çapı 0.965 mm) olan bir 10 cm uzunluğunda kesilir. Bir ucu kavisli bir 23 gauge iğneden kör ucuna takılır, bu iğne göğüs pencerenin kapanması öncesinde, göğüs duvarı (→ dışında içine) yoluyla tüp geçirmek için kullanılır.
   Tüpünün distal ucu (ekteki 23 gauge karşısında uzunluğu 1.5 cm,iğne) art arda intratorasik hava etkili aspirasyon kolaylaştırmak için "yan port" oluştururken, 30 gauge iğne ile delinirse.
   Bu fenestre kısmı daha sonra 04:00 ipek sütür çeşitli çevresel döngüler tarafından tüpün geri kalanından ayrılır; bu döngü sonuçta 1,5 cm göğüs boşluğu içinde kısmı fenestre ankraj, bir "stopper" olarak görev yapacak.
3. Juguler venöz kateterler. PE 10 boru (Intramedic, iç çapı 0.28 mm, dış çapı 0.61 mm) İki 15 cm uzunlukta kesilir. Bir bisturi böylece Damara kolaylığı artan konik borusunun uçları için kullanılır. Hortum hortumu-olmayan kesik ucuna bağlı% 6 150 kDa dekstran çözeltisi (PBS) ihtiva eden 1 ml şırınga yolu ile temizlendi.
4. Göğüs duvarı pencere hazırlama (Şekil 2). Şeffaf poliviniliden membran (Yeni Kure Wrap, Kuresha, Tokyo) oval bir şekil (ana eksen 6 cm, ikincil eksende 4 cm) halinde kesilir. Dairesel 5 mm # 1 lamel (Bellco) α-siyanoakrilat yapıştırıcı kullanarak membran (Pattex flüssig, Henkel, Düsseldorf) yapıştırılmıştır.
5. . Pnömotoraks indüksiyon ("darbe tüp"), bir boru sistemi 10 cm uzunluğunda (iç çapı 3 mm, çap 5 mm) için boru 5 ml'lik şırınga ile bağlanır; ucunu hayvan göğüs kafesinin içine hava tanıtmak için kullanılacaktır göğüs duvarı penceresi engraftman öncesinde.
6. Amaca suya daldırma için şırınga. Bir 23 gauge iğne damıtık su içeren bir 30 mL şırınga ile eklenmiştir. İğne ucu amaç hasar görmesini önlemek için (bir metal dosya kullanılarak) bulanıklaştırılır.

2. Fare Anestezi

1. Bir fare ketamin (10 mg / ml) ve ksilazin (2 mg / ml) fare gram vücut ağırlığı başına ul 8 arasında bir dozda intraperitonal karışımı ile anestezi. Sedasyon 3 içinde gerçekleşir - 6 dk ve spontan solunumu engel olmamalıdır.
2. Elektrikli traş kullanarak, tıraşboğaz, göğüs, karın ve farenin sağ tarafında.
3. Teyp kullanarak, ince bir plastik kesme tahtası için fareyi sabitleyin. Fare baş operatörü (Şekil 3) doğru olmalıdır. Üst dişlerin altında sütür geçen bir döngü tarafından sağlanan Nazik gerginlik baş uzantısı korumak için hizmet vermektedir. Kesme tahtası trakeostomi ve venöz kateter yerleştirilmesi sırasında fare euthermia koruyarak, bir ısıtma yastığı üzerine yerleştirilir.
4. % 100 etanol ile Islak traş alanlar.
5. Bir kuyruk / pençe tutam yeterli anestezi onaylayın. Minimal yanıt eğer devam; ketamin / xylazine değilse yeterli anestezi ekstra bir bolus sağlar.

3. Trakeostomi

1. 1 cm'lik bir kesi boğaz üzerinde yapılır. Altta yatan bağ doku disseke edilir ve tükrük bezleri ayrılmış ve yanal yansıtılmaktadır. Trakeanın hemen anterior sternohyoid kas rezeke edilir.
2. 04:00 sütür bir döngü inci altında ilerletilirE trakea (Şekil 4). Döngü sonra trakea yatan sütürün iki ayrı ipliklerini oluşturarak, kesilir. Kaudal sütür trakeostomi tüpü sabitlemek için kullanılır; kraniyal sütür trakeostomi yerleştirme sırasında trakea üzerindeki gerginliği sağlamak için kullanılacaktır.
3. Iki parmak kullanılarak, üst dikiş kavranmasını ve yumuşak gerilim trakea uygulanır. Bir yatay kesik üst ve alt dikişler arasında, trakea yapılır. Bu kesi trakeal çevresi yaklaşık üçte ikisi geçmelidir. Bir flanşlı trakeostomi tüpü (Harvard Apparatus, 1.22 mm dış çap) trakeaya yerleştirilir ve kaudal trakeal dikiş kullanılarak yerine sabitlenir.
4. Trakeostomi bir hacim kontrollü küçük hayvan ventilatör (Inspira, Harvard Apparatus) bağlanır ve fare% 40 solunan oksijen ve 9 ml / kg tidal hacimleri (ayarlar Laboratuvarımızda yeterli oksijenasyon / ventilasyon korumak için optimize) ile havalandırılır. Positive ekspirasyon sonu basınç (PEEP) bu noktada başlamış değildir. Unutmayın ki, ventilatör ayarları bireysel laboratuvarlar içinde benzersiz koşulları için optimize edilmelidir. Yedek tüp (ventilatör boru Y-konnektör ve trakeostomi arasına yerleştirilen) Farklı uzunluklarda seçilen herhangi bir tidal hacim için kararlı alveoler ventilasyon sağlanması, ölü boşluk ayarlamak için kullanılabilir.

4. Venöz Kateterizasyon

1. Iç ve dış juguler venin birleşim proksimale Distal venöz dallarda izleme tarafından tespit edilebilir. Eksternal juguler yansıyan tükürük bezlerinin altında bulunursa, bu dış-iç juguler kavşak bulmak için proksimalde izlenebilmektedir.
2. Bağ dokusu çevredeki juguler kavşak ayırmak için hafif künt diseksiyon kullanın.
3. 04:00 sütürler kullanarak, juguler kavşağına (kranial) distal eksternal juguler ve internal jugular venler kapalı kravat.
4. Karina içine küçük bir kesi olunjuguler kavşağın; kanama az olmalıdır.
5. İki kateterler artımlı kesiden ve juguler gövde içine gelişmiş olabilir. Kanın geri dönüşünü sağlamak için nazik aspirasyon sonra, kateter 04:00 sütürler kullanılarak damar içinde sabitlenir.
6. Bant venöz kazara yerinden çıkması karşı önlemek için kesme tahtası için kateterler.

5. Intravital Fare Akciğer Mikroskopi Cerrahisi (Tabuchi ark uyarlanmıştır. ¹⁸⁾

1. Kalan cerrahi girişim uygulandı nereye kesme tahtası (ölçülü, anestezi fare yanı sıra bantlanmış venöz kateterler içeren), intravital mikroskop aşamasına geçilmiştir. Bir rektal ısı probu yerleştirilir, bu arabirimleri adaptif bir ısıtma sistemi (kesme tahtası altında bulunan), fare euthermia bakım sağlar.
2. Bir jugular damar kateterin bir ketamin (10 mg / ml)-ksilazin (2 mg / ml) veren bir şırınga pompası bağlanırSaatte 200 ul at karışımı. Yeterli anestezi yine kuyruk / pençe tutam kullanılarak doğrulanır.
3. Orta hattan bir kesik sonra (Şekil 5) sağ tarafına doğru yanal olarak devam edilerek, xyphoid işlemi boyun uzatılır.
4. Elektrokoter kullanımı, göğüs kaslarının göğüs kafesinin açığa çıkarılır. Bakım tam hemostaz sağlamak için alınır.
5. Sol tarafta ve bant üzerinde farenin sağ hindleg aşağı çapraz. Çıkan karın torsiyon ameliyatı kolaylığı iyileştirilmesi, hafif göğüs döner.
6. 45 derecelik bir açıyla (Şekil 6) sahneye yerleştirin; Bu konumlandırma pnömotoraks indüklenir kez akciğer göğüs duvarı uzak düşmesini sağlar.
7. ^1. kaburga (en aşağı kaburga) bir forseps ile kavradı ve yükseltilmiş; kavisli bir forseps dobra dobra kaburga altında itilir. Bu göğüs duvarından parietal plevra ayırır. Plevra unpunctured kalmalıdır.
8. Darbe tüp ve kullanmabir şırınga, hava zorla parietal plevra karşı tanıtıldı. Bu, alttaki akciğer hasar vermeden plevral yüzey ve pnömotoraksın yırtılmasına yol açar. Altta yatan akciğer akciğer zarar vermeden elektrokoter forseps tanıtımına olanak, göğüs duvarı uzak düşecek. Vantilatör gelgit hacmi azalma tipik bu adım sırasında gerekli değildir.
9. Elektrokoter forseps kullanarak, göğüs duvarı kasları incelemek ve göğüs duvarı içine bir ~ 8 mm yuvarlak delik yaparak, 5 ^inci ve 6 ^inci kaburga / parietal plevra arasında kesti. Kanama varlığında mikroskobu (Şekil 7) belirsizleştirecektir gibi, tam hemostaz muhafaza edilmesi önem taşımaktadır.
10. Bir iğne tornavida kullanarak, göğüs duvarı deliğe torakostomi tüpü yerleştirin. İğne ve göğüs duvarı torasik penceresi (Şekil 7) inferior ve lateral torasik kavite çıkmak gerekir. Diyaframı delen önlemek için dikkatli olun.Bu direnç tüp fenestre bölümünün kenarında bulunan dikiş "stopper" dan oluşuncaya kadar tüpü yavaşça göğüs duvarının dışarı çekilir.
11. Sahne düz yerleştirin.
12. Akciğer reekspansiyonu yardımcı yardımcı olmak için ventilatöre 3 cm H ₂ O PEEP ekleyin.
13. Tutkal (Pattex jel, Henkel) göğüs pencerenin etrafında çepeçevre yerleştirilir. Membran göğüs boşluğuna dış bakan cam kapak kayma ile takılır. Dikkatlice (ve çevresel olarak) yaklaşık bir pamuk aplikatör kullanarak tutkal membran.
14. Bir akciğer recruitment manevrasına (PEEP ventilatörün portu tıkalıysa sırasında 3 tidal hacimleri) gerçekleştirirken, -3 mm Hg emme göğüs tüpü uygulanır. Serbestçe tidal ventilasyon (Şekil 8) esnasında hareket ederken akciğer ısrarla yaklaşık membran olmalıdır.
15. Farenin sağ ön bacağını fare sol lateral dekübit pozisyonda sonuçlanan, sol tarafa geçti edilir.Sünger kamalar göğüs pencere mikroskopi suya daldırma objektif ile hizalanacak şekilde uygun bir şekilde fare yerleştirmek için kullanılabilir.
16. Distile su bir su daldırma objektif kullanarak, akciğer görüntülenmesi için izin mikroskop önce kapak slipi üzerinde yerleştirilir. Su aralıklı görüntüleme doldurulan gerekir.

6. Pulmoner Endotel Yüzey Tabakası Kalınlığı Ölçümü

1. Hemen göğüs duvarı kapatılmasından sonra, 500 ul FITC-etiketli 150 kDa dekstran (PBS içinde% 6 çözelti) ikinci (non-anestezi) juguler venöz kateter yoluyla uygulanır. Bu bolus hacmi resüsitasyon yanı sıra ESL ölçümü için vasküler izleyici olarak hizmet vermektedir. Dekstran bolus Nötrofil adezyon veya akciğer ödemi oluşumu ² etkilemez.
2. Su immersiyon objektif kapağı astar üzerine ortalanır. Objektif seçimi temel-olduğunu ESL kalınlık küçük farklılıklar Nümerik bir yüksek görselleştirmekHala 2 korurken cal diyafram (> 0.8) gerekli - 3 mm çalışma mesafesi (akciğer pencere ve plevral yüzey yoluyla girmesini sağlayarak). Bu amaçla 75 LWD 25x (NA 1.1) hedeflerine Nikon CFI 75 LWD 16x (NA 0,8) ve CFI kullanın.
3. Doğru hareket eden bir organ ESL kalınlığını ölçmek için, aydınlık ve floresan vasküler genişlikleri aynı anda gerçekleştirilecektir esastır. Bu eşzamanlı yansıyan ışık diferansiyel girişim kontrast yakalama (DIC, aydınlık) ve FITC görüntüleri (Şekil 9) sağlayan bir görüntü ayırıcı (Dual View, Fotometrik) kullanılarak gerçekleştirilebilir.
4. 5 saniye inspiratuar aralık sırasında sürekli görüntüleme yapılır ve kaydedilir. Daha sonra bu görüntüler odak çerçeveleri tanımlamak için gözden geçirilebilir.
5. Bir in-odaklama çerçevesi, subplevral mikrodamar (<20 mikron çapında) tanımlanmıştır kullanma; en az 3 mikrodamar genellikle tek bir çerçeve bulunur. Deney, DIC tamamlanmasından sonrave FITC-dekstran vasküler genişlikleri mikrodamar başına üç dik yakaladığını uzunlukları ortalaması alınarak (bir kör gözlemci tarafından) ölçülür. Damar her ucunda eşit ESL kalınlık varsayarak, ESL boyut ve DIC gibi Örnek Sonuçlar bölümünde anlatılan FITC-dekstran damar genişliği arasındaki bir buçuk fark ile tanımlanabilir.
6. Tipik olarak, intravital mikroskopi akciğer yaralanması veya hipotansiyon ² görülmeksizin> 90 dakika süre ile gerçekleştirilebilir. Hazırlık deneyleri gözlem dönemi sırasında fare stabilite (kan basıncı, oksijenasyon, ventilasyon, akciğer hasarı) onaylamak için yapılmalıdır. Deneysel ilaçlar işlem sırasında herhangi bir noktada ikinci (non-anestetik) juguler kateter yoluyla sokulabilir.

7. Pulmoner Endotel Yüzey Katman Bütünlüğü Alternatif Ölçme

Intakt endotel yüzey tabakası fonksiyonları (kısmen) dolaşımdaki dışlamak içinendotel yüzeyi ² ing elemanları. ESL bütünlüğünün bu nedenle giriş ve hücre yüzeyine yapışma molekülleri (örneğin, ICAM-1 gibi) ile etkileşim için bir döner elemanın becerisi (bir floresan mikrosfer gibi) ile ölçülebilir.

1. Anti-ICAM-1 etiketli floresan mikrosferler ameliyattan önce hazırlanır. Streptavidin-kaplı 0.97 mikron floresan mikrosferler oda sıcaklığında 30 dakika için biyotinile anti-ICAM-1 (YN1/1.7.4 klon, 1:50, eBioscience) antikor veya izotip kontrolü ile inkübe edilir. Mikroküreler üç kez yıkandı ve ml başına 1 x 10 ⁹ mikrosferler de PBS içinde süspansiyon haline getirilmiştir.
2. Intravital mikroskopi sırasında, mikrosfer süspansiyon (100 ul) boyun kateteri venöz içine enjekte edilir. Dolaşımı 15 dakika sonra, fosforlu görüntü 5 dakikalık bir süre içinde elde edilir. > 5 dakika boyunca hareketsiz Mikroküreler yapışık ve görüntü işleme yazılımı kullanılarak sayısal olarak kabul edilir.

8. Ötenazi

, anestezi fareler direkt kardiyak ponksiyon ile kan kaybından tarafından ötenazi uygulanır. Ötenazi akciğerler daha sonra analiz için hasat ve ek dondurulmuş hangi sonrasında bilateral pnömotoraks, ile teyit edilir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

1-6 adımları açıklanan deneysel yaklaşım eşzamanlı DIC (aydınlık) ve floresan görüntülerin birden çok kare yakalama izin verir. ESL kalınlığı belirlemek için, kaydedilen görüntülerin deneysel protokol tamamlandıktan sonra kör gözlemci tarafından incelenir. Bir in-odaklama çerçevesi, subplevral mikrodamar (<20 mikron çapında) tanımlanmıştır kullanma; en az 3 mikrodamar genellikle tek bir çerçeve (Şekil 10) bulunur. Görüntü analiz yazılımı (NIS Elemanları, Ni...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Vivo mikroskopi arasında genişleyen kullanımı ile çakışık, ESL önemli boyutu yanı sıra vasküler fonksiyonu olan sayısız katkıları hem artan takdir vardır. Bu ortaya çıkan veriler, ancak, esas olarak sistemik vasküler çalışmalarından elde edilir. Nitekim, akciğerde vivo mikroskobu kullanımı teknik olarak verilen belirgin pulmoner ve kardiyak hareket artefaktı, meydan okuyor.

Çeşitli yeni teknik gelişmeler akciğer mikro ^{12, 13} intrav...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
			Reaktif Adı
FITC-dekstran (150 kDa)	Sigma	FD150S
TRITC-dekstran (150 kDa)	Sigma	T1287
Streptavidin kaplı floresan mikrosferler	Bangs Laboratuvarlar	CP01F/10428	Ejderha yeşil flöresanlı (FITC benzer)
Ketamin	Moore Tıp
Ksilazin	Moore Tıp
Anti-ICAM-1 biotinlenmiş antikoru	eBioscience	YN1/1.7 klonlama.4	1:50 dilüsyon
Biotinlenmiş antikor izotipi	eBioscience	IgG2b eB149/10H5	1:50 dilüsyon
			EKİPMAN
Mekanik ventilatör	Harvard Apparatus	Inspira
Trakeostomi kateter	Harvard Apparatus	730028
Elektrokoter aparatı	DRE Tıp	Valleylab SSE-2L
Bipolar koter forseps	Olsen Tıp	10-1200I	9.9cm McPherson
Sıcaklık control sistemi	Dünya Hassas Aletler	ATC1000
Şırınga pompası	Harvard Apparatus	Pompa 11 Elite
Mikroskop (Widefield)	Nikon	LV-150
Mikroskop (konfokal)	Nikon	A1R
Image Splitter	Fotometrik	DV2
CCD kamera	Fotometrik	CoolSNAP HQ2
Görüntü işleme yazılımı	Nikon	NIS Elemanları
PolyVinylidine membran	Kure Wrap
Dairesel kapak kayma	Bellco	5CIR-1-BEL	5 mm, # 1 kalınlık
Tutkal (membran kayma kapağı)	Pattex	Flussig (sıvı)	Membran kapak kayma yapıştırılması için
Tutkal (fare kayma kapağı)	Pattex	Jel	Fare membran takmak için
Cerrahi boru	Intramedic	PE50, PE10
Dikin	Balıkçı		04:00 ipek
Tıraş makinesi	Oster	78997
Kavisli cerrahi forseps	Roboz
Düz cerrahi forseps	Roboz
Cerrahi makaslar	Roboz
Cerrahi microscissors	Roboz
Cerrahi iğne sürücüsü	Roboz
Cerrahi bant	Balıkçı
Mutfak süngerleri (takoz kesilmiş)	çeşitli