JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Büyüme plakası, uzunlamasına büyümenin meydana geldiği çocuk kemiklerinde kıkırdancı bir bölgedir. Yaralandığında, kemikli doku büyümeyi oluşturabilir ve bozabilir. Onarım mekanizmalarının ve büyüme plakası yenilenme stratejilerinin incelenmesine izin veren, kemik onarım dokusuna yol açan bir büyüme plakası hasarı modelini açıklıyoruz.

Özet

Tüm pediatrik kırıkların üçte biri büyüme plakasını içerir ve kemik büyümesinde bozulmaya neden olabilir. Büyüme plakası (veya fizis), uzunlamasına kemik büyümesinden sorumlu olan çocuklarda tüm uzun kemiklerin sonunda bulunan kıkırdak dokusudur. Hasar gördükten sonra, büyüme plakası içindeki kıkırdak dokusu prematür ossifikasyona uğrayabilir ve istenmeyen kemik onarım dokularına yol açabilir ve bu da "kemikli bar" oluşturur. Bazı durumlarda, bu kemik çubuk, açısal deformasyonlar gibi kemik büyüme bozukluklarına neden olabilir veya uzunlamasına kemik büyümesini tamamen durdurabilir. Halen yaralı bir büyüme plakasını tamir edebilecek herhangi bir klinik tedavi yok. Kemik bar oluşumunun altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamak ve onu inhibe etme yollarını belirlemek için bir büyüme plakası hasarı modelini kullanarak büyüme plakası yaralanmaları için daha iyi tedavi geliştirmek için mükemmel bir fırsattır. Bu protokol, bir matkap deliği defekti kullanarak sıçan proksimal tibial büyüme plakasını nasıl bozacağını açıklamaktadır. Bu smaHayvan modeli güvenilir bir şekilde kemikli bir çubuk üretir ve çocuklarda görülen büyüme bozukluklarına benzer sonuçlara neden olabilir. Bu model, kemikli çubuk oluşumunun moleküler mekanizmalarına yönelik araştırmalara izin verir ve büyüme plakası yaralanmalarında potansiyel tedavi seçeneklerini test etmek için bir araç olarak hizmet eder.

Giriş

Büyüme plakası yaralanmaları çocukluk çağı kırıklarının% 30'unu oluşturur ve bozulmuş kemik büyümesine 1 neden olabilir. Kırıklara ek olarak, büyüme plakası yaralanmaları, osteomiyelit 2 , primer kemik tümörleri 3 , radyasyon ve kemoterapi 4 ve iyatrojenik hasar 5 dahil olmak üzere diğer etiyolojilerden kaynaklanabilir. Büyüme plakası (veya fizis), uzunlamasına kemik büyümesinden sorumlu olan çocukların uzun kemiklerinin sonundaki bir kıkırdak bölgesidir. Kemik uzamasını endokondral ossifikasyon yoluyla yönlendirir; Kondrositler çoğalma ve hipertrofiye girerler ve gelen osteoblastlar tarafından trabeküler kemik 6 oluşturmak üzere yeniden modellenirler. Büyüme plakası da gelişmekte olan iskeletin zayıf bir bölgesidir, bu da yaralanmaya eğilimlidir. Büyüme plakası kırıkları veya yaralanmaları ile ilgili en büyük sorun, büyüme plakası içindeki hasar görmüş kıkırdak dokularının bE "kemik çubuk" olarak da bilinen istenmeyen kemik onarımı dokusu ile değiştirildi. Büyüme plakasındaki büyüklüğüne ve konumuna bağlı olarak, kemik çubuk açısal deformitelere veya büyümenin tamamen durdurulmasına, hatta henüz tam boylarına ulaşamayan küçük çocuklar için yıkıcı bir sekilde yol açabilir.

Şu anda yaralı bir büyüme plakasını tamir edebilecek hiçbir tedavi mevcut değil. Kemik çubuğu oluştuktan sonra, klinisyen cerrahi olarak çıkarılmasına karar vermelidir 8 . En az 2 yıl veya 2 cm iskelet büyümesi geride kalan ve kemik çubukla büyüme plağı alanının% 50'sinden azını kapsayan hastalar genellikle kemik çubuk rezeksiyonu için adaylardır. Kemik çubuğunun cerrahi olarak çıkarılması, kemikli dokunun yeniden düzenlenmesini önlemek ve çevredeki yaralı büyüme plakasının büyümeyi düzeltmesine izin vermek için genellikle bir otolog yağ grefti yerleştirilir. Ancak, bu teknikler problEmatik ve sıklıkla başarısız olur ve kemik bar tekrarlamasına ve büyümeye olumsuz etkide bulunmaya devam eder 9 . Kemik bar oluşumunu önlemenin yanı sıra büyüme plakası kıkırdağını yeniden üreten, böylece normal kemik uzatmasını geri kazandıran etkili tedavilerin geliştirilmesine kritik bir ihtiyaç vardır.

Kemik bar oluşumunun altında yatan moleküler mekanizmalar henüz aydınlatılmamıştır. Bu biyolojik mekanizmaların daha iyi anlaşılması büyüme plakası yaralanmalarından muzdarip çocuklar için daha etkili terapötik girişimlere yol açabilir. Bu mekanizmaları insanlarda incelemek zordur, hayvan modelleri, özellikle büyüme plakası hasarı sıçan modeli kullanılmıştır. 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 . Burada sunulan yöntemKağıtta, fare tibial büyüme plakasındaki bir matkap deliği kusurunun, hasardan sonra en erken 7 gün içinde ossifikasyona başlamasını ve yaralanmadan sonraki 28 gün içinde yeniden şekillendirilmesiyle tamamen olgun bir kemik çubuğu oluşturduğu öngörülebilir ve tekrarlanabilir onarım dokusuna nasıl yol açtığı açıklanmaktadır. Bu, kemikli çubuk oluşumunun biyolojik mekanizmalarının incelenmesinde ve kemik çubuğunu önleyebilecek ve / veya büyüme plakası kıkırdakını yenileyebilecek yeni tedavileri değerlendirebilecek küçük bir hayvan in vivo modelini sağlar. Örneğin, bu model, büyüme plakası kıkırdağını yeniden canlandırabilir ve büyüme plakası yaralanmalarına maruz kalan çocuklar için değerli tedavi sunabilen kondrojenik biyomalzemeleri test etmek için kullanılabilir. Bu yazıda sunulan teknikler, büyüme plakası hasarını üretmek için kullanılan cerrahi yöntemleri ve biyomalzemelerin yaralanma bölgesine teslim edilmesini anlatacaktır. Ayrıca kemik çubuk oluşumunu değerlendirmek ve dokuyu onarmak için yöntemleri tartışacağız.

Protokol

Tüm hayvansal prosedürler yerel Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmalıdır. Aşağıdaki prosedür için hayvan protokolü Colorado Denver IACUC Üniversitesi tarafından onaylandı.

1. Sıçanları Elde Edin

NOT: Genetiği değiştirilmiş hayvanlar arzu edilmedikçe, ameliyat sırasında 6 haftalık, iskelet bakımından olgunlaşmamış Sprague-Dawley farelerine ihtiyaç duyulmaktadır. Diğer suşlar potansiyel olarak kullanılabilir; Bununla birlikte, yayınlanan çalışmaların çoğunluğu Sprague-Dawley sıçanlarında yapılmıştır.

