Başlamak için, yavruları tutarken barajdan uzakta ayrı bir kafese taşıyın. Enjeksiyon prosedürüne başlamadan önce, diseksiyon mikroskobunu kullanarak, intervertebral boşluğu veya en azından yavrunun omurilik kanalının orta hattını onaylayın. 25 veya 10 mikrolitrelik bir şırıngaya, ilaç formülasyonu, virüs hazırlama veya yapay omurilik sıvısını kontrol etme vb. gibi istenen enjeksiyon maddesinin 10 mikrolitresini yükleyin.
Hayvan tamamen uyuşturulduktan sonra, vücut hareketinin azalması veya olmaması ile onaylandığı gibi, yavruları mikroskop altında nazikçe konumlandırın. Sol işaret parmağı ve başparmak ile, bilateral pelvik kuşaklar arasında yer alan orta hat boyunca intervertebral boşluğu dikkatlice palpe edin. Omurganın orta hattını tanımlamaya yardımcı olmak için kuyruğun tabanını hafifçe döndürün.
İğneyi, girintinin kesiştiği noktada 70 ila 80 derecelik bir açıyla eğerek dikkatlice yerleştirin ve merkezi sagital düzlemle aynı hizada kalmasını sağlayın. İğne kemikle temas ettiğinde, açıyı kademeli olarak yaklaşık 30 dereceye düşürün ve iğneyi intervertebral boşluğa yaklaşık iki milimetre ilerletin. 50 ila 60 saniye içinde 10 mikrolitreye kadar yavaşça enjekte edin.
Enjeksiyon tamamlandıktan sonra iğneyi 10 ila 20 saniye yerinde tutun. Sızıntıyı önlemek için iğneyi hafif bir dönüşle geri çekin. Enjeksiyonu sonra, yavrunun tamamen iyileşmesini ve yeniden ısınmasını sağlamak için yavruyu 10 ila 15 dakika boyunca bir ısıtma yastığına yerleştirin.
Yabani tip yenidoğanlarda hızlı yeşilin intratekal enjeksiyonunun yapılması, uygulanan çözeltinin yaygın olarak dağıtılmasına neden oldu. YFP raportör fareleri, CRISPR-Cas9 tabanlı gen düzenlemesinin intratekal enjeksiyonundan 10 gün sonra tüm beyinde yaygın YFP ekspresyonu gösterdi.
