. Santé - Bu iş Doğa Bilimleri ve Kanada Kim Gilbert Mühendislik Araştırma Konseyi bir hibe ile desteklenen Fonds de la recherche du Québec bir öğrencilik tutar.

Hayvanlar Hayvan Bakımı Kanada Konseyi İlkelerine uygun olarak, yerel Hayvan Bakım Komitesi yönetmeliğine uygun olarak ele alınır. Sıçanlar, (21-22 ºC sıcaklık ve% 40-50 nem) ayrı ayrı sabit koşullarda muhafaza edilir 08:00 am başlayan, 12 saat karanlık-aydınlık döngüsünün dahil. Chow pelet ve musluk suyu çalışma boyunca ad libitum. Tedarikçi tarafından doğum sonrası 3 günlük bir alışma dönemi deney öncesi izin verilir. 300-800 g arasında olan erkek Sprague-Dawley sıçanları rutin olarak bu protokol ile kullanılmıştır. 1. MI Cerrahisi <ol><li> Ketamin 60 mg / kg ve ksilazin 10 mg / kg karın içinden enjeksiyonu ile anestezi neden. Pençeleri sıkışmak zaman refleksinin yokluğu ile doğru anesthetization onaylayın. </li><li> Cerrahi siteyi Tıraş. (16G 1.77 inç) kateter ve lateral dekübit pozisyonunda hayvan yerleştirin: endotrakeal tüp ile entübe sıçan. Sıcaklık yaklaşık 37 ° C tutmak için bir ısıtma pedi üzerine hayvanlar koyun. % 2 izofluran endotrakeal tüp bağlayın. </li><li> Klorheksidin glukonat ve izopropil alkol ile cerrahi siteyi hazırlayın. Ameliyat sırasında steril eldiven ve steril aletler kullanın. Anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için her iki göze oftalmik merhem sürün. Hayvan ve hayvan yanındaki başka bir steril alanında araçlara steril alan yerleştirin. </li><li> Neşter bıçak # 10 ile cildi İnsizyon. Hemostatik kelepçe ile kas dokusu soyulabilir. Ventral dekübit pozisyonunda hayvan yerleştirin. Hemostatik kelepçe ve pozisyon göğüs Retraktörü Açık göğüs duvarı. Hemostatik kelepçe ile Açık perikard. </li><li> Bitişik miyokard dokusu geçerek, koroner oklüzyon, döngü inen koroner arterin etrafında 360 mm uzunluğunda 4-0 ipek sütür üretmek. Bir 14G, 1,25 cm uzunluğunda plastik tüp içine ipek sütür her iki ucunu yerleştirin. </li><li> Ipek sütür ve irin iki ucunu çekinh aşağı arterin karşı tüp 40 dakika, bunu tıkanması için. Bir hemostatik kelepçe ile plastik tüp sıkma ile Güvenli tıkanıklığı. </li><li> 40 dakika sonra, esnek boru ve ipek dikiş çıkarılarak hazırlanabilir hemostatik kelepçe, serbest tarafından oklüzyonu bırakın. Not: Sham kontrol fareler aynı cerrahi prosedür eksi koroner arter tıkanıklığı uğrarlar. </li><li> Torasik duvar kapatmadan önce, pnömotoraks önlemek için 5 ml şırınga ile toraks havayı dışarı çekmek için göğüs boşluğundan esnek bir kateter (18G, 4.5 cm) yerleştirin. </li><li> Kapat toraks boşluğu 2-0 sütür ile, 4-0 ipek sütür ile kas ve 3-0 ipek sütür ile cilt dikiş. </li><li> Geçen cilt noktasını kapatmadan önce, yine göğüs boşluğuna önce yerleştirilmiş kateter ile 5 ml şırınga ile toraks havayı çizin. </li><li> Geçen cilt noktasını dikin. Izofluran havalandırma durdurun. </li><li> Sıçan uyanış izleyin. O Regaine olana kadar gözetimsiz bir hayvan bırakmayınd yeterli bilinç sternum yatma korumak için. </li><li> Bir antibiyotik ile bir analjezik (buprenorfin, 0,05 mg / kg ip) ile 24 saat (duplocillin tek bir dozu, 0.2 mg / kg ip) için sıçana her 8 saat tedavi edin. </li><li> Ameliyattan sonra, ev fareleri tek tek, yani kurban zamanına kadar, 3 gün sonrası MI. </li><li> Enfarktüs büyüklüğü, özellikle nekroz sol ventrikülün risk altındaki alanlarda bulunan enfarktlı doku oranı olarak ifade edilir. Bu trifeniltetrazolyum renklenme 11 kullanılarak ölçülür olabilir. </li></ol> 2. Amygdala İzolasyon <ol><li> Onun burnu dar olan uç açıklığı dışarı çıkıntılı, bir koni şeklinde çanta içinde ilk hayvan kafası yerleştirin. Güvenli sıçan herhangi bir hareketi önlemek için. Makas bıçakları arasında, giyotin üzerinde uygun başını yerleştirin. Hayvan başını kesmek. </li><li> Bir tabak sıçan Yeri başkanı ezilmiş buz tuttu. Ezilmiş buz (4 ° C) doku olarak ayırma işlemleri gerçekleştirir. </li><li> Cut açık skull makasla dikkatlice yukarı çekerek ve altındaki dokuyu yaralama kaçınarak kemik rongeurs kemik kılıfları ayırmak. </li><li> Kafatasının alt ve beynin posterior ventral yüzeyi arasında bir spatula düz bıçağı yerleştirin ve dikkatlice beyin yavaşça dışarı kaldırdı olabilir