2. Cerrahi Malzemelerin Hazırlanması

  1. Aşağıdakilerden her birini içeren otoklav cerrahi besleme paketleri: # 3 neşter kulp, iğne tutucu, Adson forseps ve iris makası.
  2. Anahtarsız matkap uçlarını otoklavlayın. Matkap mandreni, birden fazla hayvanda çalışırken hayvan ameliyatları arasında boncukla sterilize edilebilir.
    NOT: Steril cerrahi kullanımıyla ilgili yerel IACUC kurallarıBirden fazla hayvana ait araçlara uyulmalıdır. Örneğin, Colorado Denver Üniversitesi IACUC, kesilmeden önce 5 hayvana kadar bir cerrahi alet seti kullanılmasına izin verir. Ayrıca, cerrahi aletler, hayvanlar arasında bir boncuk sterilizatör kullanılarak ısı ile sterilize edilmelidir. Ek hayvanlar için ilave steril cerrahi paketler kullanılmalıdır.
  3. Otoklav 5 cm Steinmann pimleri, her hayvan için bir adet.
    NOT: Enfeksiyon riskini azaltmak için, Steinmann pimleri birden fazla hayvan için kullanılmamalıdır.
  4. Otoklav 1.8 mm çapında diş hekimleri, her hayvana bir tane.
    NOT: Enfeksiyon riskini azaltmak için diş fırçaları birden fazla hayvan için kullanılmamalıdır.
  5. Varsa, bir yara kırpma aplikatörü otoklavlayın. Alternatif olarak, gömülü dikişler kutanöz tabakayı kapatmak için kullanılabilir. Bkz. Adım 7.3.
  6. Mümkünse, bir döner matkabı ışınlama veya gaz sterilizasyonu kullanarak sterilize edin.
  7. Aşağıdaki ek malzemeleri toplayın: elektrikli tıraş makinesi, steRil 3-0 poliglikolik asit dikişleri, steril gazlı bez, povidon iyot, steril salin, steril 10 mL enjektörler, steril 23-gauge iğneler, izopropil alkol çubukları, isofluran, kaliperler, cerrahi sonrası analjezikler ( örn., NSAID'ler ve buprenorfin) Steril cerrahi örtüler, steril cerrahi eldivenleri, steril # 15 bistüriye bıçakları, steril yara klipsleri, anestezi makinesi, boncuk sterilizatörü, ısıtma yastığı ve emici tabanlıklar.

3. Anestezi ve Hayvanların Hazırlanması

  1. Hayvanı, pasif temizleme sistemi ile buharlaştırıcı bir sistemden% 5 izofluran ile 1 L / dakika oksijen akışı alan 1 ila 2 L'lik bir indüksiyon hücresine sokarak anestezi uygulayın.
    NOT:% 5 izofluran'a maruz kalma, 6 haftalık fareleri 5 dakika içinde anestezi altına almalıdır.
  2. Hayvanı ameliyathaneye taşıyın ve hayvanı, işlemin geri kalan kısmı için bir burun konisi kullanarak% 2-3 izofluran ile anestezi altında tutun. Hayvancı yatağı bir ısıtma pedi üzerine yerleştirin ve bir emiciEnt underpad.
    NOT: Hayvanın ameliyat masasına sabitlenmesi gerekmez. Aşağıdaki basamaklarda belirtildiği şekilde bacak tutulması, yeterli stabilizasyon yöntemidir.
    NOT: Daha sonraki tüm işlemler hayvanla anestezi altında yapılacaktır. Bu yaştaki sıçanlarda% 2-3 izofluran, anesteziyi korumak için yeterli olmalıdır. Bu, iki aşamalı geri çekilme refleksinin test edilmesi ile doğrulanabilir.
  3. İntraoperatif analjezikleri, kurumsal olarak onaylanmış politikalara ( örn . 0.05 mg / kg buprenorfin ve 5 mg / kg karprofen) uygun olarak uygulayın.

4. Cerrahi için Tibia'nın hazırlanması

  1. Tüm arka bacak (lar) ı medial malleolden pelvise elektrikli bir tıraş makinesi ile tıraş edin.
  2. Kalibreyi kullanarak ön tibial platodan medial malleolusun alt tarafına kadar tibialin uzunluğunu ölçün ve kaydedin. Alternatif olarak, tüm tibial uzunluğunu X ışını veya mikroCT 11 Sup> , 12 , 14 . İsteğe bağlı olarak, X-ray veya microCT kullanılarak cerrahi öncesi büyüme plakası boyutlarını ölçün.
  3. Tüm bacak (lar), karın ve genital bölgeyi alkollü çubuklarla ve daha sonra povidon iyotla ıslatılmış gazlı bezle silinerek cerrahi alanı temizleyin.
    NOT: Enfeksiyon riskini en aza indirgemek için, hayvanlar anesteziden çıkarılıncaya kadar (adım 7.4) tüm sonraki prosedürler, steril koşullar altında yapılmalıdır. Tüm cerrahi materyallere steril teknik kullanılarak erişilmelidir. Ameliyat boyunca sterilliği korumak için bir cerrahi asistanın kullanılması çok önemlidir.
  4. Steril cerrahi eldivenler giyerek, fenere steril bir cerrahi örtüyü hayvanın üzerine yerleştirin, bacak (lar) merkezi fenestrasyona maruz bırakın.

5. Büyüme Plakasına Ulaşmak İçin Cerrahi Prosedür

_upload / 55571 / 55571fig1.jpg "/>
Şekil 1: Cerrahi Prosedürüne Genel Bakış.
A)
Başarılı bir büyüme plakası hasarı yaratmak için kullanılan birkaç anatomik belirteçin yeri. Diz kapsülü, tibianın femurdan ayrıldığı diz kapağının hemen arkasında (beyaz). Tibia büyüme plakası (koyu kırmızı) diz kapağının altında görülebilir ve tibi kapatmaz. Proksimal büyüme plakası, diyagonal bir düzlem oluşturan ön çeyrek hariç, çoğunlukla düz bir düzlemdir. Bu iki düzlemin kesişimi, uygun matkap açılışı için kullanılan büyüme plakası açısını oluşturur. Semitendinosus yerleştirilmesi, kuadriseps kasının posterior tibia içerisine yerleştirildiği yerdir. B) Kortikal kemiğe erişmek için tibial yumuşak dokuların anterior-medial yönden kesilmesi. C) Kortikal pencerenin distal semitendinosus yerleştirme referans noktası olarak hizalanmasını kullanarak yerleştirilmesi. D) DeğerlendirmeYaralanma derinliğini, diş fırçasındaki eğimi cortical pencere ile hizalayarak.

  1. Medial femur kondilinin distal ucundan başlayarak # 3 bistüri sapı ve # 15 bıçağı kullanarak proksimal tibianın medial-anterioru boyunca cilt boyunca ~ 1 cm'lik bir insizyon yapın ( Şekil 1A ).
    1. Deriyi altta yatan kemiğe karşı sıkıca çekin ve kesi yaparken bacağınızı sıkıca tutun.
      NOT: Bu cilt insizyonunu istenilen yerde tutacak ve temiz bir insizyon oluşturulmasına yardımcı olacaktır. Diz kapsülünü delmekten kaçınmak için omurga ile çok sıkı bastırmayınız, bu da bol miktarda kanama ile sonuçlanacak ve kalan adımları zorlaştıracaktır.
  2. 1) büyüme plakası, 2) büyüme plakası açısı, 3) diz kapsülü ve 4) semitendinosus yerleştirilmesi ( Şekil 1A ) gibi önemli anatomik belirteçleri not edin.
  3. Neşteri kullanarak, ~ 0.5 cm'lik bir insizyon yapın.E fascia ve yumuşak dokuları proksimal tibianın medial-anterior kısmında, büyüme plakasından cilt insizyonunun tabanına ( Şekil 1B ) çıkarın.
  4. Disiğin cübpe yardımıyla fascia ve yumuşak dokuları tibia'dan hafifçe ayırın veya kazının ( Şekil 1B ).
    NOT: Sondaj adımlarına müdahale etmemek için mümkün olduğunca tibiadan çok yumuşak doku çıkarmak veya kazmak önemlidir.
  5. Dinamik diyafizde tibial kortikal kemiğin içinden 10.000 RPM'de bir döner alete bağlı Steinmann pimi ile (materyal bölümünde belirtilen döner aletin düşük hızı) kortikal bir pencere açınız. Korteks penceresini, distal semitendinosus yerleştirilmesi ile hizalanacak şekilde oluşturun ( Şekil 1C ).
    1. Matkabı tibial diyafiz dikey olarak tutun ve diyafizin diğer tarafından geçirmemeye özen göstererek yavaşça delin; Kortikal pencere sadece ~ 2 mm derinlikte olmalı ve yok olduğunda yapılmalıdırDireniş hissediliyor.
    2. Yukarıdaki gibi, diğer elinizle bacağınızı sıkıca tutun.
      NOT: Bu adım için bir diş fırçası kullanılabilir. Bununla birlikte, bir dental burun kullanılıyorsa, bacak temiz bir korteks penceresi oluşturmak için ve buranın kemiğin istenen yerde kavranmasını ve kesilmesini sağlamak için sıkıca tutulmalıdır. Üstün kesme kabiliyeti göz önüne alındığında, bu adım için bir Steinmann pimi önerilir.
  6. Hafif kanamalar beklendiğinden, korteks penceresini gazlı bezle ıslatın.

6. Büyüme Plakası Zedelenmesinin Oluşturulması

  1. Dönen bir alete takılı olan 1.8 mm'lik bir diş fırını kullanarak merkezi büyüme plakası aracılığıyla delik deliği yaralanması oluşturun.
    NOT: Doğru derinlik, açı ve yön merkezi büyüme plakasını bozmakta kritiktir ( Şekil 1C ve D ). Uygun derinlik, açı ve yön elde etmek için talimatlar aşağıda verilmiştir.
    1. Diş burunu kullanarak uygun derinliği ölçmek için, begiDiş burunun ucunu, semitendinosus diz kapsülünü geçtiği proksimal tibi ile hizalayarak ( Şekil 1C ).
    2. Diz kapsülündeki diş burun ucuyla, semitendinoz boyunca bur şaftını takip edin ve burun kortikal pencereyle hizalandığına dikkat edin. Burun, eklem yüzeyini bozmadan büyüme plakasını tamamen bozmak için uygun derinliktir ( Şekil 1C ).
      NOT: Dental bur, uygun derinliği ölçmek için kullanılır. Delme sırasında derinlik referans alınması için korteks penceresiyle hizalandığı yerde kalıcı bir markörle işaretlenebilir. Bununla birlikte, anatomik belirteçler ve yukarıdaki protokollere yakından bakıldığında, burada belirtilen diş burçları üzerindeki ilk eğim (FG6), kortikal pencereyle uygun şekilde hizalanacaktır ( Şekil 1C'de görüldüğü gibi).
    3. Uygun matkap ucu elde etmek için döner aleti daha az bir açıda tutunTibia diafizine göre 30 ° dir.
      NOT: Bu görsel bir yaklaşımdır.
    4. Uygun matkap yönüne ulaşmak için, büyüme plakası açısını hedefleyin ( Şekil 1C ). Merkezi bir kusur yaratmaya yardımcı olması için büyüme plakası açısına diş çubuğu boyunca görsel bir çizgi çizin.
    5. Dönme aletini, korteks penceresine girmeden önce 10,000 RPM'ye (malzeme bölümünde belirtilen döner aletin düşük hızı) kadar açın.
    6. Döner aleti uygun bir açı ve yönde iken korteks penceresine girin ve bur işaretleyicisi korteks penceresine hizalanana kadar döner aleti itin. Doğru derinlik elde edildikten sonra, döner aleti çıkarın.
      NOT: Temiz bir yaralanma yaratmak için büyüme plakasındaki boşlukla en az zaman kullanarak büyüme plakası parçalanmasını tek bir hızlı harekette gerçekleştirin. Bu, veri analizi için önemlidir.
  2. Kanamanın beklendiği gibi, kortikal pencereyi gazlı bezle 30 saniye boyunca boşaltın.
  3. Bur uzunluğunu tekrar ölçerek yaranın uygun derinliğini sağlayın (adım 6.1.2).
    1. Burayı matkap ucu içine yerleştirin (döner aleti kapatın) ve işaretli ucu korteks penceresiyle hizalayın ( Şekil 1D ).
  4. Derinlik yetersizse, döner aracı açın ve istediğiniz derinliğe itin.
    NOT: Sondaj işleminin ikinci turu ideal değilse de, büyüme plakasını tamamen bozmak kemik çubuğun gelişiminde büyük önem taşır.
  5. 10 mL'lik bir şırınga ve 23 ölçerlik bir iğne kullanarak ~ 3 mL'lik steril salinle matkap ucu durulayın.
  6. Yarayı gazlı bezle kurutun.

7. Hasar Sonrası İşlemler

  1. Bir biyomalzeme esaslı büyüme plakası muamelesini değerlendirirken, biyomateryali uygun ölçülerde bir iğne (biyomateryal viskozitesine bağlı olarak 18 ila 26 gauge) kullanarak hasar alanına sondaj pisti boyunca enjekte edin.
    NOT: Büyüme plakası hasarının hacmi ~ 3 & #181; L ve matkap ucu hacmi ~ 20 mcL'dir. Büyüme plakası hasarına ve matkap ucuna enjekte edilebilecek maksimum malzeme hacmi 20 ila 25 μL arasındadır.
  2. Kemeri 3-0 poliglikolik asit sütürlerle dikerek yarayı kapatın. Altta yatan kemiğin izole edilmesi için korteks penceresinin üzerine kemik mumu uygulayın (isteğe bağlı).
  3. Gömülü dikişler veya yara klipsleri ile deri kesiini kapatın.
    NOT: Hayvan yaralanma yerinde çizilecek ve yarayı açabileceğinden yara klipsleri önerilir.
  4. Hayvanı izofluran anesteziden çıkarın, onu bir ısınan battaniye üzerine koyun ve uyanana kadar izleyin.
  5. Enfeksiyon riskini azaltmak için hayvanı, kuru, otoklavlanmış yatak içeren yeni bir kafese yerleştirin.
  6. Ameliyat sonrası hayvanın kilo almasına izin verin.
  7. Hayvan her 12 saatte ameliyattan 72 saat sonra, enfeksiyon işaretlerini kontrol etmek, yara klipslerinin yerinde kalmasını sağlamak ve postoperativ uygulamak için kontrol edin( Örn. Buprenorfin 0,05 mg / kg'de her 12 saatte 36 saat; karprofen 5 mg / kg'da her 24 saatte 72 saat).
  8. Anestezi altında ameliyattan 10-14 gün sonra yara klipslerini çıkartın.

Sonuçlar

Bu yöntemi kullanarak başarıyla büyüme plakası yaralanması, eklem kıkırdak yüzeyini bozmadan tibial büyüme plakasının merkezinin bozulmasını içerir. Kemik tamir dokusunun yaralanmadan yaklaşık 7 gün sonra başladığı bildirilmiştir ve hasar sonrası 28 gün sonra tam olarak gelişmiştir (mikro bilgisayarlı tomografi (mikro CT) ile görselleştirildiğinde) ( Şekil 2 ). Her ne kadar bu zaman noktaları, önceden yayınlanmış verilere dayanılar...

Tartışmalar

Bir büyüme plakası yaralanması hayvan modeli, bu yaralanmanın biyolojik mekanizmaları konusundaki anlayışımıza büyük ölçüde katkıda bulunur ve böylelikle büyüme plakası yaralanmalarından mustarip çocuklar için daha etkili terapötik müdahalelere yol açar. Başarılı bir şekilde bir kemik çubuk oluşturmak ve bu çalışmada sunulan modeli kullanarak in vivo oluşumunu incelemek için, eklem kıkırdak bozmadan, yeterli bir derinliğe delme ile büyüme plakası bozmak için önemlidi...

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Yazarlar, R03AR068087 numaralı ödül, Colorado Üniversitesi Tıp Fakültesi Akademik Zenginleştirme Fonu ve Rejeneratif Tıp için Gates Merkezi altında Ulusal Sağlık Enstitüsü (NIH) Ulusal Artrit ve Kas İskelet ve Cilt Hastalıkları Ulusal Destek Enstitüsünün fon desteğini onayladılar. . Bu çalışma NIH / NCATS Colorado CTSA Hibe Numarası UL1 TR001082 tarafından da desteklenmiştir. İçeriğin içeriği yazarların sorumluluğundadır ve resmi NIH görüşlerini temsil etmemektedir.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Scalpel handleMcKessonMCK42332500
Needle holderStoeltingRS-7824
Adson tissue forcepsSklar50-3048
Iris ScissorsSklar47-1246
Rotary ToolDremel7700Variable speed rotary tool 
Keyless Rotary Tool ChuckDremel4486
Dental BursDental Burs USAFG6Round carbide bur, ≤2mm
Steinmann pinsSimpex MedicalT-078
Hair clippersWahl 5537N
3-0 PGA surutesOasisMV-J398-V
Sterile gauze 2 x 2"Covidien441211
Povidone IodineMcKesson922-00801
Sterile salineVetone510224
10 mL luer lock syringeBecton Dickinson309604
23 gauge needleBecton Dickinson305145
Isopropyl alcohol padsDynarex1113
IsofluraneIsoFlo30125-2
CaliperMitutoyo500-196-30
CarprofenRimadyl27180
BuprenorphinePar Pharmaceuticals IncNDC 42023-179
Fenestrated Surgical DrapeMcKesson25-517
Surgical GlovesUlineS-20204
#15 Scalpel BladeAven44044
9 mm wound clipsFine Science Tools12032-09
Reflex clip applierWorld Precision Instruments500345
Absorbant underpadsMcKessonMON 43723110
Tec 3 Iso Vaporizer VetEquip911103 
Germinator 500Braintree ScientificGER 5287-120V
Warm water recirculatorKent ScientificTP-700
Absorbent UnderpadsMedline IndustriesMSC281230

Referanslar

  1. Mann, D. C., Rajmaira, S. Distribution of physeal and nonphyseal fractures in 2,650 long-bone fractures in children aged 0-16 years. J Pediatr Orthop. 10 (6), 713-716 (1990).
  2. Browne, L. P., et al. Community-acquired staphylococcal musculoskeletal infection in infants and young children: necessity of contrast-enhanced MRI for the diagnosis of growth cartilage involvement. AJR Am J Roentgenol. 198 (1), 194-199 (2012).
  3. Weitao, Y., Qiqing, C., Songtao, G., Jiaqiang, W. Epiphysis preserving operations for the treatment of lower limb malignant bone tumors. Eur J Surg Oncol. 38 (12), 1165-1170 (2012).
  4. Butler, M. S., Robertson, W. W., Rate, W., D'Angio, G. J., Drummond, D. S. Skeletal sequelae of radiation therapy for malignant childhood tumors. Clin Orthop Relat Res. (251), 235-240 (1990).
  5. Shapiro, F. Longitudinal growth of the femur and tibia after diaphyseal lengthening. J Bone Joint Surg Am. 69 (5), 684-690 (1987).
  6. Kronenberg, H. M. Developmental regulation of the growth plate. Nature. 423 (6937), 332-336 (2003).
  7. Dodwell, E. R., Kelley, S. P. Physeal fractures: basic science, assessment and acute management. Orthopaedics and Trauma. 25 (5), 377-391 (2011).
  8. Khoshhal, K. I., Kiefer, G. N. Physeal bridge resection. J Am Acad Orthop Surg. 13 (1), 47-58 (2005).
  9. Hasler, C. C., Foster, B. K. Secondary tethers after physeal bar resection: a common source of failure. Clin Orthop Relat Res. (405), 242-249 (2002).
  10. Xian, C. J., Zhou, F. H., McCarty, R. C., Foster, B. K. Intramembranous ossification mechanism for bone bridge formation at the growth plate cartilage injury site. J Orthop Res. 22 (2), 417-426 (2004).
  11. Chen, J., et al. Formation of tethers linking the epiphysis and metaphysis is regulated by vitamin d receptor-mediated signaling. Calcif Tissue Int. 85 (2), 134-145 (2009).
  12. Coleman, R. M., Schwartz, Z., Boyan, B. D., Guldberg, R. E. The therapeutic effect of bone marrow-derived stem cell implantation after epiphyseal plate injury is abrogated by chondrogenic predifferentiation. Tissue Eng Part A. 19 (3-4), 475-483 (2013).
  13. Chung, R., Foster, B. K., Xian, C. J. The potential role of VEGF-induced vascularisation in the bony repair of injured growth plate cartilage. J Endocrinol. 221 (1), 63-75 (2014).
  14. Coleman, R. M., et al. Characterization of a small animal growth plate injury model using microcomputed tomography. Bone. 46 (6), 1555-1563 (2010).
  15. Macsai, C. E., Hopwood, B., Chung, R., Foster, B. K., Xian, C. J. Structural and molecular analyses of bone bridge formation within the growth plate injury site and cartilage degeneration at the adjacent uninjured area. Bone. 49 (4), 904-912 (2011).
  16. Su, Y. W., et al. Neurotrophin-3 Induces BMP-2 and VEGF Activities and Promotes the Bony Repair of Injured Growth Plate Cartilage and Bone in Rats. J Bone Miner Res. , (2016).
  17. Zhou, F. H., Foster, B. K., Sander, G., Xian, C. J. Expression of proinflammatory cytokines and growth factors at the injured growth plate cartilage in young rats. Bone. 35 (6), 1307-1315 (2004).
  18. Sayers, D., Volpin, G., Bentley, G. The demonstration of bone and cartilage remodelling using alcian blue and hematoxylin. Biotechnic & Histochemistry. 63 (1), 59-63 (1988).
  19. Riederer, M. S., Requist, B. D., Payne, K. A., Way, J. D., Krebs, M. D. Injectable and microporous scaffold of densely-packed, growth factor-encapsulating chitosan microgels. Carbohydrate Polymers. 152, 792-801 (2016).
  20. Lee, M. A., Nissen, T. P., Otsuka, N. Y. Utilization of a murine model to investigate the molecular process of transphyseal bone formation. J Pediatr Orthop. 20 (6), 802-806 (2000).
  21. Coleman, R. M., et al. Characterization of a small animal growth plate injury model using microcomputed tomography. Bone. 46 (6), 1555-1563 (2010).
  22. Lee, S. U., Lee, J. Y., Joo, S. Y., Lee, Y. S., Jeong, C. Transplantation of a Scaffold-Free Cartilage Tissue Analogue for the Treatment of Physeal Cartilage Injury of the Proximal Tibia in Rabbits. Yonsei Med J. 57 (2), 441-448 (2016).
  23. Planka, L., et al. Nanotechnology and mesenchymal stem cells with chondrocytes in prevention of partial growth plate arrest in pigs. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. 156 (2), 128-134 (2012).
  24. Hansen, A. L., et al. Growth-plate chondrocyte cultures for reimplantation into growth-plate defects in sheep. Characterization of cultures. Clin Orthop Relat Res. (256), 286-298 (1990).
  25. Cepela, D. J., Tartaglione, J. P., Dooley, T. P., Patel, P. N. Classifications In Brief: Salter-Harris Classification of Pediatric Physeal Fractures. Clin Orthop Relat Res. , (2016).
  26. Salter, R. B., Harris, W. R. Injuries Involving the Epiphyseal Plate. The Journal of Bone & Joint Surgery. 83 (11), 1753 (2001).
  27. Chung, R., Foster, B. K., Zannettino, A. C., Xian, C. J. Potential roles of growth factor PDGF-BB in the bony repair of injured growth plate. Bone. 44 (5), 878-885 (2009).
  28. Fischerauer, E., Heidari, N., Neumayer, B., Deutsch, A., Weinberg, A. M. The spatial and temporal expression of VEGF and its receptors 1 and 2 in post-traumatic bone bridge formation of the growth plate. J Mol Histol. 42 (6), 513-522 (2011).
  29. Chung, R., Cool, J. C., Scherer, M. A., Foster, B. K., Xian, C. J. Roles of neutrophil-mediated inflammatory response in the bony repair of injured growth plate cartilage in young rats. J Leukoc Biol. 80 (6), 1272-1280 (2006).
  30. Chung, R., et al. Roles of Wnt/beta-catenin signalling pathway in the bony repair of injured growth plate cartilage in young rats. Bone. 52 (2), 651-658 (2013).
  31. Zhou, F. H., Foster, B. K., Zhou, X. F., Cowin, A. J., Xian, C. J. TNF-alpha mediates p38 MAP kinase activation and negatively regulates bone formation at the injured growth plate in rats. J Bone Miner Res. 21 (7), 1075-1088 (2006).
  32. Arasapam, G., Scherer, M., Cool, J. C., Foster, B. K., Xian, C. J. Roles of COX-2 and iNOS in the bony repair of the injured growth plate cartilage. J Cell Biochem. 99 (2), 450-461 (2006).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 125B y me plakas yaralanmasfizikkemik barossifikasyonk k rdak rejenerasyonuhidrojel

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır