Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
* Bu yazarlar eşit katkıda bulunmuştur
Transkutanöz intratrakeal enjeksiyon, spontan solunum sırasında etkili intrapulmoner ilaç verilmesine izin verir. Tekli ve çoklu enjeksiyonlar, sağkalım üzerinde hiçbir etkisi olmadan iyi tolere edilir. Tekniğin uygulanması basittir ve maddelerin akciğer gelişimi üzerindeki etkisini ve yenidoğan tavşanlarda akciğer hasarının önlenmesini inceleyebilir.
İntratrakeal (IT) ilaç dağıtımı, farmasötik maddelerin akciğere doğrudan verilmesine izin vererek potansiyel pulmoner faydayı en üst düzeye çıkarır ve sistemik ilaç maruziyetini en aza indirir. Transkutanöz teknik basittir ve doğumdan kısa bir süre sonra prematüre doğan tavşanların akciğerine maddelerin IT ile verilmesine izin verir. Yenidoğan yavrular, boynu uzatılmış olarak sırtüstü pozisyona getirilmeden önce inhale Isofluran ile uyuşturulur. Larinks, 26 gauge (G) kateterin trakeaya transkutanöz yerleştirilmesinden önce tanımlanır ve stabilize edilir. Trakeanın kateterizasyonunu takiben, bir Hamilton şırıngaya bağlı 30 G'lık künt bir iğne IT kateterine sokulur ve spontan solunum sırasında trakeaya kesin bir hacim vermek için kullanılır. IT enjeksiyonu tamamlandıktan sonra iğne ve kateter geri çekilir ve yavrunun anesteziden kurtulmasına izin verilir. Transkutanöz IT enjeksiyonu, enjekte edilen maddenin büyük bir bölümünü akciğere iletir ve çoğunluğu müdahaleden 3 saat sonra akciğerde kalır. Enjeksiyonlar doğum gününden itibaren iyi tolere edilir ve sağkalımı etkilemeden art arda birkaç gün boyunca tekrarlanabilir. Bu teknik, farmasötik ajanların akciğer gelişimi üzerindeki etkisini araştırmak ve preterm tavşanlarda neonatal akciğer hasarının önlenmesinde kullanılabilir.
Prematüre doğumu takiben kronik neonatal akciğer hastalığı (KNLD) bebeklerin önemli bir kısmında görülmeye devam etmektedir1. İyileşmiş modern yenidoğan bakımı, sağkalımı önemli ölçüde artırmış ve erken doğumu takiben önemli komplikasyonların çoğunu azaltmıştır. Nörolojik, gastrointestinal ve oftalmolojik komplikasyonlar azalmış olsa da, solunum komplikasyonları son 2 yılda büyük ölçüde değişmeden kalmıştır ve 28. gebelik haftasından önce doğan her iki bebekten biri akciğer hastalığı geliştirmiştir.
Prematürite, inflamasyon, oksidatif hasar ve ventilatörle ilişkili yaralanmaların tümü CNLD'nin patofizyolojisinde ve erken doğumu takiben kötü solunum sonuçlarında rol oynar 2,3,4. Modern yenidoğan bakımındaki önemli ilerlemelere rağmen, CNLD5,6'nın gelişimini tedavi etmek veya önlemek için sınırlı etkili tedavi mevcuttur.
CNLD'yi önlemek ve tedavi etmek için tedavi geliştirmek için yeni yaklaşımlar ve müdahaleler gerekmektedir. İntrapulmoner ilaç dağıtımı, ilaçları akciğere vermek için çekici bir müdahaledir ve yenidoğanlarda solunum yolu hastalığının seyrini değiştirebilir. İntrapulmoner ilaç tedavisi, aktif ajanların akciğere doğrudan verilmesi avantajına sahiptir, böylece ilacın hedef dışı organlarda birikimini en aza indirir 7,8 ve potansiyel olarak sistemik yan etkileri sınırlar. 2 yılı aşkın bir süredir intrapulmoner yüzey aktif madde replasmanına rağmen, yenidoğan solunum sonuçlarını iyileştirmek için ek intrapulmoner ilaç doğrulanmamıştır. Son zamanlarda, mekanik ventilasyonlu bebeklerde erken doğumu takiben pulmoner sonuçları iyileştirmek için budesonid-sürfaktan kombinasyon tedavisi tanımlanmıştır 9,10. Bununla birlikte, IT ilaç tedavisinin fonksiyonel ve yapısal etkileri hakkında çok şey bilinmemektedir, az sayıda yeni tedavi tanımlanmıştır ve yenidoğan döneminde intratrakeal ilaç dağıtımının değeri belirsizliğini korumaktadır. Potansiyel ilaçları tanımlamak ve CNLD için çok ihtiyaç duyulan tedavinin geliştirilmesine yardımcı olmak için hayvan modelleri gereklidir.
Yenidoğan akciğer hastalığını inceleyen hayvan çalışmaları en sık sıçanlar ve fareler gibi küçük hayvan modellerinde gerçekleştirilir 11,12,13. Tavşan, olgunlaşmamış insan akciğerinin yapısını ve işlevini daha yakından taklit etmek için erken doğumun ek avantajına sahiptir14. Preterm tavşanın bir sınırlaması, intrapulmoner müdahalelerin uygulanmasına izin vermek için hava yoluna erişimin zorluğudur. Erişkin tavşan ve kemirgen modelleri trans-oral endotrakeal entübasyona izin verirken, bu teknikler küçük boyutları ve üst solunum yolunun benzersiz anatomisi nedeniyle yenidoğan yavrularda zordur15,16. Yenidoğan tavşan yavrularında ilaçların verilmesi için trakeaya erişime izin vermek için alternatif yaklaşımlar gereklidir.
Bu yazıda, trakeal entübasyon ve ilaç dağıtımına izin vermek için transkutanöz iğne trakeostomisinin kullanımı anlatılmıştır.
IT enjeksiyonu içeren tüm deneyler için KU Leuven Hayvan Etik Komitesi'nden izin alınmış ve KU Leuven'in tüm hayvan refahı ve bakımı yönergelerine uyulmuştur.
1. Hazırlık
2. Yavruların teslimatı
NOT: Tavşan yavruları (Yeni Zelanda beyaz-Flaman dev melezi), daha önce grubumuz17 tarafından tarif edildiği gibi akciğer gelişiminin sakküler fazı sırasında 28. gebelik gününde (31 günlük dönem) histerotomi ile doğurtuldu. Yavrular, erken doğumdan sonra akciğer gelişimini incelemek için normoksiye veya akut akciğer hasarını incelemek için hiperoksiye yerleştirilebilir.
3. Anestezi
4. İntratrakeal enjeksiyon için konumlandırma
5. İntratrakeal enjeksiyonun yapılması ( Şekil 1)
6. Prosedürden kurtarma
Tek ve tekrarlanan günlük transkutanöz IT enjeksiyonları tekniğinin temsili sonuçları yayınlanmıştır ve sağkalımın IT enjeksiyonundan (tekli veya çoklu enjeksiyonlar) etkilenmediğini ve plasebo (salin) ile IT enjeksiyonunun kontrollere kıyasla akciğer fonksiyonunu veya akciğer yapısını değiştirmediğini göstermiştir18.
Ek olarak, elektroaktif bir izleyici (2-deoksi-2-[18F]floro-D-glukoz (FDG)) ve pozitron emisy...
BT enjeksiyonunu başarılı bir şekilde gerçekleştirmek için birkaç kritik adım izlenmelidir. Doğru yapıldığında, transkutanöz IT enjeksiyon yöntemi, preterm tavşanda etkili ve güvenilir intrapulmoner ilaç verilmesine izin verir. Yeni doğan yavrular kolayca hipotermik hale geldiğinden sıcaklık kontrolü önemlidir ve bu da hayatta kalmayı olumsuz yönde etkileyebilir. Yavruları indüksiyon odasına yerleştirmeden önce, normotermik koşulları korumak için sıcak...
Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Bu araştırma, KU Leuven'den (C24/18/101) bir C2 hibesi ve Araştırma Vakfı - Flanders'tan (FWO G0C4419N) bir araştırma bursu ile desteklenmiştir. A.G., Avrupa Komisyonu Erasmus+ Programı (2013-0040) tarafından desteklenmektedir. YR, FWO-SB bursuna sahiptir (Araştırma Vakfı - Flanders, 1S71619N). Finansman kuruluşlarının hiçbiri çalışmanın tasarımında ve verilerin toplanması, analizi ve yorumlanmasında yer almamıştır.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Anesthesia | |||
Heating matt to prevent cooling during anesthesia | 1 | ||
Isoflurane vaporizer with oxygen supply | 1 | ||
Isoflurane (Iso-Vet; 1000 mg/g) | Dechra Veterinary Products NV, Belgium | 2% at 2 liters/minute | |
Plexiglas induction chamber with exhaust and scavenger | In house built | 1 | |
Positioning for injection | |||
Mounting stage | In-house built (made out of styrofoam to allow flexible positioning | 1 | |
Nose cone connected to anesthetic circuit | 1 | ||
Scavenger system | 1 | ||
Tape to restrain limbs | Any | 1 roll | |
Intratracheal injection | |||
Allis tissue forceps | 1 | ||
19-mm-long 26-gauge catheter | BD Biosciences | 391349 | 1 |
Hamilton syringe (10µl with 20 mm blunt 30-gauge needle | Hamilton Company | 7638-01 | 1 |
Pharmaceutical substance of choice | as per protocol | ||
Saline (0.9% NaCl) | 5 µl per animal | ||
Animal housing | |||
Humidity- and temperature-controlled incubator | Okolab Srl. Custom built cage incubator. Alternatively, in-house built cage incubators can be used |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır