Biz Yutian Gan Şekil 3 için teşekkür ederiz. Smith College Blakeslee, Wilens ve Holmes fonları; Bu çalışma, Ulusal Bilim Vakfı 0420971 tarafından desteklenen ve Howard Hughes Tıp Enstitüsü.

1. Örnek hazırlama <ol><li> Başlangıç ​​malzemesi olarak farelerden elde edilen taze, flaş dondurulmuş veya RNAlater ile tedavi edilen doku kullanın. Devam etmeden önce bir Kimwipe ile herhangi bir aşırı koruyucu kurutun. </li><li> Çevresindeki tüm tendon ve kas fasya çıkarın ve doku doku, iyi kıyılmış veya toz kadar bir soğuk oda (4 ° C) 2 dakika süreyle soğuk cam plakalar üzerine tek kenarlı Jilet ile kıyma. Önceden tartılmış mikrofuge&#39;ye tüp örnek toplayın ve doku ağırlığı belirlemek. Başlangıç ​​materyali olarak en fazla 10 mg doku kullanın. </li><li> Oda sıcaklığında 1 mg kıyılmış doku başına 45 mcL ekstraksiyon tamponu (8 M üre, 50 mM DTT,% 4 ahbap,% 0.2 taşıyıcı ampholytes 5 / 8, 0.0002% Bromophenol Mavi) ekleyin. Hacmi 350 mcL daha büyükse, başlangıçta 350 mcL ekleyin ve homojenize (adım 1.4), daha sonra sıçramasına en aza indirmek için tampon geri kalanını ekleyin. </li><li> 15 saniye için doku motorlu havaneli (Kontes Corp) ile yedi kez homojenize4 ° C, iki dakika her homojenizasyon arasındaki buz üzerinde soğutma ile. </li><li> 4 30 dakika 15.600 xg örnekleri Santrifüj ° C Süpernatantı kaydedin ve hacmini ölçmek. Hücre enkaz pelet atılır. </li><li> Buz gibi reaktif dereceli aseton (v oranı 3 kat v) süpernatantı proteinlerin çöktürün. 15 saniye vorteksleyin. Pelet formu ve Kontes motor ve polipropilen karıştırma çubukları (BioSpec Remix) ekstraksiyon tamponu ile tekrar süspansiyon 15.600 xg 10 saniye süreyle santrifüj </li><li> Adım 1.6 tekrarlayın. </li><li> Ya örneklerin protein konsantrasyonu tahmini ile devam ya da -20 ° C&#39;de saklayın </li></ol> 2. Protein konsantrasyonu tahmini Yaklaşık 4,5 mg ml -1 amacı; Lowry tahlil 7 veya BCA tahlil 8 (Pierce) kullanın. 3. Odaklama İzoelektrik <ol><li> ReadyStrip IPG şeridi çıkarın (11 cm, pH 5-8, Bio-Rad)-20 ° C ve 10-15 dakika süreyle RT gelmesini sağlayınız. </li><li> Vorteks protein örnek örnek örnek rehidrasyon tepsisini bir kanal arka kenarında düz bir çizgide ve pipet 600-800 mg (toplam hacmi 200 mcL), yaklaşık 1 cm bırakarak her iki ucunda. </li><li> Forseps kullanarak, IPG şerit plastik kapak kalkmasına şerit uçları sadece sap ve jel ile herhangi bir teması önlemek için emin olun. Not ve şerit temel tepsisinin sol tarafındaki pozisyon. Örnek üstünde aşağı IPG şerit jel tarafı yerleştirin, yakalama kabarcıkları altında kaçının. Bir saat rehidrate izin ver. </li><li> 2.5 mL mineral yağı (BioRad) Overlay. Tepsisi kapağı, kapak ve oda sıcaklığında bir gece rehidrate bırakın. </li><li> Odaklama tepsi kanalın her iki ucunda bir kağıt fitil yerleştirin ve her biri 10 mcL Millipore su ile ıslak. </li><li> Şerit IPG çıkarın ve yağ tahliye için yaklaşık 10 saniye dikey olarak tutun. Leke plastik bKimwipe ile acking. </li><li> IPG şerit jel yan odaklama tepsisinde aşağı ve sola temel sonuna yerleştirin. Şerit 2.5 mL mineral yağı ile kaplayın. </li><li> Protean IEF hücreli (Bio-Rad) ve program varsayılan 20 hücre sıcaklığında 3 aşamalı bir protokol (Tablo 1) tepsiye yerleştirin ° C, 50 uA / şerit ve rehidrasyon süresi maksimum akım. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Gerilim </td><td> Zaman </td><td> Volt-Saat </td><td> Rampa </td></tr><tr><td> Adım 1 </td><td> 250 </td><td> 20 dk. </td><td></td><td> Doğrusal </td></tr><tr><td> Adım 2 </td><td> 8.000 </td><td> 2.5 saat </td><td></td><td> Doğrusal </td></tr><tr><td> Adım 3 </td><td> 8.000 </td><td></td><td> 40.000 </td><td> Hızlı </td></tr><tr><td> Toplam </td><td></td><td> 6.5 saat </td><td> 40.000 </td><td></td></tr></tbody></table> Tablo 1. Üç adım 11 cm şeritler IPG Protean IEF hücre protokolü. </li><li> IPG şeritler forseps kullanarak IEF hücre dışına çekin. Kimwipe ile plastik desteğini Blot ve IPG şerit jel tarafı, temiz bir rehidrasyon tepsiye yerleştirin. Rehidrasyon tepsi örtüsü ve plastik wrap ve mağaza ile sarın - 80 ° C veya devam edin. </li></ol> 4. SDS-poliakrilamid jel elektroforezi <ol><li> Şerit (jel tarafı yukarı) 11 cm dengeleme tepsisine aktarın. </li><li> Kanala azalma tamponu (6 M üre,% 2 SDS, 0.05 M Tris / HCl, pH 8.8,% 20 gliserol,% 2 DTT) 4 mL ekleyin ve hafif sallayarak 10 dakika için şerit dengeye. </li><li> Azaltılması tamponu çıkarın, alkilleme tamponu (6 M üre,% 2 SDS, 0.05 M Tris / HCl, pH 8.8,% 20 gliserol,% 2,5 iodoacetamide) 4 mL ekleyin ve hafif sallayarak 10 dakika için şerit dengeye. </li><li> Stri daldırma IPG şerit durulayın1 X SDS çalışan tampon p kısa bir süre (25 mM Tris, 192 mM glisin,% 0.1 SDS, pH 8.2). </li><li> 11 cm arka plaka üzerine şerit jel yan yatırın Kriter prekast 10.5% -14% Tris-HCl SDS-poliakrilamid jel (Bio-Rad) ve SDS jel ile tam temas edinceye kadar yavaşça itin; iki jel yüzeyler arasında sıkışıp hava kabarcığı emin olun. </li><li> 1 ml (% 0.5 agaroz, 25 mM Tris, 192 mM glisin,% 0.1 SDS, Bromophenol Mavi) erimiş agaroz çözüm IPG şerit Yerleşimi ve agaroz 5 dakika boyunca katılaşmaya izin. </li><li> Molekül ağırlığı standartları olarak tek bir kuyunun içine protein marker 5 mcL 10-225 kDa (76.740 USB, P / N) yükleyin. </li><li> Oda sıcaklığında 200 V veya jel elektroforez izlemek için Bromophenol Mavi boya ön göç kullanarak bir soğuk oda (4 ° C) SDS tamponu (25 mM Tris, 192 mM glisin,% 0.1 SDS, pH 8.2) çalıştırın. </li><li> Plastik dökme jel çıkarın ve geceleme Coomassie Brillant Blue hafifçe sallayarak lekeR-250 (% 45.5 metanol,% 45.5 dH2O,% 9.0 asetik asit,% 0.25 Coomassie Brillant Blue R-250) leke. </li><li> 3 saat gecede her bir ve Destain 2 (% 5 metanol,% 90 dH 2 O,% 5 asetik asit) için jel Destain 1 solüsyonu (% 45.5 metanol,% 45.5 dH 2 O,% 9.0 asetik asit) iki kez çalkalayın . Analiz için% 7 asetik asit jel saklayın. </li></ol> 5. Jel görüntüleme ve analiz <ol><li> VersaDoc görüntüleme sistemi (BioRad) faaliyet Miktar Bir yazılım programı kullanarak jeller, görüntüler yakalayın. Denemenizi tüm jeller için düzgün görüntü alanları kırpın. </li><li> Bir deney seti oluşturmak için kırpılmış görüntüleri PDQuest 8.0 yazılım programı yükleyin. Nokta tespiti ve jeller arasında eşleştirme nokta için parametreleri tanımlamak için Deney kurulum sihirbazı izleyin. Kontrol edin ve gerekirse elle sonuçları eşleşen spot rafine. </li><li> Tw ile eşleşen protein noktaları tespit etmek için jeller nicel ve istatistiksel analiz yapıniki jel grupları arasında ifade o kat veya daha yüksek istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar. Bu ilgi çekici noktalar ile bir analiz oluşturun ve tripsin sindirim ve LC-MS-tabanlı protein belirlenmesi için bir EXQuest spot kesici (BioRad) kullanarak bunları kesip. </li></ol> 6. Jel triptik sindirim Bu adımı modifiye Pierce-Gel Triptik Digest Kit (# 89871X, Pierce) protokolü kullanılır. <ol><li> Jel fişler destaining çözüm (25 mM amonyum bikarbonat,% 50 asetonitril) 200 mcL ekleyin. Vortex ve 37 ° örnekleri inkübe ° C ile 30 dakika boyunca sallayarak. Çözüm dikkatlice çıkarın ve atın. </li><li> 6.1 adımı tekrarlayın. </li><li> Taze hazırlanmış azaltarak tamponu (50 mM Tris [2-carboxyethyl] fosfin, 22.5 mM amonyum bikarbonat), 60 ° C&#39;de 10 dakika jel fişler ve inkübe içeren tüplere 30 mcL ekle </li><li> Örnekleri soğutmak için izin ver; sonra çıkarın ve indirgeyici tampon atın.</li><li> Alkilleme tamponu (folyo sarılı tüpler içinde hemen önce hazırlanan 100 mM iodoacetamide, 20 mM amonyum bikarbonat, 30 mcL ekleyin. Oda sıcaklığında 1 saat süreyle karanlıkta örnekleri inkübe edin. </li><li> Alkilleme tamponu çıkarın ve atın. Her tüp çözüm destaining 200 mcL ekleyerek jel fişler yıkayın. 37 örnekleri ° C&#39;de 15 dakika boyunca. </li><li> Destaining çözüm çıkartın ve atın ve yıkama tekrarlayın. </li><li> Jel fişler asetonitril 50 mcL ekleyin ve onları kuru küçültmek için izin oda sıcaklığında 10 dakika inkübe sonra asetonitril dikkatlice çıkarın. </li><li> Adım 6.8 kez daha tekrarlayın. Jel adet beyaz ve küçük bir bakmak gerekir. </li><li> Jel parçaları 10 dakika Centrivap Konsantratörü (Labconco Model EX1245) kurumasını bekleyin. </li><li> 10 mcL aktif tripsin çözeltisi (10 ng / ml tripsin, 25 mM amonyum bikarbonat) eklenerek jel parçaları şişer. 15 m için oda sıcaklığında inkübeinutes. </li><li> Tüpler 25 mcL sindirim tamponu (25 mM amonyum bikarbonat) ekleyin. Örnekleri sallayarak bir gecede oda sıcaklığında inkübe edin. </li><li> 10 dakika örnekleri sonikasyon (Branson, banyo sonikatör modeli 2510) ve yeni bir tüp süpernatant çıkarmadan önce onları aşağı doğru döndürün. Süpernatantı kaydedin. </li><li> Peptidler daha ayıklamak için, titreme 5 dakika boyunca oda sıcaklığında% 0.1 formik asit ve inkübe 10 mcL ekleyin. Örnekleri 10 dakika boyunca sonikasyon süpernatantı toplamak ve adım 6.13 kaydedilir süpernatant ile birleştirmek. </li></ol> 7. Peptid özler Mikro tuzsuzlaştırma <ol><li> Üretici talimatlarına göre PepClean C-18 Spin Kolonlar (ThermoFisher) yardımı ile peptid özleri amonyum bikarbonat ve diğer tuzlar çıkarın. </li><li> Zehir peptidler 20 mcL% 70 asetonitril ile iki kez, 1 saat ve tekrar süspansiyon için Centrivap Konsantratörü santrifüj kuru örnekleri buharlaşmasıMS analizi için 10 mcL% 0.1 formik asite peptidler. </li></ol> 8. HPLC-coupled kütle spektrometresi tarafından Protein tanımlama <ol><li> PS-DVB Pepswift yekpare bir sütun (Dionex)% 0.2 formik asit peptid karışımı 40 dakika boyunca yüksek bir performans likid kromatografi (HPLC), doğrusal bir 2-50% asetonitril degrade kullanarak ayrı ayrı 5 mcL, bir Nanospray akuple I ucunda 400 nL / dak akış hızında bir iyon tuzağı kütle spektrometresi (LÖA Deca XP Max, Thermo Fisher Scientific) üzerine kaynağıdır. </li><li> 1400 m / z ve dinamik bir dışlama ile CID MS2 sıralaması için izole edilmesi için 3 en yoğun iyon doruklarına izin - 400 arasında peptid MS1 sinyallerini algılar. </li><li> Protein tanımlanması için bir statik alkillenmiş sistein modifikasyonu ve fosforilasyon için dinamik değişiklikler (serin, treonin, tirozin), methyla Sequest fare referans veritabanı arama (BioWorks yazılım, Thermo Fisher Scientific) ile peptid sonuçları analizğünü (histidin), oksidasyon (metionin), ADP-ribosylation (arginin) ve N-terminal asetilasyon. Muhafazakar eşleştirme ölçütleri (örneğin, proteinler, Xcorr vs Şarj Devlet filtresi geçen en az 2 peptidler içeren 2 AMU ve 1.00 parçası hoşgörü, peptid hoşgörü uygulayın [z = 1 / x = 1.5, z = 2 / x = 2.00, z = 3 / x = 2.50, z = 4 / x = 3.00 ve p &lt;0.05) 5 ve elle emin protein tanımlanması için MS spektrumları incelemek bir olasılık. </li></ol> 9 - Temsilcisi Sonuçlar: Erkek ve kadın unexercised, fare iskelet kası (biceps brachii&#39;nin) ayıklanır ve iki boyutlu harita 5 kas karşılaştırmalı proteom (Şekil 2), ilk seviye ayrılır. Bir kez yüksek çözünürlüklü dijital görüntüleme kullanılarak görüntülendi; her birinde yaklaşık 800 protein noktalar tespit edildi. Erkek proteom harita kullanarak bir temel olarak, birçok noktalar kadın proteom bolca değişim olduğu açıktır. Spot şiddetleri<html> protein miktarları değişiklik önlemler (Şekil 3). Iki kat (yukarı ya da aşağı) &#39;den daha fazla değişim ve protein noktalar kimlikleri istatistiksel olarak anlamlı (p &lt;0.05) n = 5 fare ile amino asit dizi analizi, sıvı kromatografisi-birleştiğinde kütle spektrometresi ile belirlenir. Bu sonuçlar göstermektedir ki kadın şeker enerji metabolizması, enzimler, kreatin kinaz enzim (CK) izoformları, kasları farklı bir enerji arz sistemi bir bolluk azalma göstermektedir. Insan ve hayvanların, hem de dinlenme ve aşağıdaki egzersiz 9,10 daha yüksek erkek serum CK düzeyleri ekran, ancak serum CK düzeyleri mutlaka 11,12 myofibrillar kesinti miktarı ile ilişkili değildir. Bu cinsiyet dimorfizm fare biceps brachii&#39;nin kas CK hücresel bolluk içinde bir roman finding5 ve fizyolojik olarak farklı serum CK düzeyleri cevap verebilirsiniz. Şekiller: g1.jpg &quot;/&gt; Şekil 1 karşılaştırmalı proteomik protokol genel bir şematik. Numunesinin analiz; ve protein kimlik numune hazırlama protokolü üç gruba ayrılmıştır; Genel protokol durmadan yürütülmektedir, en iyi sonuçları aldı olmasına rağmen protokolleri bu üç grubun her uçları, aynı zamanda makul bir duraklatma yerlerdir. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3536/3536fig2.jpg" /> Şekil 2 dişi fare pazı brachii&#39;nin protein Karşılaştırma erkek pazı brachii&#39;nin aynı noktalar (yeşil çevrelerin o) noktalar. Kadınlarda iki kat daha büyük ya da eşit artış Spotlar daire kırmızı (o) ve iki katına eşit veya daha az düştüğü o mavi (o) daire bulunmaktadır. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3536/3536fig3.jpg" /> Şekil 3 Jel Spot Yoğunluk Analizi: X-ekseni, kadınegzersiz öncesi (kontrol, n = 5), Y-ekseni, 0 sa bir zaman noktasında grup maçı kadın tek (n = 5). Regresyon doğrusu: korelasyon katsayısı = 0,919; eğim = 0,976; önünü = -0,0293. - Kırmızı çizgi mavi çizginin üstünde ve altında iki kat Spotlar + / daha fazla değiştirebilir.

<ol>
	<li>Fehrenbach, E., Mooren, F. C., V&#246;lker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular and Cellular Exercise Physiology. , 199-217 (2005).</li><li>Mooren, F. C., Mooren, F. C., V&#246;lker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Cell.">The Cell.</a> Molecular and Cellular Exercise Physiology. , 3-18 (2005).</li><li>Thompson, H. S., Clarkson, P. M., Scordilis, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+repeated+bout+effect+and+heat+shock+proteins:+intra-muscular+HSP27+and+HSP70+expression+following+two+bouts+of+eccentric+exercise+in+humans.">The repeated bout effect and heat shock proteins: intra-muscular HSP27 and HSP70 expression following two bouts of eccentric exercise in humans.</a> Acta. Physiol. Scand. 174, 47-56 (2002).</li><li>McHugh, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+the+understanding+of+the+repeated+bout+effect:+the+protective+effect+against+muscle+damage+from+a+single+bout+of+eccentric+exercise.">Recent advances in the understanding of the repeated bout effect: the protective effect against muscle damage from a single bout of eccentric exercise.</a> Scand. J. Med. Sci. Sports. 13, 88-97 (2003).</li><li>Metskas, L. A., Kulp, M., Scordilis, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender+Dimorphism+in+the+Exercise-Naïve+Murine+Skeletal+Muscle+Proteome.">Gender Dimorphism in the Exercise-Naïve Murine Skeletal Muscle Proteome.</a> Cell Molec. Biol. Lett. 15, 507-516 (2010).</li><li>Lopez, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-dimensional+electrophoresis+in+proteome+expression+analysis.">Two-dimensional electrophoresis in proteome expression analysis.</a> J. Chromatogr. B. 849, 190-202 (2007).</li><li>Lowry, O. H., Rosenburg, N. J., Farr, A. L., Randall, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+measurement+with+the+Folin+phenol+reagent.">Protein measurement with the Folin phenol reagent.</a> J. Biol. Chem. 193, 265-275 (1951).</li><li>Smith, P. K., Krohn, R. I., Hermanson, G. T., Mallia, A. K., Gartner, F. H., Provenzano, M. D., Fujimoto, E. K., Goeke, N. M., Olson, B. J., Klenk, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+Protein+Using+Bicinchoninic+Acid.">Measurement of Protein Using Bicinchoninic Acid.</a> Anal. Biochem. 150, 76-85 (1985).</li><li>Norton, J. P., Clarkson, P. M., Graves, J. E., Litchfield, P. L., Kirwan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+creatine+kinase+activity+and+body+composition+in+males+and+females.">Serum creatine kinase activity and body composition in males and females.</a> Hum. Biol. 57, 591-598 (1985).</li><li>Amelink, G. J., Kamp, H. H., B&#228;r, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creatine+kinase+isoenzyme+profiles+after+exercise+in+the+rat:+sex-linked+differences+in+leakage+of+CK-MM.">Creatine kinase isoenzyme profiles after exercise in the rat: sex-linked differences in leakage of CK-MM.</a> Pfl&#252;gers. Arch. 412, 417-421 (1988).</li><li>Kendall, B., Eston, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise-induced+muscle+damage+and+the+potential+protective+role+of+estrogen.">Exercise-induced muscle damage and the potential protective role of estrogen.</a> Sports Med. 32 (2), 103-123 (2002).</li><li>Tiidus, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+oestrogen+influence+skeletal+muscle+damage,+inflammation,+and+repair?.">Can oestrogen influence skeletal muscle damage, inflammation, and repair?.</a> Br. J. Sports Med. 39, 251-253 (2005).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Burada sunulan LC / MS proteomik yöntemi iskelet kas proteom ilk seviye hızlı bir analizi için en güvenilir ve tekrarlanabilir bir protokoldür. Bu makul bir çare bir karşılaştırma için cinsiyet özgüllük sağlar. Düşük bolluk proteinleri, kas örnek bir fraksiyonasyon böylece artan düşük bolluk proteinler, mümkün olduğunca kontraktil proteinler gibi birçok kaldırmak için gerektirecektir. Istenirse proteom profil Terzilik farklı pH aralığında IPG şeritler ve alternatif yüzde degrade jeller ile yapılabilir. Daha hassas floresan lekeleri vardır, ama biz her laboratuar sistem bu lekeler doğrusallık belirlemek öneririz. Protein ekspresyonu daha titiz bir analizi için Dige sistemi (İki Boyutlu Elektroforez sistemi-Jel, GE Healthcare Yaşam Bilimleri) kullanılabilir, ancak bu karmaşıklık düzeyine metodoloji eklese. Ayrıca, burada açıklanan en ani protokolü ile kullanılabilirörtüşen enzimatik parçalarının yanı sıra yüksek saflıkta enzimler kullanılarak oluşturulan olabilir çünkü bir genom gibi herhangi bir kaynaktan gelen bir protein de novo sıralama olarak, sıralı edildiği için normal dokuların sürece, iki boyutlu bir jel üzerinde çözülecektir . tripsin için. Hidrofobik membran ve proteinler için arayan, ancak, biz bu protokolü kullanarak, kalp, karaciğer, böbrek ve beyin dokularında ile iyi sonuçlar vardı, özellikle diğer doku kaynaklarından alınan numuneler, ekstraksiyon yöntemi bazı değişiklikler gerekebilir. Diğer post-translasyonel modifikasyonlar tayf veritabanı arama kriterlerini değiştirerek tespit edilebilir. Özetle, biz makul proteom profil analizi için detaylı bir başlangıç ​​protokolü sundu.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifi Adı </th><th> Tip </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar </th></tr><tr><td> PepClean C-18 Spin Sütunlar </td><td> Sarf </td><td> ThermoFisher Bilimsel </td><td> PI-89.870 </td><td></td></tr><tr><td> Monolitik Pepswift sütun (100um x 5 cm) </td><td> Sarf </td><td> Dionex </td><td> 162348 </td><td></td></tr><tr><td> Kriter pre-cast 10.5% -14% Tris-HCl SDS poliakrilamid jeller </td><td> Sarf </td><td> BioRad </td><td> 345-0106 </td><td></td></tr><tr><td> IPG şeritler Readystrip </td><td> Sarf </td><td> BioRad </td><td> PH Değişen aralıkları </td><td></td></tr><tr><td> Asetik asit </td><td> Reaktif </td><td> Fisher Scientific </td><td> A465-1 </td><td></td></tr><tr><td> Aseton </td><td> Reaktif </td><td> Pharmco </td><td> 329000 </td><td></td></tr><tr><td> Asetonitril </td><td> Reaktif </td><td> Fisher Scientific </td><td> A955 </td><td></td></tr><tr><td> Agarose </td><td> Reaktif </td><td> BioRad </td><td> 163-2111 </td><td> Kaplama çözüm </td></tr><tr><td> Amonyum bikarbonat </td><td> Reaktif </td><td> Fluka </td><td> 40867 </td><td></td></tr><tr><td> Bromofenol mavi </td><td> Reaktif </td><td> Fisher Scientific </td><td> BP114 </td><td></td></tr><tr><td> Bio-Lyte Ampholytes </td><td> Reaktif </td><td> BioRad </td><td></td><td> PH Değişen aralıkları </td></tr><tr><td> Chaps </td><td> Reaktif </td><td> USB </td><td> 13361 </td><td></td></tr><tr><td> Commassie mavi R-250 </td><td> Reaktif </td><td> ThermoFisher Bilimsel </td><td> 20278 </td><td></td></tr><tr><td> Dithiothreitol (DTT) </td><td> Reaktif </td><td> USB </td><td> 15395 </td><td></td></tr><tr><td> Formik asit </td><td> Reaktif </td><td> ThermoFisher Bilimsel </td><td> 28905 </td><td></td></tr><tr><td> Gliserin </td><td> Reaktif </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> G6279 </td><td></td></tr><tr><td> Glisin </td><td> Reaktif </td><td> USB </td><td> 16407 </td><td></td&gt; </tr><tr><td> Iodoacetamide </td><td> Reaktif </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I6125 </td><td></td></tr><tr><td> Metanol </td><td> Reaktif </td><td> Fisher Scientific </td><td> A452 </td><td></td></tr><tr><td> Madeni yağ </td><td> Reaktif </td><td> BioRad </td><td> 163-2129 </td><td></td></tr><tr><td> Sodyum dodesil sülfat </td><td> Reaktif </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L6026 </td><td></td></tr><tr><td> Tris baz </td><td> Reaktif </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 93349 </td><td></td></tr><tr><td> Tris [2-carboexyethyl] fosfin </td><td> Reaktif </td><td> ThermoFisher Bilimsel </td><td> 77720 </td><td></td></tr><tr><td> Tripsin Endoproteinase TPCK tedavi, MS notu </td><td> Reaktif </td><td> Delmek </td><td> 90055 </td><td> modifiye </td></tr><tr><td> Üre </td><td> Reaktif </td><td> USB </td><td> 75826 </td><td></td></tr><tr><td> Su </td><td> Reaktif </td><td> Burdick &amp; Jackson </td><td> 365 </td><td></td></tr><tr><td> Centrivap Konsantratörü </td><td> Tool </td><td> Labconco </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Exquest nokta makası </td><td> Araç </td><td> BioRad </td><td></td><td></td></tr><tr><td> LÖA Deca XP Max iyon tuzağı kütle spektrometresi </td><td> Araç </td><td> ThermoFisher Bilimsel </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Motorlu havaneli </td><td> Araç </td><td> Kontes Corp </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Karıştırma Polipropilen </td><td> Araç </td><td> BioSpec Üretim </td><td></td><td></td></tr><tr><td> çubuklar </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Protean IEF hücre </td><td> Araç </td><td> BioRad </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Sonikatör </td><td> Araç </td><td> Branson </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Surveyor Plus, HPLC sistem </td><td> Araç </td><td> ThermoFisher Bilimsel </td><td></td><td></td></tr><tr><td> VersaDoc görüntüleme sistem </td><td> Araç </td><td> BioRad </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

skeletal muscle gender dimorphism from proteomics

Brüt iskelet kas kasılması öncelikle kontraktil proteinlerin görece küçük bir sayı tarafından belirlenir, ancak bu doku da önemli direnç egzersiz ve kullanmama atrofisi hipertrofisi gibi çevresel faktörler 1 uyarlanabilir. Böylece stresörler (ısı, iskemi, ağır metaller, vb.) 2,3 şekillenmesi ve uyarlamalar sergiler. , Sözde eksantrik kasılma 4 uzatma ederken Hasar kas kas kuvvet tarafından uygulamakla oluşabilir. Kontraktil proteinler gibi exertions hasarlı ve bozulmuş ve / veya resynthesized, tamir edilecek; bu işlevleri kontraktil proteinlerin parçası değildir, ama diğer daha az bol proteinleri hücre. Hasar bu tür ıslah ne katılan proteinlerin alt belirlemek için diferansiyel belirlemek için küresel bir proteom 5 egzersiz önce kurulmuş olmalı ve ardından egzersiz sonrasında takipprotein ekspresyonu ve böylece hasarı ve onarım uyarlamalar aday proteinleri vurgulamak. Ayrıca, iskelet kası çalışmaların çoğu türlerin erkek yapılmıştır ve dolayısıyla kadın kas temsilcisi olmayabilir. Biz bu makalede, erkek ve kadın kas proteinleri tekrarlanabilir açılan ve yüksek çözünürlüklü dijital görüntüleme 6 takiben iki boyutlu jel elektroforezi ile ayırarak için bir yöntem sunar . Bu gösteren noktalar (ve sonradan tespit proteinler) için bir protokol istatistiksel olarak anlamlı (p &lt;0.05) iki kat artış veya azalma, görünür ya da kontrolü devletin kaybolur. Bunlar daha sonra, eksize tripsin ile sindirilir ve protein tanımlama (LC / MS / MS) 5 için kütle spektrometresi (LC / MS) ile birleştiğinde yüksek basınçlı sıvı kromatografisi ile ayrılır. Bu metodoloji (Şekil 1) (karaciğer, beyin, duymak hiç değişiklik ile birçok dokuda kullanılabilirt vb.)

Watch this Scientific Journal Video about Skeletal Muscle Gender Dimorphism from Proteomics at JoVE.com

Skeletal Muscle Gender Dimorphism from Proteomics

, Izole ve en bol bulunan proteinlerin iskelet kası ifade kimliğini belirlemek için yöntemler ileri düz bir set. Yaklaşık 800 noktalar 10 mg kas iki boyutlu bir jel üzerinde ayırt bu cinsiyete özgü protein ifade belirlenmesi için olanak sağlar. Bu yöntemler çoğu dokularda eşdeğer sonuçlar verecektir.

İskelet Kası Cinsiyet Proteomik Dimorfizm

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably ...

skeletal-muscle-gender-dimorphism-from-proteomics

Research

JoVE Journal

Medicine

12.4K Görüntüleme.  Smith College. , Izole ve en bol bulunan proteinlerin iskelet kası ifade kimliğini belirlemek için yöntemler ileri düz bir set. Yaklaşık 800 noktalar 10 mg kas iki boyutlu bir jel üzerinde ayırt bu cinsiyete özgü protein ifade belirlenmesi için olanak sağlar. Bu yöntemler çoğu dokularda eşdeğer sonuçlar verecektir.

Video: Skeletal Muscle Gender Dimorphism from Proteomics

Myo-mechanical Analysis of Isolated Skeletal Muscle

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force generation and fatigability in treated muscle. We describe a detailed approach to evaluating myo-mechanical properties in freshly explanted hindlimb muscle from the mouse. We describe the atraumatic harvest of mouse extensor digitorum longus muscle, mounting the muscle in a muscle strip myograph (Model 820MS; Danish Myo Technology), and the measurement of maximal twitch and tetanic tension, contraction time, and half-relaxation time, using a square pulse stimulator (Model S48; Grass Technologies). Using these measurements, we demonstrate the calculation of specific twitch and tetanic tension normalized to muscle cross-sectional area, the twitch-to-tetanic tension ratio, the force-frequency relationship curve and the low frequency fatigue curve 4. This analysis provides a method for quantitative comparison between therapeutic interventions in mouse models of muscle disease 1,2,3,5, as well as comparison of the effects of genetic modification on muscle function 6,7,8,9.

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for muscle disease, methods are needed to quantitate force generation and fatigability in treated muscle. We detail an approach to evaluating myo-mechanical properties in explanted mouse hindlimb muscle. This analysis provides a robust approach to quantitating the effects of genetic modification on muscle function, as well as comparison of therapies in mouse models of muscle disease.

İzole İskelet Kası Myo-mekanik Analizi

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force ...

Tıp

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

Tibial Sinir transeksiyonu - Farelerde denervasyon bağlı İskelet Kas Atrofi için bir Standart Model

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly effective. This video describes the percutaneous biopsy technique using a modified Bergstr&#246;m needle to obtain skeletal muscle tissue samples from the vastus lateralis of human subjects. The Bergstr&#246;m needle consists of an outer cannula with a small opening (&#8216;window&#8217;) at the side of the tip and an inner trocar with a cutting blade at the distal end. Under local anesthesia and aseptic conditions, the needle is advanced into the skeletal muscle through an incision in the skin, subcutaneous tissue, and fascia. Next, suction is applied to the inner trocar, the outer trocar is pulled back, skeletal muscle tissue is drawn into the window of the outer cannula by the suction, and the inner trocar is rapidly closed, thus cutting or clipping the skeletal muscle tissue sample. The needle is rotated 90&#176;&#160;and another cut is made. This process may be repeated three more times. This multiple cutting technique typically produces a sample of 100-200 mg or more in healthy subjects and can be done immediately before, during, and after a bout of exercise or other intervention. Following post-biopsy dressing of the incision site, subjects typically resume their activities of daily living right away and can fully participate in vigorous physical activity within 48-72 hr. Subjects should avoid heavy resistance exercise for 48 hr to reduce the risk of herniation of the muscle through the incision in the fascia.

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Modifiye Bergström Tekniği İnsan İskelet Kası Biyopsi Prosedürleri

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Isolation and Immortalization of Patient-derived Cell Lines from Muscle Biopsy for Disease Modeling

The generation of patient-specific cell lines represents an invaluable tool for diagnostic or translational research, and these cells can be collected from skin or muscle biopsy tissue available during the patient&#8217;s diagnostic workup. In this protocol, we describe a technique for live cell isolation from small amounts of muscle or skin tissue for primary cell culture. Additionally, we provide a technique for the immortalization of myogenic cell lines and fibroblast cell lines from primary cells. Once cell lines are immortalized, substantial expansion of patient-derived cells can be achieved. Immortalized cells are amenable to many downstream applications, including drug screening and in vitro correction of the genetic mutation. Altogether, these protocols provide a reliable tool to generate and preserve patient-derived cells for downstream applications.

This protocol describes techniques for live cell isolation and primary culture of myogenic and fibroblast cell lines from muscle or skin tissue. A technique for the immortalization of these cell lines is also described. Altogether, these protocols provide a reliable tool to generate and preserve patient-derived cells for downstream applications.

Hastalık Modelleme için kas biyopsisi Hasta türetilmiş Hücre Hatları İzolasyonu ve Ölümsüzleştirme

The generation of patient-specific cell lines represents an invaluable tool for diagnostic or translational research, and these cells can be collected ...

Preparation and Respirometric Assessment of Mitochondria Isolated from Skeletal Muscle Tissue Obtained by Percutaneous Needle Biopsy

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining samples of human Vastus lateralis, isolating mitochondria from minimal amounts of skeletal muscle tissue, and plate based respirometric profiling using an extracellular flux (XF) analyzer. Comparison of respirometric profiles obtained using 1.0, 2.5 and 5.0 &#956;g of mitochondria indicate that 1.0 &#956;g is sufficient to measure respiration and that 5.0 &#956;g provides most consistent results based on comparison of standard errors. Western blot analysis of isolated mitochondria for mitochondrial marker COX IV and non-mitochondrial tissue marker GAPDH indicate that there is limited non-mitochondrial contamination using this protocol. The ability to study mitochondrial respirometry in as little as 20 mg of muscle tissue allows users to utilize individual biopsies for multiple study endpoints in clinical research projects.

Methods for biopsy of Vastus lateralis, preparation of purified mitochondria, and respirometric profiling are described. The use of small muscle volume makes this technique suitable for clinical research applications.

Perkütan İğne Biyopsisi ile Elde Edilen İskelet Kası Doku İzole Mitokondri hazırlanması ve Respirometrik Değerlendirmesi

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining ...

Quantitative Magnetic Resonance Imaging of Skeletal Muscle Disease

Quantitative magnetic resonance imaging (qMRI) describes the development and use of MRI to quantify physical, chemical, and/or biological properties of living systems. Neuromuscular diseases often exhibit a temporally varying, spatially heterogeneous, and multi-faceted pathology. The goal of this protocol is to characterize this pathology using qMRI methods. The MRI acquisition protocol begins with localizer images (used to locate the position of the body and tissue of interest within the MRI system), quality control measurements of relevant magnetic field distributions, and structural imaging for general anatomical characterization. The qMRI portion of the protocol includes measurements of the longitudinal and transverse relaxation time constants (T1 and T2, respectively). Also acquired are diffusion-tensor MRI data, in which water diffusivity is measured and used to infer pathological processes such as edema. Quantitative magnetization transfer imaging is used to characterize the relative tissue content of macromolecular and free water protons. Lastly, fat-water MRI methods are used to characterize fibro-adipose tissue replacement of muscle. In addition to describing the data acquisition and analysis procedures, this paper also discusses the potential problems associated with these methods, the analysis and interpretation of the data, MRI safety, and strategies for artifact reduction and protocol optimization.

Neuromuscular diseases often exhibit a temporally varying, spatially heterogeneous, and multi-faceted pathology. The goal of this protocol is to characterize this pathology using non-invasive magnetic resonance imaging methods.

İskelet Kası Hastalığının kantitatif Manyetik Rezonans Görüntüleme

Quantitative magnetic resonance imaging (qMRI) describes the development and use of MRI to quantify physical, chemical, and/or biological properties of ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is estimated to contribute to 19- 25% of all clinical cases of acute kidney injury (AKI) in critically ill patients. AKI detection has historically relied on metrics such as serum creatinine (sCr) or blood urea nitrogen (BUN) which are demonstrably inadequate in full assessment of nephrotoxicity in the early phase of renal dysfunction. Currently, there is no robust diagnostic method to accurately detect hemodynamic alteration in the early phase of AKI while such alterations might actually precede the rise in serum biomarker levels. Such early detection can help clinicians make an accurate diagnosis and help in in decision making for therapeutic strategy. Rats were treated with Cisplatin to induce AKI. Nephrotoxicity was assessed for six days using high-frequency sonography, sCr measurement and upon histopathology of kidney. Hemodynamic evaluation using 2D and Color-Doppler images were used to serially study nephrotoxicity in rats, using the sonography. Our data showed successful drug-induced kidney injury in adult rats by histological examination. Color-Doppler based sonographic assessment of AKI indicated that resistive-index (RI) and pulsatile-index (PI) were increased in the treatment group; and peak-systolic velocity (mm/s), end-diastolic velocity (mm/s) and velocity-time integral (VTI, mm) were decreased in renal arteries in the same group. Importantly, these hemodynamic changes evaluated by sonography preceded the rise of sCr levels. Sonography-based indices such as RI or PI can thus be useful predictive markers of declining renal function in rodents. From our sonography-based observations in the kidneys of rats that underwent AKI, we showed that these noninvasive hemodynamic measurements may consider as an accurate, sensitive and robust method in detecting early stage kidney dysfunction. This study also underscores the importance of ethical issues associated with animal use in research.

Early stage hemodynamic dysfunction is critical to the development of kidney disease. Yet, detection methodologies are limited. Recent advances in sonography provide a noninvasive, accurate option for early detection of kidney injury. This study outlines a step-by-step, sonographic methodology for detecting kidney dysfunction using a drug-induced nephrotoxicity rat model.

Sıçanlarda sonografik Teknoloji Kullanımı İlaç Kaynaklı Böbrek Hemodinamik Bozukluğu Erken Tespiti

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Ultrasound Based Assessment of Coronary Artery Flow and Coronary Flow Reserve Using the Pressure Overload Model in Mice

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow reserve (CFR) in humans. Reduced CFR is accompanied by marked intramyocardial and pericoronary fibrosis and is used as an indication of the severity of dysfunction. This study explores, step-by-step, the real-time changes measured in the coronary flow velocity, CFR and systolic to diastolic peak velocity (S/D) ratio in the setting of an aortic banding model in mice. By using a Doppler transthoracic imaging technique that yields reproducible and reliable data, the method assesses changes in flow in the septal coronary artery (SCA), for a period of over two weeks in mice, that previously either underwent aortic banding or thoracotomy. 
During imaging, hyperemia in all mice was induced by isoflurane, an anesthetic that increased coronary flow velocity when compared with resting flow. All images were acquired by a single imager. Two ratios, (1) CFR, the ratio between hyperemic and baseline flow velocities, and (2) systolic (S) to diastolic (D) flow were determined, using a proprietary software and by two independent observers. Importantly, the observed changes in coronary flow preceded LV dysfunction as evidenced by normal LV mass and fractional shortening (FS). 
The method was benchmarked against the current gold standard of coronary assessment, histopathology. The latter technique showed clear pathologic changes in the coronary artery in the form of peri-coronary fibrosis that correlated to the flow changes as assessed by echocardiography. 
The study underscores the value of using a non-invasive technique to monitor coronary circulation in mouse hearts. The method minimizes redundant use of research animals and demonstrates that advanced ultrasound-based indices, such as CFR and S/D ratios, can serve as viable diagnostic tools in a variety of investigational protocols including drug studies and the study of genetically modified strains.

Coronary flow reserve (CFR) is useful for assessment of myocardial oxygen demand and evaluation of cardiovascular risk. This study establishes a step-by-step transthoracic Doppler echocardiographic (TTDE) method for longitudinal monitoring of the changes in CFR, as measured from coronary artery in mice, under the experimental pressure overload of aortic banding.

Farelerde Basınç Aşırı Modeli Koroner Arter Akış ve Koroner Akım Rezervi Ultrason Dayalı Değerlendirme

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow ...

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and well tolerated technique. The Weil-Blakesley conchotome has a sharp biting tip with a 4 - 6 mm wide hollow. It is inserted through a 5 - 10 mm skin incision and can be maneuvered for controlled tissue penetration. The tip is opened and closed within the tissue and then rotated through 90 -180&#176; to cut the muscle. The amount of muscle obtained following repeated sampling can vary from 20 mg to 290 mg which can be processed for both histology and molecular studies. The wound needs to be kept dry and vigorous physical activity kept to a minimum for approximately 72 hr although normal levels of activity can restart immediately following the procedure. This procedure is safe and effective when close attention is paid to the selection of subjects, full asepsis and post procedure care. &#160;Both right and left vastus lateralis are suitable for biopsy dependent on participant preference.

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

This video demonstrates the technique of percutaneous muscle biopsy of the human vastus lateralis using the Weil-Blakesley conchotome.

İnsan<em&gt; Vastus lateralis</em&gt; Weil-Blakesley Conchotome kullanılması İskelet Kası Biyopsi

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

Induction and Assessment of Exertional Skeletal Muscle Damage in Humans

Contraction-induced muscle damage via voluntary eccentric (lengthening) contractions offers an excellent model for studying muscle adaptation and recovery in humans. Herein we discuss the design of an eccentric exercise protocol to induce damage in the quadriceps muscles, marked by changes in strength, soreness, and plasma creatine kinase levels. This method is simple, ethical, and widely applicable since it is performed in human participants and eliminates the interspecies translation of the results. Subjects perform 300 maximal eccentric contractions of the knee extensor muscles at a speed of 120&#176;/sec on an isokinetic dynamometer. The extent of the damage is measurable using relatively non-invasive isokinetic and isometric measures of strength loss, soreness, and plasma creatine kinase levels over several days following the exercise. Therefore, its application can be directed to specific populations in an attempt to identify mechanisms for muscle adaptation and regeneration.

This article describes a safe and reliable method to induce and quantify exertional skeletal muscle damage in human subjects.

İndüksiyon ve İnsanlarda Egzersizde İskelet Kası Hasar değerlendirilmesi

Contraction-induced muscle damage via voluntary eccentric (lengthening) contractions offers an excellent model for studying muscle adaptation and recovery ...