kadar yavaşça kafatasının alt kısmı boyunca ileriye doğru bıçağı iterek kafatası beyin ayırmak kafatası. Kafatası atın. </li><li> Dorsal yüzeyinde beyin yerleştirin. Hipotalamus (beyincik önünde yapısını) tanımlamak ve ön ucu ve arka ucu önünde ve arkasında koronale beyin kesmek; diğer kullanımlar için gerekli değilse beynin ön ve arka bölümlerini atmak. </li><li> Hemen yanında hipotalamus, bilateral, temporal lob altında küçük küreler olarak amygdalas gözünüzde canlandırın. </li><li> Uzakta deneyci gelen, onun ön ucundaki dorsal yüzeyini beyin düz çevirin. </li><li> Beynin sol veya sağ tarafı ile başlayın. Hemi ayırınDaha sonra küreler ve mücavir amigdala gelen korteks. Amigdala izolasyonunu sağlamak için bu gevşek korteksin yolu yaklaşık 8 mm kesin. Neşter ile amigdala kesip. </li><li> Karşıya çalışan karanlık sütür, neredeyse yarı yarıya boyunca keserek kendi centromedial kısmından amigdala bazolateral kısmını ayırın. Bu yapı her zaman kolayca tanımlanabilir değildir. </li><li> Ayrı tespit şişelerde amigdala alt parçalarının koyun ve ezilmiş buz üzerinde tutmak. </li><li> Diğer yarımkürede ile tekrarlayın diseksiyon prosedürü. </li><li> 1 dakika süre ile sıvı azot içinde şişeleri bırakın. Ihtiyaç duyulana kadar -80 ° C dondurucu içinde flakonu tutun. </li></ol> 3. Kaspaz-3 Aktivite <ol><li> Sukroz 0.32 M,% 1 Triton-X-100, Tris-HCI, pH 8, etilendiamintetraasetik asit 5 mM, ditiyotreitol 2 mM, fenilmetilsülfonil fluorür, 1 mM, leupeptin, 10 ug / ul 10 mM liziz tamponu , pepstatin A 10 mg / ml aprotinin, 10 ug / ml. </li><li>Her numune (5-10 mg), lizis tamponu 150 ul ekle. Buz üzerinde tutun. Maksimal şiddette (40 W) 5 saniye boyunca buz üzerinde her örnek sonikasyon. 30 dakika boyunca buz üzerinde liziz tamponunda doku inkübe edin. Vorteks 5 dakika boyunca her bir numune. </li><li> Alternatif olarak sıvı azot içinde ve 37 ° C&#39;de ayarlanmış bir termostatik olarak kontrol edilen ısıtma plakası üzerinde numuneler yerleştirilerek 3 donma / çözülme devrelerine gerçekleştirin. 13.000 g Santrifüj doku (4 10 dakika boyunca ° C). Dikkatle süpernatant kaldırmak ve buz üzerinde tüp içinde tutmak. </li><li> Büyükbaş hayvan serum albümini ile 0 ve 10 ug / ml arasında, standart protein konsantrasyonları hazırlayın. Sadece tampon maddesi ile boşlukları hazırlayın. </li><li> Her standart Bradford reaktifi 200 ul ekle. 595 nm standart okuyun. Protein seviyeleri için, damıtılmış su içinde 795 | il Bradford reaktifi 200 ul numune süpernatan 5 ul ekleyin. 595 nm&#39;de her bir örnek okuma ve standart eğri ile protein miktarı belirlenir. </li><li> 5 mM MgCl2, 50 mM Tris-HCI, pH 7, &lt;reaksiyon tamponu hazırlayın/ sub&gt;, etilen glikol tetraasetik asit, 1 mM, 3-kolamidopropil% 0.1) dimetilamonyo] -1-propansülfonat ve ditiotreitol, 1 mM. </li><li> Pozitif ve negatif reaktif örnekleri elde etmek reaksiyon tamponu ve kaspaz-3 yüzeylerde proteinin 25 ug ekleyin. Negatif numuneler için, proteinin 25 ug, Ac-DEVD-CHO 800 uM 0.4 ul Ac-DEVD-AMC 10 mM 0,8 ul reaksiyon tamponu ilave edin. Pozitif örnekler için, reaksiyon tamponu proteinin 25 ug ve Ac-DEVD-AMC 10 mM 0,8 ul ekle. Üç nüsha halinde tüm negatif ve pozitif örnekleri işleyin. Reaksiyon tamponu ilave edilerek 200 ul kadar Her numunenin son hacim tamamlanması. </li><li> Ac-DEVD-CHO 800 uM, 0.5 ul, 0.8 ul Ac-DEVD-AMC 10 mM liziz tamponu 10 ul reaksiyon tampon maddesi 188,7 ul ekleyerek negatif kontrolleri üretir. Pozitif kontroller için, reaksiyon tamponu 189.2 ul, Ac-DEVD-AMC 10 mM, 0.8 ul lizis tamponu 10 ul ekle. </li><li> Örnekleri inkübe ve37 O ° C&#39;de 3 saat süreyle karanlıkta kontroller </li><li> Her bir numune ve kontrol 600 ul 0.4 M glisin ve NaOH 0.4 M (pH 10) ile reaksiyonu durdurun. </li><li> 465 nm, 365 nm ve emisyon dalga uyarma dalga boyunda spectrofluorometry ile floresan ölçmek. Bir cam küvet içinde reaksiyona damıtık su 2 ml ilave edilir. Her saniyede 1 puan 10 saniye boyunca kontrolleri ve numuneleri okuyun. </li><li> Her bir örnekte spesifik aktivitesi niceliğini: ((negatif numuneler eksi pozitif örneklerin floresan) 2,8 ml x hacim floresan) (Protein 25 mg inkübasyon 3 saat x miktarı zaman) bölünmesidir. </li></ol>

<ol>
	<li>Denault, J. B., Salvesen, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caspases:+keys+in+the+ignition+of+cell+death.">Caspases: keys in the ignition of cell death.</a> Chemical Reviews. 102, 4489-4500 (2002).</li><li>Boucher, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-ischemic+cardioprotection+by+A2A+adenosine+receptors:+dependent+of+phosphatidylinositol+3-kinase+pathway.">Post-ischemic cardioprotection by A2A adenosine receptors: dependent of phosphatidylinositol 3-kinase pathway.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 43, 416-422 (2004).</li><li>Kaloustian, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celecoxib+after+the+onset+of+reperfusion+reduces+apoptosis+in+the+amygdala.">Celecoxib after the onset of reperfusion reduces apoptosis in the amygdala.</a> Apoptosis. 12, 1945-1951 (2007).</li><li>Kaloustian, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+time+course+in+the+limbic+system+after+myocardial+infarction+in+the+rat.">Apoptosis time course in the limbic system after myocardial infarction in the rat.</a> Brain Research. 1216, 87-91 (2008).</li><li>Rousseau, G., Bah, T. M., Godbout, R., Lakshmanadoss, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+19,+Post-Myocardial+Infarction+Depression.">Chapter 19, Post-Myocardial Infarction Depression.</a> Novel Strategies in Ischemic Heart Disease . , 333-362 (2012).</li><li>Wann, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+detected+in+the+amygdala+following+myocardial+infarction+in+the+rat.">Apoptosis detected in the amygdala following myocardial infarction in the rat.</a> Biological Psychiatry. 59, 430-433 (2006).</li><li>Arseneault-Breard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+Lactobacillus+helveticus+R0052+and+Bifidobacterium+longum+R0175+reduces+post-myocardial+infarction+depression+symptoms+and+restores+intestinal+permeability+in+a+rat+model.">Combination of Lactobacillus helveticus R0052 and Bifidobacterium longum R0175 reduces post-myocardial infarction depression symptoms and restores intestinal permeability in a rat model.</a> British Journal of Nutrition. 107, 1793-1799 (2012).</li><li>Bah, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Escitalopram+reduces+circulating+pro-inflammatory+cytokines+and+improves+depressive+behavior+without+affecting+sleep+in+a+rat+model+of+post-cardiac+infarct+depression.">Escitalopram reduces circulating pro-inflammatory cytokines and improves depressive behavior without affecting sleep in a rat model of post-cardiac infarct depression.</a> Behavioural Brain Research. 225, 243-251 (2011).</li><li>Bah, T. M., Kaloustian, S., Rousseau, G., Godbout, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pretreatment+with+pentoxifylline+has+antidepressant-like+effects+in+a+rat+model+of+acute+myocardial+infarction.">Pretreatment with pentoxifylline has antidepressant-like effects in a rat model of acute myocardial infarction.</a> Behavioural Pharmacology. 22, 779-784 (2011).</li><li>Gilbert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuation+of+post-myocardial+infarction+depression+in+rats+by+n-3+fatty+acids+or+probiotics+starting+after+the+onset+of+reperfusion.">Attenuation of post-myocardial infarction depression in rats by n-3 fatty acids or probiotics starting after the onset of reperfusion.</a> British Journal of Nutrition. 109, 50-56 (2013).</li><li>Gilbert, K., Bernier, J., Godbout, R., Rousseau, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolvin+D1,+a+metabolite+of+omega-3+polyunsaturated+fatty+acid,+decreases+post-myocardial+infarct+depression.">Resolvin D1, a metabolite of omega-3 polyunsaturated fatty acid, decreases post-myocardial infarct depression.</a> Marine Drugs. 12, 5396-5407 (2014).</li><li>Wann, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+signs+of+depression+and+apoptosis+in+the+limbic+system+following+myocardial+infarction:+effects+of+sertraline.">Behavioural signs of depression and apoptosis in the limbic system following myocardial infarction: effects of sertraline.</a> Journal of Psychopharmacology. 23, 451-459 (2009).</li><li>Gorr, T. A., Vogel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Western+blotting+re-visited:+critical+perusal+of+under-appreciated+technical+issues.">Western blotting re-visited: critical perusal of under-appreciated technical issues.</a> Proteomics: Clinical Applications. , (2015).</li><li>McKernan, D. P., Dinan, T. G., Cryan, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term='Killing+the+blues':+a+role+for+cellular+suicide+(apoptosis)+in+depression+and+the+antidepressant+response.">'Killing the blues': a role for cellular suicide (apoptosis) in depression and the antidepressant response.</a> Progress in Neurobiology. 88, 246-263 (2009).</li><li>Green, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptotic+pathways:+paper+wraps+stone+blunts+scissors.">Apoptotic pathways: paper wraps stone blunts scissors.</a> Cell. 102, 1-4 (2000).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Son 10 yılda bu protokol ile Deneyimlerimiz kritik metodolojik konular belirlenmesine yol açmıştır. İlk olarak, kırılmış buz üzerine bir petri çanağına hızlı beyin diseksiyon hazırlanması kalitesini muhafaza etmek önemlidir. İkinci olarak, doku sonication, diğer kalp (10 saniye) ve dokuların türleri veya böbreklerin (20 saniye) ile karşılaştırıldığında, serebral amigdala daha kısa olduğunu fark edilmelidir. Üçüncü olarak, büyük bir özenle dikkatle örnekleri eklemeden önce alt tabakayı karıştırmak için alınmalıdır. Karıştırma dizisi yetersiz Biz ne zaman değişken sinyaller karşılaştık. Örnekleri okurken Dördüncü olarak, kabarcıklar, kuvars hücrede mevcut olması gerekmektedir. Aksi takdirde, bir sinyal değiştirilebilir. 1 ul daha az hacim önlemek için alt tabaka hacminin artırılması: Biz sonuçların tekrarlanabilirliği artırmak için son yıllarda bir değişiklik yaptı. Yine, küçük varyasyonları izleyen tahliller arasında meydana gelebilecek, ve en az 3 kontrol numuneleri için kullanılmalıdırvaryasyonlar için kontrolü. Bu kontrollerin Floresan tedbirleri ortalaması alınır ve ortalama% 100 olarak belirlenmiştir. Deneysel örneklerde Floresan tedbirleri kontrol numunelerinin yüzde dönüşür. Tekniğin bir başka sınırlama, bu nedenle kaspaz-3 aktivitesi göz ardı edilebilir, doku sadece bir kısmı kullanıldığı ve. Nitekim, apoptoz zaman penceresi herhangi bir hücrede kısa ve 1,4,15 örnekleme sırasında komşu bölgelerde oluşuyor olsa bile kaçırmış. Bunun tam tersi de mümkündür: apoptoz kaspaz-3 aktivitesi olduğundan fazla tahmin sonuçlanan doku bölümleri, özellikle yoğun olabilir. Biz böyle TÜNEL deneyleri veya Bax / Bcl2 oranı (bkz) gibi tamamlayıcı teknikler, kalan dokuların (amigdala) kullanmanızı tavsiye ederiz. Spectrofluorometry Western blot üzerinde, en azından iki avantajı vardır. Birincisi, doğrudan nicel veri üretir. İkincisi, bu enzimatik a ölçerctivity kendisi yerine ilgisiz olabilir, ve protein ifadesi enzimatik etkinlikteki herhangi bir değişiklik olmadan arttırılabilir bilinmektedir proteini veya RNA ekspresyon. Ayrıca, spectrofluorometry diğer dokularda veya farklı hayvan türleri ile yapılabilir ve farklı alt-tabakalar ile ve diğer kaspaz alt-tipleri için ayarlanabilir, böylece güvenli bir karşılaştırma yapılabilir. Sonuç olarak, bu belgenin o apoptoz 3 gün MI sonrası limbik sistemin bu bölgede meydana kanıt sağlama, amigdala kaspaz-3 aktivitesini ölçmek için spectrofluorometry kullanımını gösterir.

Kaspazlar ya Sistein bağımlı aspartat yönelik proteazlar çeşitli homeostazı süreçlerini 1 katılan bir enzim ailesidir. Kaspazlar geniş apoptosis veya inflamasyon kendi rollerine göre sınıflandırılabilir. Kaspaz-1, -4, -5 ve -12 apoptosis uğraşanların olabilir oysa inflamasyon katılan alt sınıflandırılmış başlatıcı kaspazlara olarak (kaspaz-8 ve -9) ve cellat kaspazlar (kaspaz-3, -6 -7 ve ). Miyokard enfarktüsü (MI) veya serebral iskeminin ardından gözlemlenen Kaspazlar, esas olarak apoptoz fazla olabilir hastalıklarda çok patolojilerin önemli rol oynar. Bizim laboratuvarda kullanılan post-MI sendromunun sıçan modelinde, bu kaspaz-3 miyokardın 2 değil, aynı zamanda ruh ve duyguların 3-6 kontrolünde karıştığı limbik sistemde sadece etkin olduğunu kurulmuştur. Ayrıca, kaspaz-3, farklı bölgelerde aktif olduğu görülmektedirlimbik sistemin, bu tür amigdala ve hipokampus ve iskemik hakaret 4 sonra 3 gün etrafında bu aktivasyon zirveleri olarak. İlginçtir, kaspaz-3 aktivitesi post-MI davranış bozuklukları ile ilişkilidir ve farmakolojik ve beslenme müdahaleler yoluyla zayıflama kaspaz-3 ve post-MI depresyon 7-12 arasındaki olası bağlantıyı düşündüren, bu yaralanmaları azaltır. Kaspaz-3 aktivasyonu, çeşitli teknikler ile ölçülebilir. Western blotting kaspaz enzimatik özellikleri tespit eder ve aktif enzimler olarak pro-enzim biçimleri algılayabilir. Western lekeleme, ancak yarı-kantitatif ve küçük varyasyonlar, zayıf sinyal-ses oranlarına 13 ile kaybolabilir. Daha iyi bir teknik, bir florojenik bileşiği serbest bırakır ve spectrofluorometry ölçülebilir kaspaz-3, bir alt-tabaka (DEVD-AMC) bölünmesine dayanmaktadır. Kaspaz-3 aktivasyon apoptoz güvenilir bir göstergesidir. Apoptoz ca ölçümün oluşma zaman penceresi kısa olduğu için kararsız ve komşu hücrelerin apoptotik organları veya hücreleri 14 fagosite olabilir. Apoptosis ayrıca, Bax / olarak apoptotik sinyal silsileleri 6, ya da anti-apoptotik / pro protein oranı, elde edilen DNA parçalanmasını algıladığı, örneğin terminal deoksinükleotidil transferaz dUTP çentik uç işaretleme analizi (TÜNEL) deneyi gibi diğer teknikler tarafından teyit edilebilir Bcl2 6.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Spectroflurometer</td>
			<td>Photon technology Instrument (now Horiba)</td>
			<td>Ratiomaster M-40</td>
			<td>with DeltaRAM&#160; Random Access Monochromator&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Respirator</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>683</td>
			<td>small animal ventilation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cuvette</td>
			<td>NSG precision cells</td>
			<td>3G10</td>
			<td>Optical Glass (340-2,500nm) 10 mm path</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonicator</td>
			<td>Cole Parmer</td>
			<td>4710&#160; series</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer</td>
			<td>Varian</td>
			<td>Cary 50 Bio</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

caspase-3 activity in the rat amygdala measured by spectrofluorometry after myocardial infarction

Miyokard infarktüsü (Mİ) fizyolojik ve davranışsal düzeyde dramatik orta ve uzun vadeli sonuçları vardır, ancak ilgili mekanizmalar hala belirsizdir. Laboratuvarımız bozulmuş kardiyak fonksiyonları, limbik sistemde nöronal kayıp, bilişsel açıkları ve depresyon belirtileri gösterir davranışsal post-MI sendromu sıçan modeli geliştirmiştir. Post-MI 3 gün zirve - nöronal düzeyde, kaspaz-3 aktivasyonu gibi amigdala gibi farklı limbik bölgelerde, post-MI apoptozu aracılık eder. Bilişsel ve davranışsal bozukluklar 2-3 haftalar sonrası MI görünür ve bu kaspaz-3 aktivitesi önlemleri ile istatistiksel korelasyon. Burada açıklanan protokol, MI neden amigdala doku toplamak ve spectrofluorometry kullanarak kaspaz-3 aktivitesini ölçmek için kullanılır. MI teşvik etmek için, inen koroner arter 40 dakika tıkanır. Sıçanlar kurban edilir ve amigdala rapi izole: kaspaz-3 aktivasyonu değerlendirilmesi için protokol 3 gün MI sonra başlarbeyin GEC. Numuneler hızlı bir şekilde sıvı azot içinde donduruldu ve gerçek analiz kadar -80 ° C&#39;de tutulur. Kaspaz-3 aktivasyonunu değerlendirmek için tekniklerin spectrofluorometry ile ölçülebilir bir flüorojenik bileşiği serbest kaspaz-3, bir alt-tabaka (DEVD-AMC) bölünmesine dayanmaktadır. Yöntem niceliksel ve tekrarlanabilir ama gerektiren ekipman pahalıdır ve numune ölçülmesi için prosedür, zaman alıcıdır. Bu teknik, kalp ve böbrek gibi diğer dokuların, tatbik edilebilir. DEVD-AMC için diğer kaspaz aktivitesini ölçmek için diğer substratlar ile ikame edilmiş olabilir.

Amigdala 8 sham (kontrol) ve üç gün iskemi / reperfüzyon protokolü indüksiyonundan sonra 8 MI sıçanlarda izole edildi. Kaspaz-3 aktivitesi, aktif kaspaz-3 ile ayrıldı ve spectrofluorometry ile tespit edilebilir bir florokrom ile bu dokuda ölçülmüştür. Pozitif ve negatif ölçümler (adımları 3.11, 3.12 ve 3.16 bakınız) her saniyede 1 puan, 10 saniye boyunca üç nüsha olarak gerçekleştirilen ve ölçüldü. Pozitif ve negatif kontroller arasındaki fark hesaplanır ve bu deney sırasında gerçekleştirilen tüm sahte doku farkların ortalaması% 100 olarak ayarlandı. MI sıçanlardan sonuçları bu referansa göre ölçeklenmiştir ve Şekil 1 nihai sonuçları göstermektedir: bu sham (p &lt;0.05) ile karşılaştırıldığında MI farelerde önemli ölçüde daha yüksek etkin olduğunu gösterir. <img alt="figür 1" src="/files/ftp_upload/53207/53207fig1.jpg" /> Şekil 1. Kaspaz-3MI sıçanların amigdala aktivite,% 100 (grup başına 8 sıçan) olarak ayarlanır, sahte kontrol grubunda ortalama aktivite yüzdesi olarak ifade edilir. * Anlamlı gruplar arası fark (p &lt;0.05) gösterir. Veri, ortalama ± SEM olarak ifade edilmiştir.

Watch this Scientific Journal Video about Caspase-3 Activity in the Rat Amygdala Measured by Spectrofluorometry After Myocardial Infarction at JoVE.com

Caspase-3 Activity in the Rat Amygdala Measured by Spectrofluorometry After Myocardial Infarction

Myocardial infarction (MI) is not only followed by impaired cardiac function but also by apoptosis in the amygdala, a brain region involved in the behavioral consequences of MI. This protocol describes how to induce MI, collect amygdala tissue and measure caspase-3 activity, a marker of apoptosis, therein.

Miyokard İnfarktüsü Sonrası Spectrofluorometry tarafından ölçülen Sıçan amigdala kaspaz-3 Etkinlik

Myocardial infarction (MI) has dramatic mid- and long-term consequences at the physiological and behavioral levels, but the mechanisms involved are still ...

caspase-3-activity-rat-amygdala-measured-spectrofluorometry-after

Research

JoVE Journal

Neuroscience

11.7K Görüntüleme.  Hospital du Sacre-Coeur de Montreal. Myocardial infarction (MI) is not only followed by impaired cardiac function but also by apoptosis in the amygdala, a brain region involved in the behavioral consequences of MI. This protocol describes how to induce MI, collect amygdala tissue and measure caspase-3 activity, a marker of apoptosis, therein.

Video: Caspase-3 Activity in the Rat Amygdala Measured by Spectrofluorometry After Myocardial Infarction

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable clinical state; in the development of animal models of focal ischemia, however, achieving reproducibility of experimentally induced infarct volume is essential. The rat is a widely used animal model for stroke due to its relatively low animal husbandry costs and to the similarity of its cranial circulation to that of humans2,3. In humans, the middle cerebral artery (MCA) is most commonly affected in stroke syndromes and multiple methods of MCA occlusion (MCAO) have been described to mimic this clinical syndrome in animal models. Because recanalization commonly occurs following an acute stroke in the human, reperfusion after a period of occlusion has been included in many of these models. In this video, we demonstrate the transient endovascular suture MCAO model in the spontaneously hypertensive rat (SHR). A filament with a silicon tip coating is placed intraluminally at the MCA origin for 60 minutes, followed by reperfusion. Note that the optimal occlusion period may vary in other rat strains, such as Wistar or Sprague-Dawley. Several behavioral indicators of stroke in the rat are shown. Focal ischemia is confirmed using T2-weighted magnetic resonance images and by staining brain sections with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) 24 hours after MCAO.

Surgical induction of ischemic brain damage in the rat is a widely used model for stroke research. Here we demonstrate the induction of focal cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery. Visualization of the resulting infarct by histological staining and magnetic resonance imaging is also shown.

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Nörobilim

Quantifying the Activity of cis-Regulatory Elements in the Mouse Retina by Explant Electroporation

Transcription factors within cellular gene networks control the spatiotemporal pattern and levels of expression of their target genes by binding to cis-regulatory elements (CREs), short (&tilde;300-600 bp) stretches of genomic DNA which can lie upstream, downstream, or within the introns of the genes they control. CREs (i.e., enhancers/promoters) typically consist of multiple clustered binding sites for both transcriptional activators and repressors1-3. They serve as logical integrators of transcriptional input giving a unitary output in the form of spatiotemporally precise and quantitatively exact promoter activity. Most studies of mammalian cis-regulation to date have relied on mouse transgenesis as a means of assaying the enhancer function of CREs4-5. This technique is time-consuming, costly and, on account of insertion site effects, largely non-quantitative. On the other hand, quantitative assays for mammalian CRE function have been developed in tissue culture systems (e.g., dual luciferase assays), but the in vivo relevance of these results is often uncertain. 
Electroporation offers an excellent alternative to traditional mouse transgenesis in that it permits both spatiotemporal and quantitative assessment of cis-regulatory activity in living mammalian tissue. This technique has been particularly useful in the analysis of cis-regulation in the central nervous system, especially in the cerebral cortex and the retina6-8. While mouse retinal electroporation, both in vivo and ex vivo, has been developed and extensively described by Matsuda and Cepko6-7,9, we have recently developed a simple approach to quantify the activity of photoreceptor-specific CREs in electroporated mouse retinas10. Given that the amount of DNA that is introduced into the retina by electroporation can vary from experiment to experiment, it is necessary to include a co-electroporated 'loading control' in all experiments. In this respect, the technique is very similar to the dual luciferase assay used to quantify promoter activity in cultured cells. 
When assaying photoreceptor cis-regulatory activity, electroporation is usually performed in newborn mice (postnatal day 0, P0) which is the time of peak rod production11-12. Once retinal cell types become post-mitotic, electroporation is much less efficient. Given the high rate of rod birth in newborn mice and the fact that rods constitute more than 70% of the cells in the adult mouse retina, the majority of cells that are electroporated at P0 are rods. For this reason, rod photoreceptors are the easiest retinal cell type to study via electroporation. The technique we describe here is primarily useful for quantifying the activity of photoreceptor CREs.

Quantifying the Activity of cis-Regulatory Elements in the Mouse Retina by Explant Electroporation

This protocol describes a simple and inexpensive way to quantify the activity of cis-regulatory elements (i.e., enhancer/promoters) in living mouse retinas via explant electroporation. DNA preparation, retinal dissection, electroporation, retinal explant culture, and post-fixation analysis and quantification are described.

Aktivitesi miktarının Cis</emEksplant Elektroporasyon Fare Retina> Düzenleme Elemanları

Transcription factors within cellular gene networks control the spatiotemporal pattern and levels of expression of their target genes by binding to ...

Monitoring Cleaved Caspase-3 Activity and Apoptosis of Immortalized Oligodendroglial Cells using Live-cell Imaging and Cleaveable Fluorogenic-dye Substrates Following Potassium-induced Membrane Depolarization

The central nervous system can experience a number of stresses and neurological insults, which can have numerous adverse effects that ultimately lead to a reduction in neuronal population and function. Damaged axons can release excitatory molecules including potassium or glutamate into the extracellular matrix, which in turn, can produce further insult and injury to the supporting glial cells including astrocytes and oligodendrocytes 8, 16. If the insult persists, cells will undergo programmed cell death (apoptosis), which is regulated and activated by a number of well-established signal transduction cascades 14. Apoptosis and tissue necrosis can occur after traumatic brain injury, cerebral ischemia, and seizures. A classical example of apoptotic regulation is the family of cysteine-dependent aspartate-directed proteases, or caspases. Activated proteases including caspases have also been implicated in cell death in response to chronic neurodegenerative diseases including Alzheimer's, Huntington's, and Multiple Sclerosis 4, 14, 3, 11, 7.
In this protocol we describe the use of the NucView 488 caspase-3 substrate to measure the rate of caspase-3 mediated apoptosis in immortalized N19-oligodendrocyte (OLG) cell cultures 15, 5, following exposure to different extracellular stresses such as high concentrations of potassium or glutamate. The conditionally-immortalized N19-OLG cell line (representing the O2A progenitor) was obtained from Dr. Anthony Campagnoni (UCLA Semel Institute for Neuroscience) 15, 5, and has been previously used to study molecular mechanisms of myelin gene expression and signal transduction leading to OLG differentiation (e.g.6, 10). We have found this cell line to be robust with respect to transfection with exogenous myelin basic protein (MBP) constructs fused to either RFP or GFP (red or green fluorescent protein) 13, 12. Here, the N19-OLG cell cultures were treated with either 80 mM potassium chloride or 100 mM sodium glutamate to mimic axonal leakage into the extracellular matrix to induce apoptosis 9. We used a bi-functional caspase-3 substrate containing a DEVD (Asp-Glu-Val-Asp) caspase-3 recognition subunit and a DNA-binding dye 2. The substrate quickly enters the cytoplasm where it is cleaved by intracellular caspase-3. The dye, NucView 488 is released and enters the cell nucleus where it binds DNA and fluoresces green at 488 nm, signaling apoptosis. Use of the NucView 488 caspase-3 substrate allows for live-cell imaging in real-time 1, 10. In this video, we also describe the culturing and transfection of immortalized N19-OLG cells, as well as live-cell imaging techniques.

Monitoring Cleaved Caspase-3 Activity and Apoptosis of Immortalized Oligodendroglial Cells using Live-cell Imaging and Cleaveable Fluorogenic-dye Substrates Following Potassium-induced Membrane Depola

Live-cell imaging of caspase-3 mediated apoptosis in immortalized N19-oligodendrocyte cell cultures using the NucView 488 caspase-3 substrate. This technique is applicable for programmed cell death assays in real-time in a variety of cell types and tissues.

İzleme bölünmüş Kaspaz-3 Aktivite ve Potasyum kaynaklı Membran depolarizasyon Canlı hücre Görüntüleme ve Cleaveable EPA-boya Substratlar ölümsüzleştirdi oligodendroglial Hücre Apoptoz

The central nervous system can experience a number of stresses and neurological insults, which can have numerous adverse effects that ultimately lead to a ...

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar olfactory systems suggesting that the biological approach to chemical sensing has been optimized over evolutionary time1. In the insect olfactory system, odorants are transduced by olfactory receptor neurons (ORN) in the antenna, which convert chemical stimuli into trains of action potentials. Sensory input from the ORNs is then relayed to the antennal lobe (AL; a structure analogous to the vertebrate olfactory bulb). In the AL, neural representations for odors take the form of spatiotemporal firing patterns distributed across ensembles of principal neurons (PNs; also referred to as projection neurons)2,3. The AL output is subsequently processed by Kenyon cells (KCs) in the downstream mushroom body (MB), a structure associated with olfactory memory and learning4,5. Here, we present electrophysiological recording techniques to monitor odor-evoked neural responses in these olfactory circuits.
First, we present a single sensillum recording method to study odor-evoked responses at the level of populations of ORNs6,7. We discuss the use of saline filled sharpened glass pipettes as electrodes to extracellularly monitor ORN responses. Next, we present a method to extracellularly monitor PN responses using a commercial 16-channel electrode3. A similar approach using a custom-made 8-channel twisted wire tetrode is demonstrated for Kenyon cell recordings8. We provide details of our experimental setup and present representative recording traces for each of these techniques.

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust Schistocerca Americana Olfactory Circuits

We demonstrate variations of the extracellular multi-unit recording technique to characterize odor-evoked responses in the first three stages of the invertebrate olfactory pathway. These techniques can easily be adapted to examine ensemble activity in other neural systems as well.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Olfaktör Devreler

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival  of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar ...

Optogenetic Perturbation of Neural Activity with Laser Illumination in Semi-intact Drosophila Larvae in Motion

Drosophila larval locomotion is a splendid model system in developmental and physiological neuroscience, by virtue of the genetic accessibility of the underlying neuronal components in the circuits1-6. Application of optogenetics7,8 in the larval neural circuit allows us to manipulate neuronal activity in spatially and temporally patterned ways9-13. Typically, specimens are broadly illuminated with a mercury lamp or LED, so specificity of the target neurons is controlled by binary gene expression systems such as the Gal4-UAS system14,15. In this work, to improve the spatial resolution to "sub-genetic resolution", we locally illuminated a subset of neurons in the ventral nerve cord using lasers implemented in a conventional confocal microscope. While monitoring the motion of the body wall of the semi-intact larvae, we interactively activated or inhibited neural activity with channelrhodopsin16,17 or halorhodopsin18-20, respectively. By spatially and temporally restricted illumination of the neural tissue, we can manipulate the activity of specific neurons in the circuit at a specific phase of behavior. This method is useful for studying the relationship between the activities of a local neural assembly in the ventral nerve cord and the spatiotemporal pattern of motor output.

Optogenetic Perturbation of Neural Activity with Laser Illumination in Semi-intact Drosophila Larvae in Motion

Here we describe a protocol for optogenetic manipulation of motoneuronal activity while monitoring changes in motor output (muscle contraction) in semi-intact Drosophila larvae using lasers within a conventional confocal microscope. This technique enables researchers to achieve local perturbation of neural activity in a few neuromeres to elucidate the dynamics of motor circuits.

Yarı sağlam Lazer Aydınlatma ile Sinir Faaliyet optogenetic Pertürbasyon<em&gt; Drosophila</emMotion&gt; Larva

Drosophila larval locomotion is a splendid model system in developmental and physiological neuroscience, by virtue of the genetic accessibility of the ...

Analysis of Gene Expression Changes in the Rat Hippocampus After Deep Brain Stimulation of the Anterior Thalamic Nucleus

Deep brain stimulation (DBS) surgery, targeting various regions of the brain such as the basal ganglia, thalamus, and subthalamic regions, is an effective treatment for several movement disorders that have failed to respond to medication. Recent progress in the field of DBS surgery has begun to extend the application of this surgical technique to other conditions as diverse as morbid obesity, depression and obsessive compulsive disorder. Despite these expanding indications, little is known about the underlying physiological mechanisms that facilitate the beneficial effects of DBS surgery. One approach to this question is to perform gene expression analysis in neurons that receive the electrical stimulation. Previous studies have shown that neurogenesis in the rat dentate gyrus is elicited in DBS targeting of the anterior nucleus of the thalamus1. DBS surgery targeting the ATN is used widely for treatment refractory epilepsy. It is thus of much interest for us to explore the transcriptional changes induced by electrically stimulating the ATN. In this manuscript, we describe our methodologies for stereotactically-guided DBS surgery targeting the ATN in adult male Wistar rats. We also discuss the subsequent steps for tissue dissection, RNA isolation, cDNA preparation and quantitative RT-PCR for measuring gene expression changes. This method could be applied and modified for stimulating the basal ganglia and other regions of the brain commonly clinically targeted. The gene expression study described here assumes a candidate target gene approach for discovering molecular players that could be directing the mechanism for DBS.

The mechanism underlying the therapeutic effects of Deep Brain Stimulation (DBS) surgery needs investigation. The methods presented in this manuscript describe an experimental approach to examine the cellular events triggered by DBS by analyzing the gene expression profile of candidate genes that can facilitate neurogenesis post DBS surgery.

Ön Talamusun Çekirdek Derin Beyin Stimülasyon sonra Sıçan Hippocampus Gen İfade Değişim Analizi

Deep brain stimulation (DBS) surgery, targeting various regions of the brain such as the basal ganglia, thalamus, and subthalamic regions, is an effective ...

Immunohistochemical Visualization of Hippocampal Neuron Activity After Spatial Learning in a Mouse Model of Neurodevelopmental Disorders

Induction of phosphorylated extracellular-regulated kinase (pERK) is a reliable molecular readout of learning-dependent neuronal activation. Here, we describe a pERK immunohistochemistry protocol to study the profile of hippocampal neuron activation following exposure to a spatial learning task in a mouse model characterized by cognitive deficits of neurodevelopmental origin. Specifically, we used pERK immunostaining to study neuronal activation following Morris water maze (MWM, a classical hippocampal-dependent learning task) in Engrailed-2 knockout (En2-/-) mice, a model of autism spectrum disorders (ASD). As compared to wild-type (WT) controls, En2-/- mice showed significant spatial learning deficits in the MWM. After MWM, significant differences in the number of pERK-positive neurons were detected in specific hippocampal subfields of En2-/- mice, as compared to WT animals. Thus, our protocol can robustly detect differences in pERK-positive neurons associated to hippocampal-dependent learning impairment in a mouse model of ASD. More generally, our protocol can be applied to investigate the profile of hippocampal neuron activation in both genetic or pharmacological mouse models characterized by cognitive deficits.

We describe an immunohistochemistry protocol to study the profile of hippocampal neuron activation following exposure to a spatial learning task in a mouse model characterized by cognitive deficits of neurodevelopmental origin. This protocol can be applied to both genetic or pharmacological mouse models characterized by cognitive deficits.

Nörogelişimsel Bozukluklar Fare Modeli Mekansal Öğrenme ardından Hipokampal Nöron Faaliyet immünohistokimyasal Görselleştirme

Induction of phosphorylated extracellular-regulated kinase (pERK) is a reliable molecular readout of learning-dependent neuronal activation. Here, we ...

Ocular Kinematics Measured by In Vitro Stimulation of the Cranial Nerves in the Turtle

After animals are euthanized, their tissues begin to die. Turtles offer an advantage because of a longer survival time of their tissues, especially when compared to warm-blooded vertebrates. Because of this, in vitro experiments in turtles can be performed for extended periods of time to investigate the neural signals and control of their target actions. Using an isolated head preparation, we measured the kinematics of eye movements in turtles, and their modulation by electrical signals carried by cranial nerves. After the brain was removed from the skull, leaving the cranial nerves intact, the dissected head was placed in a gimbal to calibrate eye movements. Glass electrodes were attached to cranial nerves (oculomotor, trochlear, and abducens) and stimulated with currents to evoke eye movements. We monitored eye movements with an infrared video tracking system and quantified rotations of the eyes. Current pulses with a range of amplitudes, frequencies, and train durations were used to observe effects on responses. Because the preparation is separated from the brain, the efferent pathway going to muscle targets can be examined in isolation to investigate neural signaling in the absence of centrally processed sensory information.

Ocular Kinematics Measured by In Vitro Stimulation of the Cranial Nerves in the Turtle

This protocol describes how to use an in vitro isolated turtle head preparation to measure the kinematics of their eye movements. After removal of the brain from the cranium, cranial nerves can be stimulated with currents to quantify rotations of the eye and changes in pupil sizes.

Oküler kinematik Vitro uyarılması kaplumbağa kranial sinirler tarafından ölçülen

After animals are euthanized, their tissues begin to die. Turtles offer an advantage because of a longer survival time of their tissues, especially when ...

Investigating Alterations in Caecum Microbiota After Traumatic Brain Injury in Mice

Increasing evidence shows that the microbiota-gut-brain axis plays an important role in the pathogenesis of brain diseases. Several studies also demonstrate that traumatic brain injuries cause changes to the gut microbiota. However, mechanisms underlying the bidirectional regulation of the brain-gut axis remain unknown. Currently, few models exist for studying the changes in gut microbiota after traumatic brain injury. Therefore, the presented study combines protocols for inducing traumatic brain injury using a lateral fluid percussion device and analysis of caecum samples following injury for investigating alterations in the gut microbiome. Alterations of the gut microbiota composition after traumatic brain injury are determined using 16S-rDNA sequencing. This protocol provides an effective method for studying the relationships between enteric microorganisms and traumatic brain injury.

Presented here is a protocol to induce diffuse traumatic brain injury using a lateral fluid percussion device followed by the collection of the caecum content for gut microbiome analysis.

Farelerde Travmatik Beyin Hasarı Sonrası Caecum Mikrobiyotasında Ki Değişikliklerin Araştırılması

Increasing evidence shows that the microbiota-gut-brain axis plays an important role in the pathogenesis of brain diseases. Several studies also ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided here is a protocol for successfully establishing a rat model of acute pontine infarction. Rats weighing about 250 g are used, and a probe with an insulated sheath is injected into the pons using a stereotaxic apparatus. A lesion is produced by the electrical stimulation with a single pulse. The Longa score, Berderson score, and beam balance test are used to assess neurological deficits. Additionally, the adhesive-removal somatosensory test is used to determine sensorimotor function, and the limb placement test is used to evaluate proprioception. MRI scans are then used to assess the infarction in vivo, and TTC staining is used to confirm the infarction in vitro. Here, a successful infarction is identified that is located in the anterolateral basis of the rostral pons. In conclusion, a new method is described to establish an acute pontine infarction rat model.

Presented here is a protocol for establishing acute pontine infarction in a rat model via electrical stimulation with a single pulse.

Elektrikstimülasyon ile Sıçanlarda Akut Pontin Enfarktüsü Kurulması

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Miyokard İnfarktüsü Sonrası Spectrofluorometry tarafından ölçülen Sıçan amigdala kaspaz-3 Etkinlik

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler