Patlamaya Bağlı Koklear Yaralanmayı İncelemek için Lazer Kaynaklı Şok Dalgasının Araştırma Uygulaması

Özet

Burada, lazer kaynaklı şok dalgası (LISW) kullanarak patlamaya bağlı koklear hasarın bir hayvan modelini oluşturmak için deneysel protokolleri açıklıyoruz. Temporal kemiğin LISW'ye maruz kalması, blast ile indüklenen koklear patofizyolojinin çoğaltılmasına izin verir. Bu hayvan modeli, koklear patolojiyi aydınlatmak ve patlama yaralanmaları için potansiyel tedavileri keşfetmek için bir platform olabilir.

Özet

Kulak, patlama aşırı basıncına en duyarlı organdır ve koklear yaralanmalar sıklıkla patlamaya maruz kaldıktan sonra meydana gelir. Patlamaya maruz kalma, yaşam kalitesini olumsuz yönde etkileyen geri dönüşü olmayan bir işitme kaybı olan sensörinöral işitme kaybına (SNHL) yol açabilir. Tüy hücrelerinin kaybı, spiral ganglion nöronları, koklear sinapslar ve stereosiliaların bozulması gibi blast kaynaklı ayrıntılı koklear patolojiler daha önce belgelenmiştir. Bununla birlikte, bir patlama yaralanmasından sonra koklear sensörinöral bozulmanın belirlenmesi zordur, çünkü patlama aşırı basıncına maruz kalan hayvanlar genellikle timpanik membran perforasyonu (TMP) yaşar ve bu da eşzamanlı iletim tipi işitme kaybına neden olur. Saf sensörinöral koklear disfonksiyonu değerlendirmek için, lazer kaynaklı bir şok dalgası kullanarak patlamaya bağlı koklear hasarın deneysel bir hayvan modelini geliştirdik. Bu yöntem, TMP ve eşlik eden sistemik yaralanmaları önler ve LISW maruziyetinden sonra SNHL bileşenindeki fonksiyonel düşüşü enerjiye bağlı bir şekilde yeniden üretir. Bu hayvan modeli, patolojik mekanizmaları aydınlatmak ve blast kaynaklı koklear disfonksiyon için potansiyel tedavileri araştırmak için bir platform olabilir.

Giriş

İşitme kaybı ve kulak çınlaması, gazilerin %62'sinde bildirilen en yaygın engeller arasındadır¹. Blast aşırı basıncına maruz kalan kişilerde sensörinöral işitme kaybı (SNHL) ve timpanik membran perforasyonu (TMP) dahil olmak üzere patlamaya bağlı çeşitli işitsel komplikasyonlar bildirilmiştir². Ayrıca, patlamalara maruz kalan bireyler üzerinde yapılan araştırmalar, patlamaya maruz kalmanın, işitme eşikleri normal aralıkta olsa bile, "gizli işitme kaybı (HHL)" olarak bilinen işitsel zamansal çözünürlükteki kusurlara yol açtığını ^{göstermektedir3}. Blast ile ilişkili ....

Protokol

Tüm deneysel prosedürler, Ulusal Savunma Tıp Koleji Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (onay # 18050) tarafından onaylandı ve Ulusal Sağlık Enstitüleri ve Japonya Eğitim, Kültür, Spor, Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'nın yönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi. Hayvanların sayısını ve acılarını en aza indirmek için her türlü çaba gösterildi.

1. Hayvanlar

1. Bu protokolü takip etmek için 8 haftalık erkek CBA/J fareleri kullanın. Deneyden önce, normalliği sağlamak için fareleri bir işitme fonksiyonu testine ve timpanik zarın endoskopik gözlemine tabi tutun.
2. 27 CBA/....

Tartışmalar

Bu çalışma, LISW kullanarak patlamaya bağlı koklear hasarın bir fare modelini doğrulamayı amaçladı. Bulgularımız, temporal kemik yoluyla LISW uygulamasını takiben, maruz kalan fare kulağının kokleada tutarlı bir patolojik ve fizyolojik düşüş sergilediğini ve buna LISW aşırı basıncında bir artışın eşlik ettiğini gösterdi. Bu sonuçlar, bu fare modelinin LISW çıktısını ayarlayarak çeşitli koklear patolojileri çoğaltmak için uygun olduğunu göste.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
532 nm Q-switched Nd:YAG laser	Quantel	Brilliant b
ABR peak analysis software	Mass Eye and Ear	N/A	EPL Cochlear Function Test Suite
Acrylic resin welding adhesive	Acrysunday Co., Ltd	N/A
confocal fluorescence microscopy	Leica	TCS SP8
cryosectioning compound	Sakura	Tissue-Tek O.C.T
CtBP2 antibody	BD Transduction	#612044
Dielectric multilayer mirrors	SIGMAKOKI CO.,LTD	TFMHP-50C08-532	M1-M3
Digital oscilloscope	Tektronix	DPO4104B
Earphone	CUI	CDMG15008-03A
Hydrophone	RP acoustics e.K.	FOPH2000
Image J software plug-in	NIH	measurement line	https://myfiles.meei.harvard.edu/xythoswfs/webui/_xy-e693768_1-t_wC4oKeBD
Light microscope	Keyence Corporation	BZ-X700
Myosin 7A antibody	Proteus Biosciences	#25–6790
Neurofilament antibody	Sigma	#AB5539
Plano-convex lens	SIGMAKOKI CO.,LTD	SLSQ-30-200PM
Prism software	GraphPad	N/A	ver.8.2.1
Scanning electron microscope	JEOL Ltd	JSM-6340F
Small digital endoscope	AVS Co. Ltd	AE-C1
Ultrasonic jelly	Hitachi Aloka Medical	N/A
Variable attenuator	Showa Optronics Co.	N/A	Currenly avaiable successor: KYOCERA SOC Corporation, RWH-532HP II
Water-soluble encapsulant	Dako	#S1964