Ein Ratten-Tibia-Wachstumsplatten-Verletzungsmodell, um Reparaturmechanismen zu charakterisieren und Wachstumsplatten-Regenerationsstrategien zu bewerten

Zusammenfassung

Die Wachstumsplatte ist eine knorpelige Region in den langen Knochen der Kinder, wo Längswachstum auftritt. Bei Verletzung kann das Knochengewebe das Wachstum formen und beeinträchtigen. Wir beschreiben ein Rattenmodell der Wachstumsplattenverletzung, die zu knöchernem Reparaturgewebe führt und das Studium von Reparaturmechanismen und Wachstumsplattenregenerationsstrategien ermöglicht.

Zusammenfassung

Ein Drittel aller pädiatrischen Frakturen beinhaltet die Wachstumsplatte und kann zu einem beeinträchtigten Knochenwachstum führen. Die Wachstumsplatte (oder Physis) ist Knorpelgewebe, das am Ende aller langen Knochen bei Kindern gefunden wird, die für das Längsknochenwachstum verantwortlich ist. Einmal beschädigt, kann Knorpelgewebe innerhalb der Wachstumsplatte vorzeitige Verknöcherung erfahren und zu unerwünschtem knöchernem Reparaturgewebe führen, das einen "knöchernen Stab" bildet. In einigen Fällen kann dieser knöcherne Stab zu Knochenwachstumsdeformitäten führen, wie z. B. Winkeldeformitäten, oder er kann das langsame Knochenwachstum vollständig stoppen. Es gibt derzeit keine klinische Behandlung, die eine verletzte Wachstumsplatte vollständig reparieren kann. Mit einem Tier-Modell der Wachstumsplatte Verletzung besser zu verstehen, die Mechanismen zugrunde liegenden Knochenbildung und zu identifizieren Möglichkeiten, um es zu hemmen ist eine großartige Gelegenheit, um bessere Behandlungen für Wachstumsplatten Verletzungen zu entwickeln. Dieses Protokoll beschreibt, wie man die Ratten proximale Tibia-Wachstumsplatte unter Verwendung eines Bohrlochdefekts stört. Dieses smaDas Tiermodell produziert zuverlässig einen knöchernen Stab und kann zu Wachstumsdeformitäten führen, die denen ähnlich sind, die bei Kindern gesehen werden. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung der molekularen Mechanismen der Knochenbarrenbildung und dient als Mittel, um mögliche Behandlungsmöglichkeiten für Wachstumsplattenverletzungen zu testen.

Einleitung

Wachstumsplattenverletzungen machen 30% aller pädiatrischen Frakturen aus und können zu einem beeinträchtigten Knochenwachstum führen ¹ . Zusätzlich zu Frakturen können Wachstumsplattenverletzungen durch andere Ätiologien verursacht werden, einschließlich Osteomyelitis ² , primäre Knochentumore ³ , Strahlung und Chemotherapie ⁴ und iatrogene Schäden ⁵ . Die Wachstumsplatte (oder Physis) ist eine Knorpelregion am Ende der Kinderknochen, die für das Knochenwachstum verantwortlich ist. Es fährt die Knochendehnung durch endochondrale Verknöcherung; Chondrozyten unterziehen sich der Proliferation und Hypertrophie und werden dann durch ankommende Osteoblasten umgebaut, um den Trabekelknochen zu bilden ⁶ . Die Wachstumsplatte ist auch eine schwache Fläche des sich entwickelnden Skeletts, so dass es anfällig für Verletzungen ist. Die Hauptanliegen bei Wachstumsplattenbrüchen oder -verletzungen ist, dass das beschädigte Knorpelgewebe innerhalb der Wachstumsplatte b kannE ersetzt durch unerwünschtes knöchernes Reparaturgewebe, auch bekannt als "knöcherne Stange". Abhängig von seiner Größe und Lage innerhalb der Wachstumsplatte kann der knöcherne Stab zu kantigen Deformitäten oder komplettem Wachstumsstillstand führen, eine verheerende Folge für kleine Kinder, die noch nicht ihre volle Höhe erreicht haben ⁷ .

Es gibt derzeit keine Behandlung, die eine verletzte Wachstumsplatte vollständig reparieren kann. Sobald sich die knöcherne Stange bildet, muss der Kliniker entscheiden, ob er ihn chirurgisch entfernen soll oder nicht. Patienten mit mindestens 2 Jahren oder 2 cm Skelettwachstum verbleibend und mit einem knöchernen Stab, der weniger als 50% des Wachstumsplattenbereichs überspannt, sind in der Regel Kandidaten für knöcherne Raffinierung ⁸ . Die chirurgische Entfernung des knöchernen Stabes folgt oftmals der Zwischenlage eines autologen Fett-Transplantats, um eine Reformierung des knöchernen Gewebes zu verhindern und die umgebende unverletzte Wachstumsplatte zu ermöglichen, das Wachstum wiederherzustellen. Diese Techniken sind jedoch problEmatic und oft scheitern, was zu knöcherne Bar Wiederholung und weiterhin negative Auswirkungen auf das Wachstum ⁹ . Es besteht ein kritischer Bedarf, effektive Behandlungen zu entwickeln, die nicht nur die Knochenbildung verhindern, sondern auch den Wachstumsplattenknorpel regenerieren und so die normale Knochendehnung wiederherstellen.

Die molekularen Mechanismen, die der Knochenbarren zugrunde liegen, müssen noch vollständig aufgeklärt werden. Ein besseres Verständnis dieser biologischen Mechanismen könnte zu effektiveren therapeutischen Interventionen für Kinder führen, die an Wachstumsplattenverletzungen leiden. Da das Studium dieser Mechanismen beim Menschen schwierig ist, wurden Tiermodelle verwendet, insbesondere das Rattenmodell der Wachstumsplattenverletzung ^{10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16} . Die hier dargestellte MethodePapier beschreibt, wie ein Bohrlochdefekt in der Ratten-Tibia-Wachstumsplatte zu vorhersagbarem und reproduzierbarem Reparaturgewebe führt, das erst sieben Tage nach der Verletzung eine Verknöcherung beginnt und bei 28 Tagen nach Verletzung eine vollständig ausgereifte Knochenstange bildet. Dies stellt ein kleines Tier- In-vivo- Modell zur Verfügung, in dem die biologischen Mechanismen der Knochenbarrenbildung untersucht werden können, sowie um neuartige Therapien zu bewerten, die den knöchernen Stab verhindern und / oder den Wachstumsplattenknorpel regenerieren können. Zum Beispiel kann dieses Modell verwendet werden, um chondrogene Biomaterialien zu testen, die Wachstumsplattenknorpel regenerieren und eine wertvolle Behandlung für Kinder mit Wachstumsplattenverletzungen bieten können. Die in diesem Papier vorgestellten Techniken beschreiben die chirurgischen Methoden, die zur Herstellung der Verletzung der Wachstumsplatte und der späteren Zufuhr von Biomaterialien zur Verletzungsstelle verwendet werden. Wir werden auch Methoden diskutieren, um die Knochenbildung zu beurteilen und das Gewebe zu reparieren.

Protokoll

Alle Tierverfahren müssen vom örtlichen Institutionellen Tierpflege- und -ausschuss (IACUC) genehmigt werden. Das Tierprotokoll für das folgende Verfahren wurde von der University of Colorado Denver IACUC genehmigt.

1. Ratten erhalten

HINWEIS: Sofern nicht genetisch veränderte Tiere gewünscht sind, werden zum Zeitpunkt der Operation 6 Wochen alte, skelettartig unreife Sprague-Dawley-Ratten benötigt. Andere Stämme könnten potentiell verwendet werden; Allerdings wurde die Mehrheit der veröffentlichten Studien an Sprague-Dawley-Ratten durchgeführt.

2. Vorbereitung der chirurgischen Versorgung

1. Autoklav chirurgische Versorgung Packs, die jeweils eine der folgenden: # 3 Skalpell Griff, Nadelhalter, Adson Pinzette und Iris Schere gehören.
2. Autoklav die Schnellspannbohrfutter. Bohrfutter können Perlen sterilisiert werden zwischen Tieroperationen bei Betrieb auf mehrere Tiere.
   HINWEIS: Lokale IACUC-Regeln für die Verwendung von sterilem SurgIcal Werkzeuge an mehreren Tieren müssen eingehalten werden. Zum Beispiel ermöglicht die University of Colorado Denver IACUC, dass ein chirurgisches Werkzeugset auf bis zu 5 Tiere vor ihrem Absetzen verwendet wird. Darüber hinaus müssen chirurgische Werkzeuge mit einem Wulst-Sterilisator zwischen Tieren hitzsterilisiert werden. Zusätzliche sterile chirurgische Packungen müssen für weitere Tiere verwendet werden.
3. Autoklav 5-cm Steinmann Stifte, eine für jedes Tier.
   HINWEIS: Um das Infektionsrisiko zu reduzieren, dürfen die Steinmann-Stifte nicht für mehrere Tiere verwendet werden.
4. Autoklav 1.8-mm Dentalbohrer, eine für jedes Tier.
   HINWEIS: Um das Infektionsrisiko zu reduzieren, dürfen die Dentalbohrer nicht für mehrere Tiere verwendet werden.
5. Autoklavieren Sie gegebenenfalls einen Wundclip-Applikator. Alternativ können vergrabene Nähte verwendet werden, um die Hautschicht zu schließen. Siehe Schritt 7.3.
6. Wenn möglich, sterilisieren Sie einen Rotationsbohrer mit Bestrahlung oder Gassterilisation.
7. Sammeln Sie die folgenden zusätzlichen Lieferungen: Elektrorasierer, steRile 3-0 Polyglykolsäure-Nähte, sterile Gaze, Povidon-Iod, sterile Kochsalzlösung, sterile 10-ml-Spritzen, sterile 23-Gauge-Nadeln, Isopropylalkohol-Tupfer, Isofluran, Bremssättel, postoperative Analgetika ( zB NSAIDs und Buprenorphin), Sterile chirurgische Vorhänge, sterile chirurgische Handschuhe, sterile # 15 Skalpellklingen, sterile Wundclips, Anästhesiemaschine, Perlensterilisator, wärmende Auflage und saugfähige Unterlagen.

3. Anästhesie und Vorbereitung der Tiere

1. Anästhesieren des Tieres durch Einführen in eine 1- bis 2-L-Induktionskammer, die 1 l / min Sauerstoffströmung mit 5% Isofluran aus einem Verdampfungssystem mit einem passiven Spülsystem aufnimmt.
   HINWEIS: Die Exposition gegenüber 5% Isofluran sollte 6 Wochen alte Ratten innerhalb von 5 min betäuben.
2. Bewegen Sie das Tier an die chirurgische Stelle und pflegen Sie das Tier unter Anästhesie mit 2 - 3% Isofluran mit einem Nasenkonus für den Rest des Verfahrens. Setzen Sie das Tier auf eine wärmende Auflage und ein absorbierenUnter underpad
   HINWEIS: Das Tier muss nicht an den chirurgischen Tisch befestigt werden. Das Halten des Beines, wie in den folgenden Schritten angegeben, ist eine ausreichende Methode der Stabilisierung.
   ANMERKUNG: Alle nachfolgenden Verfahren sind mit dem Tier unter Anästhesie durchzuführen. 2 - 3% Isofluran sollte ausreichen, um die Anästhesie bei Ratten in diesem Alter zu erhalten. Dies kann durch die Prüfung des bipedalen Entnahmereflexes bestätigt werden.
3. Verabreichung von intraoperativen Analgetika nach institutionell zugelassenen Maßnahmen ( zB Buprenorphin bei 0,05 mg / kg und Carprofen bei 5 mg / kg).

4. Vorbereitung der Tibia zur Chirurgie

1. Riechen Sie die ganzen Hinterbeine vom medialen Malleolus zum Becken mit einem elektrischen Rasierer.
2. Messen und Aufzeichnen der tibialen Länge vom vorderen Tibiaplateau bis zur unteren Seite des medialen Malleolus mit Bremssätteln. Alternativ messen Sie die gesamte Tibia-Länge mit Röntgen oder MikroCT ¹¹ Sup> ^{, 12 , 14} . Gegebenenfalls messen Sie die Wachstumsplattenabmessungen vor der Operation mit Röntgen oder MikroCT.
3. Reinigen Sie die chirurgische Stelle, indem Sie das gesamte Bein, den Bauch und die Genitalien mit Alkoholtupfern und dann mit Povidon-Jod-getränkten Gaze abwischen.
   HINWEIS: Um das Infektionsrisiko zu minimieren, müssen alle nachfolgenden Verfahren, bis das Tier aus der Anästhesie entfernt wird (Schritt 7.4), unter sterilen Bedingungen durchgeführt werden. Alle chirurgischen Materialien müssen mit steriler Technik zugänglich sein. Die Verwendung eines chirurgischen Assistenten wird dringend empfohlen, um die Sterilität während der Operation zu erhalten.
4. Tragen sterile chirurgische Handschuhe, legen Sie eine fenestrierte sterile chirurgische Abdeckung über das Tier, so dass das Bein (s) durch die zentrale Fenestration ausgesetzt.

5. Chirurgische Vorgehensweise, um auf die Wachstumsplatte zuzugreifen

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Abbildung 1: Überblick über die chirurgische Vorgehensweise.
A) Ort der verschiedenen anatomischen Marker verwendet, um eine erfolgreiche Wachstumsplatte Verletzung zu schaffen. Die Kniekapsel ist unmittelbar hinter der Kniescheibe (weiß) und trennt die Tibia vom Femur. Die tibiale Wachstumsplatte (dunkelrot) ist unterhalb der Kniescheibe und der Umgehung der Tibia zu sehen. Die proximale Wachstumsplatte ist eine meist flache Ebene, mit Ausnahme des vorderen Viertels, das eine diagonale Ebene bildet. Der Schnittpunkt dieser beiden Ebenen bildet den Wachstumsplattenwinkel, der für eine geeignete Bohrwinkelung verwendet wird. Die Semitendinosus-Insertion ist, wo die Quadrizeps-Muskeln in die hintere Tibia einfügen. B) Inzision durch den anterior-medialen Aspekt der tibialen Weichgewebe, um auf den kortikalen Knochen zuzugreifen. C) Ort des kortikalen Fensters mit Ausrichtung mit der distalen semitendinosus Einfügung als Referenzpunkt. D) AuswertungDie Tiefe der Verletzung durch Ausrichtung der Abschrägung auf die Zahnbürste mit dem kortikalen Fenster.

1. Machen Sie einen ~ 1-cm-Schnitt durch die Haut entlang des medial-anterioren Aspekts der proximalen Tibia mit einem # 3-Skalpell-Griff und einer # 15-Klinge, beginnend am distalen Ende des medialen Femur-Kondylus ( Abbildung 1A ).
   1. Ziehen Sie die Haut fest gegen den darunter liegenden Knochen und halten Sie das Bein fest, während Sie den Schnitt machen.
      HINWEIS: Dies wird den Hautschnitt an der gewünschten Stelle behalten und hilft bei der Erstellung eines sauberen Schnittes. Drücken Sie nicht zu fest mit dem Skalpell, um zu vermeiden, dass die Kniekapsel geputzt wird, was zu reichlichen Blutungen führen würde und die restlichen Schritte schwierig machen wird.
2. Kenntnis von wichtigen anatomischen Markern, darunter: 1) die Wachstumsplatte, 2) der Wachstumsplattenwinkel, 3) die Kniekapsel und 4) die Semitendinosus-Insertion ( Abbildung 1A ).
3. Mit dem Skalpell, machen Sie einen ~ 0,5-cm-Schnitt durch thE Fascia und Weichgewebe auf dem medial-anterioren Aspekt der proximalen Tibia, von der Wachstumsplatte bis zum Boden des Hautschnittes ( Abbildung 1B ).
4. Die Faszie und das weiche Gewebe aus der Tibia mit dem Skalpell vorsichtig zerlegen oder kratzen ( Abb. 1B ).
   HINWEIS: Es ist wichtig, so viel weiches Gewebe aus der Tibia zu entfernen oder zu kratzen, um die Bohrschritte nicht zu stören.
5. Bohren Sie ein kortikales Fenster durch den Tibia-Kortikalis an der Diaphyse mit einem Steinmann-Stift, der an einem Drehwerkzeug mit 10.000 U / min befestigt ist (niedrige Geschwindigkeit des Drehwerkzeugs im Materialbereich). Erstellen Sie das kortikale Fenster so, dass es mit der distalen Semitendinosus-Insertion übereinstimmt ( Abbildung 1C ).
   1. Halten Sie den Bohrer senkrecht zur Tibia-Diaphyse und bohren Sie langsam, wobei darauf achten, nicht durch die andere Seite der Diaphyse zu bohren; Das kortikale Fenster muss nur 2 mm Tiefe sein und wird gemacht, wenn neinWiderstand wird gefühlt
   2. Wie oben, halten Sie das Bein fest mit der anderen Hand.
      HINWEIS: Für diesen Schritt kann ein Zahnbürste verwendet werden. Wenn jedoch eine Zahnbürste verwendet wird, muss das Bein sehr fest gehalten werden, um ein sauberes kortikales Fenster zu machen und um sicherzustellen, dass der Bur packt und den Knochen an der gewünschten Stelle schneidet. Ein Steinmann-Pin wird für diesen Schritt empfohlen, da er seine hervorragende Schneidfähigkeit besitzt.
6. Dab das kortikale Fenster mit Gaze, da leichte Blutungen erwartet werden.

6. Schaffung der Wachstumsplatte Verletzung

1. Erstellen Sie eine Bohrlochverletzung durch die zentrale Wachstumsplatte mit einem 1,8-mm-Zahnbolzen, der an einem Drehwerkzeug befestigt ist.
   HINWEIS: Die richtige Tiefe, Winkel und Richtung sind bei der Störung der zentralen Wachstumsplatte kritisch ( Abbildung 1C und D ). Anleitungen zur Erreichung der geeigneten Tiefe, Winkel und Richtung sind unten angegeben.
   1. Um die passende Tiefe mit der Zahnbürste zu messen, begiN durch Ausrichten des Endes der Zahnbürste mit der proximalen Tibia, wo der Semitendinosus die Kniekapsel kreuzt ( Abb. 1C ).
   2. Mit dem Ende der Zahnbürste an der Kniekapsel, folgen Sie dem Beinschaft entlang der Semitendinosus und beachten Sie, wo die Bucht mit dem kortikalen Fenster übereinstimmt. Dies ist die geeignete Tiefe für die Bohrung, um die Wachstumsplatte vollständig zu stören, ohne die Gelenkfläche zu stören ( Fig. 1C ).
      HINWEIS: Die Zahnbürste dient zur Messung der entsprechenden Tiefe. Die Bohrkrone kann mit einer permanenten Markierung an der Stelle markiert werden, an der sie sich mit dem kortikalen Fenster ausrichtet, um die Tiefe während des Bohrens zu verweisen. Wenn jedoch die anatomischen Marker und das obige Protokoll genau referenziert werden, wird die erste Abschrägung auf die hier angegebenen Dentalbohrer (FG6) in geeigneter Weise mit dem kortikalen Fenster ausgerichtet (siehe Abbildung 1C ).
   3. Um den entsprechenden Bohrwinkel zu erreichen, halten Sie das Drehwerkzeug in einem Winkel von weniger tHan 30 ° in Bezug auf die tibiale Diaphyse.
      HINWEIS: Dies ist eine visuelle Annäherung.
   4. Um die entsprechende Bohrrichtung zu erreichen, zielen Sie auf den Wachstumsplattenwinkel ( Abbildung 1C ). Zeichnen Sie eine visuelle Linie entlang der Zahnbürste auf den Wachstumsplattenwinkel, um bei der Erstellung eines zentralen Defekts zu helfen.
   5. Drehen Sie das Drehwerkzeug auf 10.000 U / min (niedrige Drehzahl des im Werkzeugbereich angegebenen Drehwerkzeuges), bevor Sie das Kortikalfenster betreten.
   6. Mit dem Drehwerkzeug in einem geeigneten Winkel und Richtung, geben Sie das kortikale Fenster und drücken Sie das Drehwerkzeug, bis die Bur Marker mit dem kortikalen Fenster ausgerichtet ist. Sobald die richtige Tiefe erreicht ist, entfernen Sie das Drehwerkzeug.
      HINWEIS: Führen Sie die Aufprallplatte Unterbrechung in einer, schnelle Bewegung, mit minimaler Zeit mit dem Bur in der Wachstumsplatte, um eine saubere Verletzung zu schaffen. Dies ist wichtig für die Datenanalyse.
2. Dab das kortikale Fenster mit Gaze für ~ 30 s, da Blutungen erwartet wird.
3. Achten Sie auf die entsprechende Verletzungsstufe, indem Sie die Bohrungslänge erneut messen (Schritt 6.1.2).
   1. Setzen Sie den Bohrer in die Bohrleiste ein (mit dem Drehwerkzeug aus) und richten Sie die markierte Bohrung mit dem kortikalen Fenster aus ( Abbildung 1D ).
4. Wenn die Tiefe unzureichend ist, drehen Sie das Drehwerkzeug auf und drücken Sie auf die gewünschte Tiefe.
   ANMERKUNG: Obwohl eine zweite Bohrungsrunde nicht ideal ist, ist das Wachstumsplatte völlig unaufhörlich für die Entwicklung des knöchernen Stabes.
5. Spülen Sie die Bohrspur mit ~ 3 ml steriler Kochsalzlösung mit einer 10-ml-Spritze und einer 23-Gauge-Nadel.
6. Die Wunde mit Gaze trocknen

7. Nachverletzungsverfahren

1. Bei der Auswertung einer Biomaterial-basierten Wachstumsplattenbehandlung wird das Biomaterial durch die Bohrspur in die Verletzungsstelle mit einer entsprechend bemessenen Nadel (18- bis 26-gauge, abhängig von der Biomaterial-Viskosität) injiziert.
   HINWEIS: Das Volumen der Wachstumsplattenverletzung ist ~ 3 & #181, L, und das Volumen der Bohrspur beträgt ~ 20 μl. Das maximale Materialvolumen, das in die Wachstumsplattenverletzung und die Bohrspur injiziert werden kann, liegt zwischen 20 und 25 μl.
2. Schließen Sie die Wunde, indem Sie die Faszie mit 3-0 Polyglykolsäure-Nähten sägen. Wenden Sie Knochenwachs über das kortikale Fenster an, um den darunter liegenden Knochen zu isolieren (optional).
3. Schließen Sie den Hautschnitt mit vergrabenen Nähten oder Wundclips.
   HINWEIS: Wundclips werden empfohlen, da das Tier an der Verletzungsstelle kratzen und die Wunde öffnen kann.
4. Entfernen Sie das Tier aus der Isofluran-Anästhesie, legen Sie es auf eine wärmende Decke und überwachen Sie es, bis es wach ist.
5. Um das Infektionsrisiko zu reduzieren, legen Sie das Tier in einen neuen Käfig mit trockenen, autoklavierten Bettwäsche.
6. Erlauben Sie dem Tier, das Gewicht nach der Operation zu tragen.
7. Überwachen Sie das Tier alle 12 h für 72 h nach der Operation, um auf Anzeichen einer Infektion zu überprüfen, um sicherzustellen, dass die Wundclips bestehen bleiben und postoperativ zu verwalten( ZB Buprenorphin bei 0,05 mg / kg alle 12 h für 36 h und Carprofen bei 5 mg / kg alle 24 h für 72 h).
8. Entfernen Sie die Wundclips 10 - 14 Tage nach der Operation unter Anästhesie.

Ergebnisse

Eine erfolgreiche Wachstumsplattenverletzung mit dieser Methode beinhaltet die Störung des Zentrums der Tibia-Wachstumsplatte, ohne die Gelenkknorpeloberfläche zu stören. Bei knöchernem Reparaturgewebe wurde berichtet, dass es etwa 7 Tage nach der Verletzung anfängt und durch 28 Tage nach der Verletzung ¹³ vollständig entwickelt wird, wie durch Mikro-Computertomographie (Mikro-CT) sichtbar gemacht ( Abbildung 2 ). Obwohl diese Zeitpunkte hie...

Diskussion

Ein Wachstumsplattenverletzungs-Tiermodell fügt unserem Verständnis der biologischen Mechanismen dieser Verletzung weitgehend hinzu, was möglicherweise zu effektiveren therapeutischen Interventionen für Kinder führt, die unter Verletzungen von Wachstumsplatten leiden. Um eine knöcherne Stange erfolgreich zu erstellen und ihre Entstehung in vivo unter Verwendung des in dieser Arbeit vorgestellten Modells zu studieren, ist es entscheidend, die Wachstumsplatte durch Bohren in einer ausreichenden Tiefe zu st?...

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Scalpel handle	McKesson	MCK42332500
Needle holder	Stoelting	RS-7824
Adson tissue forceps	Sklar	50-3048
Iris Scissors	Sklar	47-1246
Rotary Tool	Dremel	7700	Variable speed rotary tool
Keyless Rotary Tool Chuck	Dremel	4486
Dental Burs	Dental Burs USA	FG6	Round carbide bur, ≤2mm
Steinmann pins	Simpex Medical	T-078
Hair clippers	Wahl	5537N
3-0 PGA surutes	Oasis	MV-J398-V
Sterile gauze 2 x 2"	Covidien	441211
Povidone Iodine	McKesson	922-00801
Sterile saline	Vetone	510224
10 mL luer lock syringe	Becton Dickinson	309604
23 gauge needle	Becton Dickinson	305145
Isopropyl alcohol pads	Dynarex	1113
Isoflurane	IsoFlo	30125-2
Caliper	Mitutoyo	500-196-30
Carprofen	Rimadyl	27180
Buprenorphine	Par Pharmaceuticals Inc	NDC 42023-179
Fenestrated Surgical Drape	McKesson	25-517
Surgical Gloves	Uline	S-20204
#15 Scalpel Blade	Aven	44044
9 mm wound clips	Fine Science Tools	12032-09
Reflex clip applier	World Precision Instruments	500345
Absorbant underpads	McKesson	MON 43723110
Tec 3 Iso Vaporizer	VetEquip	911103
Germinator 500	Braintree Scientific	GER 5287-120V
Warm water recirculator	Kent Scientific	TP-700
Absorbent Underpads	Medline Industries	MSC281230