Name: repeated blood collection from tail vein of non-anesthetized rats with a vacuum blood collection system
Uploaded: 2017-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System at JoVE.com

Yazarlar hiçbir bildirimleri yapmak için var.

Tüm yordamları kent tıbbi üniversite Konseyi hayvan bakımı Komitesi, Huazhong Üniversitesi bilim ve Teknoloji (Wuhan, Çin Halk Cumhuriyeti) tarafından kabul edildi. El yazması varış göre hazırlanmıştır (hayvan araştırma: In Vivo deneyler raporlama) yönergeleri6.
1. yetiştirme
<ol><li>Sprague-Dawley (SD) fareler kullanın (n = 20, 261-291 g ağırlığında 10 erkek, 8 haftalık, demek 272.85 ±9.07 g =) deneysel hayvan Merkezi Huazhong Üniversitesi bilim ve teknoloji ve bakımı ve kullanımı için rehber göre fareler korumak Laboratuvar hayvanlarının bize Ulusal Sağlık Enstitüsü tarafından (NIH yayın No.85-1996 revize 23,) yayınlandı</li>
	<li>Evin yiyecek ve içme suyu ücretsiz erişim standart koşullar altında. Fareler ahşap-tıraş ile 530 cm2 kafeslerde yatak takımları tutmak. Ev iki fareler her kafes içinde. Tüm kafesleri Oda ortamına (mikro-yalıtım veya havalandırılan caging) açık tut</li>
	<li>Deneysel iletişim kuralında yer alan personel, düzenli olarak fareler ele emin olun.</li>
	<li>Oda sıcaklık 21 ° C ve 23 ° c arasındaki sıcaklıklarda muhafaza Fiyatlar normal tuz diyet vermek (% 0,3 NaCl) çalışma boyunca.</li>
</ol>2. kan toplama yordamı
Not: Vakum kan toplama sistemi çift başlı iğne [22 G (0.7 mm x 25 mm)], plastik tutucu ve vakum tüpleri bu amaç ile kauçuk stoper (şekil 1) (2 mL) bir dizi oluşur.
<ol><li>Fareyi bir plastik yasaklama sahibi yerleştirin ve kuyruk herhangi bir görünür kir veya dışkı kaldırmak için sıcak (20-30 ° C) su ile yıkayın. Asistan kuyruk Genişletilmiş bir pozisyonda tutan iken, % 70 etanol ile kuyruk silin ve gazlı bez ile temizleyin ven yapmak için temiz.</li>
	<li>Bir pozisyonda yanal kuyruk damarlar (5 mm civarında) birini 22 G kelebek iğne ucunu takın yaklaşık 2-3 cm uzakta (Şekil 2) yaklaşık 20 ° açıyla kuyruk ucu. Kan vakum kan toplama tüpe (şekil 3) kelebek iğne kauçuk sonuna ekleyerek vakum toplama tüp içine toplamak. Not: 1.2 mL7maksimal koleksiyonu kan birimdir.</li>
	<li>Kan toplama sonra iğneyi çıkarın ve yavaşça kan akışını durdurmak 15-30 s için gazlı bez ile delik siteye basınç uygulayın. Sonra fare plastik yasaklama sahibinden yayın ve fareyi onun kafes için dönün.</li>
	<li>Kan plazması toplamak için bir antikoagülan olarak EDTA içeren tüpler kullanın. Yavaşça tüp birkaç kez kan antikoagülan karıştırın ve örnekleri buz üzerinde dikey olarak yerleştirmek için tersine çevirin.</li>
	<li>Plazma veya serum ayrı 10 min için 2.000 x g de soğutmalı santrifüj kan örnek koleksiyon tüplerde santrifüj kapasitesi.</li>
	<li>Plazma/serum, kırmızı ve beyaz kan hücresi katmanları bozmamaya dikkat çekici ayıklayın. Kan serumu toplamak için tüpler antikoagülan olmadan kullanın. Her iki tür örnek hemen kullanılan veya bir yıla kadar-80 ° C'de depolanan. Not: Başarılı kan toplama her zaman 1.2 mL kan alma olarak tanımlanmıştır. Maksimal ponksiyon zaman kuruldu toplam kan hacmi üçüncü delik sonra 1.2 mL düşük olsaydı üç denemeler için bu başarısız kan koleksiyonu olarak tanımlanmıştır. Örnekleme süresi kuyruk ven delik kelebek iğne kaldırıldıktan sonra kan toplama başlar.</li>
	<li>
İki hafta7içinde iki kez kan toplamak.
	<ol>
<li>Sınamak ve bu yöntemin fizibilite doğrulamak için bu kan toplama Protokolü gerçekleştirmeden önce iki tıp öğrencileri (yeni başlayanlar) için 2 h tren. 2 deneyimli arkadaşlar (deney grubu) tarafından 10 Rat ve 2 tıp öğrencileri (acemi grubu) tarafından 10 Rat kan ve yirmi fareler kullanın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. istatistiksel analiz
<ol><li>Verileri ortalama değer ± standart sapma olarak ifade ve SPSS istatistik 17 ile analiz. Bir α değeri 0,05 seçildi, bu nedenle p < 0,05 olarak istatistiksel olarak anlamlı kabul.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat.">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+vessels+of+the+rat+tail:+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods.">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li><li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat.">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee. , (2010).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood,+including+routes+and+volumes.">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li><li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+device+for+collecting+cord+blood.">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li><li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry,+haematology+and+practical+usage+assessment.">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li><li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes.">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li><li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter.">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li></ol>

Yazarlar ifşa yoktur

Mevcut rapor Sıçanlarda bir öğrenmek kolay kan toplama yöntemini açıklar. Sonuçlarımız bu yöntem art arda sıçanlarından emir kan büyük miktarda toplamak için uygun olduğunu gösterdi. Ayrıca, bu yöntem kolayca kısa vadeli bir öğrenme eğrisi ile hakim. Bu yordam anestezi Rat gerçekleştirilebilir ve sadece hayvanlar için en az stres neden olur.
Kan üzerinden çeşitli yerlerde sıçanlar toplanabilir. Kuyruk damar kan örnekleme4için üstün bir konumdur. Ancak, her zaman yeterli kan hacmi ince ve düşük kan akışı kuyruk ven Rats'in elde etmek kolay değil. Vakum kan toplama sistemi genellikle günlük klinik pratikte hastalardan kan örnekleri toplamak için kullanılır. Bu vakum kan toplama sistemi hastalar ve araştırma hayvanlar için uzun süre8,9,10kullanılmıştır. Bu sistem bir vakum kan toplama tüp silikon kaplamalı iç tüp duvar ve kelebek iğne ile oluşur. Bu vakum negatif basınç ilkesine dayanıyordu ve kan da kirlenme ve hemoliz11olasılığını azaltır kan toplama, riski olmadan sürekli çiziminin sağlar. Kateter kan örneğinde yaklaşık 0.3 mL birimdir. İğne kuyruğu damar geri çekilmesi toplama Vakum tüplü vakum nedeniyle içine kateter bloke kan akacak. Bu yöntem aynı zamanda daha küçük bir delik iğne kullanımı ile daha az 100 gr ağırlığında fareler gelen kan toplamak için geçerlidir.
Bu kan toplama yöntemi birçok avantajı vardır. Bu yordam yalnızca en az yaralanma için fareler neden olur ve kan toplama anestezi kullanmadan yapılabilir, böylece kan örneği üzerinde stres tepkisi ve anestezi etkisi önlenebilir. Gözlemlerimiz fareler işlem sırasında plastik yasaklama tutucu sessiz edildi ve bu deneyler sırasında ölüm yok olduğunu gösterdi. İkincisi, tekrarlanan kan toplama her bir veya iki gün mümkün, çeşitli araştırma amaçlı sık örnekleme kan ile yeterli bir güç sağlar. Son olarak, bu yöntem öğrenmesi kolay ve kolayca yeni başlayanlar tarafından kısa (2 h) öğrenim süresinden sonra benzer başarı oranları ve ponksiyon kez bu raporda deneysel ve acemi gruplar arasında gösterildiği gibi hakim olmuş oldu. Bir önceki raporda, Lee ve ark. fare4yanal kuyruk damardan kan örnekleme, benzer bir yöntem gösterdi. Bizim yöntem Lee ve ark. tarafından bildirilen daha kolaydır 4 biz doğrudan kuyruk ven ve tüp diğer ucunu ponksiyon iğnesi eklemek o doğrudan bağlı kan, ilave bir şırınga kullanımı ve kan el ile aspirasyon olmadan ve gerek kalmadan toplamak için Vakum tüplü ' süt Ing' damar kan akışını kolaylaştırmak için. Bu kapalı sistem ile kan toplama kan kontaminasyon riskini azaltır. Plastik yasaklama tutucu kullanımı da fare stresi azaltır ve kuyruk fiksasyonu kolaylaştırır.
Aşağıdaki iki adımı bu yöntem başarılı uygulama için önemlidir. 1) kuyruk genişletmek ve kuyruk hareketi önlemek; 2) hafifçe ven ponksiyon yoluyla ven kaçının ve ponksiyon iğne damar içinde tutmak için 20 ° açılı delmek.
Sonuç olarak, kabul edilen vakum kan toplama yöntemi Sıçanlarda güvenli, uygun ve kolay uygulama. Bu yöntem, Sigara anestezi sıçanlarından emir elde bir yeterli kan hacmi ile kan sık örnekleme sağlar.

Kan örnekleme fareler üzerinden çok çeşitli deneysel çalışmalar için gereklidir. Teknikleri için fareyi koleksiyonundan kan delik kalp, retro-orbital pleksus, juguler ven, Safen ven, kuyruk kan damarları, Karotid arter, abdominal aort ve vena kava içerir. (Safen ven ve kuyruk kan damarı ponksiyon) hariç çoğu teknikleri anestezi1,2gerektirir. Damarlar sıçan kuyruk rutin kan örnekleme ve vasküler enjeksiyon için delmiş. Hatta fareler imzalat3kuyruk sıcak su ile tedavi sonra kan damarlarının de dilate ve manipülasyon için uygun vardır.
Kan örnekleri küçük laboratuvar hayvanları2elde etmek için yeni ve gelişmiş teknikleri geliştirme rağmen her zaman ne zaman küçük hayvanlardan örnekleme yeterince kan elde etmek kolay değildir. Sıçan kuyruğu damar kan örnekleme4için üstün bir konumdur. Ancak, kuyruk ven ince, böylece bazen ponksiyon zordur ve onun düşük kan akımı nedeniyle yeterince kan almak için uzun bir zaman alacağını. Kan toplama bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi üzerinden günlük klinik pratikte tipik bir yöntemdir. Bu kapalı sistem toplama kan kan doğrudan maruz kalma riskini azaltır ve birden çok örneği bir tek iz5kolaylaştırdı. Mevcut rapor içinde sigara anestezi rats vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanarak basit kuyruk damar kan örnekleme yöntemi açıklanır. Bu yöntem kolay usta ve kan Sıçanlarda art arda büyük miktarda elde etmek için kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>a double-pointed needle</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>22G&amp;nbsp;</td><td>(0.7&amp;times;25mm)</td></tr><tr><td>vacuum tubes</td><td>Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China</td><td>2 ml</td><td></td></tr><tr><td>rat restraining holder&amp;nbsp;</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>250g rat hoder model</td><td></td></tr><tr><td>normal salt diet for rats</td><td></td><td></td><td>Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study</td></tr><tr><td>SPSS software for statistical analysis</td><td>SPSS Inc,&amp;nbsp; Chicago; USA&amp;nbsp;</td><td>Version 17.0.&amp;nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

repeated blood collection from tail vein of non-anesthetized rats with a vacuum blood collection system

Kan üzerinden örnekleme yerlerden de, fareler toplanabilir. Örneğin, kuyruk damar kan örnekleme için üstün bir konumdur. Ancak, böylece bazen ponksiyon zordur kuyruk ven incedir. Buna ek olarak, kuyruk ven düşük kan akışı ve yeterli kan almak için uzun örnekleme süresi gerekir. Mevcut rapor basit kan örnekleme yöntemi, genellikle burada sigara anestezi sıçanlara kullanılan hastalardan kan örneklerini almak için kullanılan vakum kan toplama yöntemi açıklanır. 22 G kelebek iğne ucu yaklaşık 2-3 cm yaklaşık 20 ° ve kan açılı kuyruk ucu vakum toplama tüp va kelebek iğne kauçuk sonuna ekleyerek toplanan yanal kuyruk damarlar birinin içine eklenmiş cuum kan toplama tüp. Mevcut deneysel sonuç başarı oranı % 95'deney grubu ve başlangıç grubunda % 90'ı olduğunu göstermek. Başarı oranı ve ponksiyon süreleri iki grup arasında benzer idi. Örnekleme süresi önemli ölçüde deneysel grup acemi grubuna göre daha kısa. Sonuç olarak, bu vakum kan toplama için sıralı kan örnekleme non - imzalat sıçan kuyruk damardan diğer güvenilir bir alternatif geleneksel kan örnekleme teknikleri için kullanılan hangi hizmet olabilir mümkün ve kolay öğrenmek, yöntemidir fareler.

Örnekleme süresi, vücut kitle ve iki grup kan toplama hacmi Kan her grupta iki hafta içinde iki kez 10 Rat (5 erkek) toplanmıştır. Her iki grup halinde ortalama vücut kitle benzer (272.00 ±9.66 g ve 273.70 ±8.87 g). Örnekleme süresi önemli ölçüde deneysel grup acemi grubuna kıyasla daha kısa (2.77 ±0.53 min 3.28 ±0.83 dakika, p vs < 0,05) (Tablo 1).
Başarı oranı ve kez iki grubun ponksiyon Başarı oranı % 95'i (19/20) deneysel grubunda ve %90 (18/20) Başlangıç grubunda yapıldı (p > 0.05). Ponksiyon kez iki grup arasında önemli ölçüde farklı değildi (1,50 ±0.61 min vs 1,85 ±0.75 dakika, p > 0.05) (Tablo 2). Bu sonuçları bu yöntemi öğrenmek kolaydır ve teknik eğitim için 2 h sonra hakim gösterir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> Resim 1 : 2 mL vakumlu kan toplama tüp (solda); 22 G kelebek iğne (Merkezi); plastik yasaklama tutucu (sağda). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> Resim 2 : İğne ucu yanal kuyruk damar içine (yaklaşık 5 mm) konumunda eklenmiş yaklaşık 20 ° açıyla kuyruk ucu uzak yaklaşık 2-3 cm. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> Şekil 3 : Başarılı iz. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">Deney grubu</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">Acemi grup</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Cinsiyet</td>
			<td>Vücut ağırlığı (g)</td>
			<td>Toplanan kan hacmi (mL)</td>
			<td>örnekleme süresi (dk)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Cinsiyet</td>
			<td>Vücut ağırlığı (g)</td>
			<td>Toplanan kan hacmi (mL)</td>
			<td>örnekleme süresi (dk)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B1-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B3-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.88</td>
			<td></td>
			<td>B3-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,41</td>
			<td></td>
			<td>B4-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B4-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,61</td>
			<td></td>
			<td>B5-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,33</td>
			<td></td>
			<td>B6-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>274</td>
			<td>0,9</td>
			<td>4,87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B6-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,82</td>
			<td></td>
			<td>B7-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3,93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,05</td>
			<td></td>
			<td>B8-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B9-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1,82</td>
			<td></td>
			<td>B10-1</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,25</td>
			<td></td>
			<td>B10-2</td>
			<td>Erkek</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>Ortalama</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2,77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3,28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Tr-1: ilk kan toplama için deneysel grubundaki fareleri seri numarası.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">En-2: deney grubu ikinci kan koleksiyonu için de, fareler seri numarası.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-1: ilk kan toplama için Başlangıç grubundaki fareleri seri numarası.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-2: ikinci kan toplama için Başlangıç grubundaki fareleri seri numarası.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1: Kan sonuçlarını deney grubu hem de başlangıç grubunda toplanan.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>Kan toplama kez</td>
			<td>Ortalama ponksiyon kez</td>
			<td>Bir zaman delik</td>
			<td>İki kez ponksiyon</td>
			<td>Üç kez ponksiyon</td>
			<td>Başarısız oldu</td>
			<td>Başarı oranı</td>
		</tr>
<tr>
<td>Deney grubu</td>
			<td>20</td>
			<td>1,50 ±0.61</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>% 95</td>
		</tr>
<tr>
<td>Acemi grup</td>
			<td>20</td>
			<td>1,85 ±0.75</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>% 90</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Bir zaman ponksiyon: başarılı kan toplandıktan sonra ilk ponksiyon farelerle sayısı</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">İki kez ponksiyon: başarılı kan toplandıktan sonra ikinci delik farelerle sayısı</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Üç kez ponksiyon: başarılı kan toplandıktan sonra üçüncü delik farelerle sayısı</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">Başarısız oldu: başarısız kan toplandıktan sonra üçüncü delik farelerle olan</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 2: Karşılaştırma ponksiyon kez ve deney grubu ve acemi grup başarı oranları.

Watch this Scientific Journal Video about Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System at JoVE.com

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Burada, bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanarak olmayan anestezi Sıçanlarda basit kuyruk damar kan örnekleme yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntem kan doğrudan maruz kalma riskini azaltır ve tek bir iz birden çok örnekleri alarak basitleştirir.

Kuyruk damar anestezi sıçan bir vakum kan toplama sistemi ile kan koleksiyonundan tekrarlanan

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

repeated-blood-collection-from-tail-vein-non-anesthetized-rats-with

Research

JoVE Journal

Medicine

35.6K Görüntüleme.  Jianghan University. Burada, bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanarak olmayan anestezi Sıçanlarda basit kuyruk damar kan örnekleme yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntem kan doğrudan maruz kalma riskini azaltır ve tek bir iz birden çok örnekleri alarak basitleştirir.

Video: Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Collection Protocol for Human Pancreas

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation of pancreas recovered from cadaveric organ donors. The pancreas is divided into 3 main regions (head, body, tail) followed by serial transverse sections throughout the medial to lateral axis. Alternating sections are used for fixed paraffin and fresh frozen blocks and remnant samples are minced for snap frozen sample preparations, either with or without RNAse inhibitors, for DNA, RNA, or protein isolation. The overall goal of the pancreas dissection procedure is to sample the entire pancreas while maintaining anatomical orientation.
Endocrine cell heterogeneity in terms of islet composition, size, and numbers is reported for human islets compared to rodent islets 1. The majority of human islets from the pancreas head, body and tail regions are composed of insulin-containing &beta;-cells followed by lower proportions of glucagon-containing &alpha;-cells and somatostatin-containing &delta;-cells. Pancreatic polypeptide-containing PP cells and ghrelin-containing epsilon cells are also present but in small numbers. In contrast, the uncinate region contains islets that are primarily composed of pancreatic polypeptide-containing PP cells 2. These regional islet variations arise from developmental differences. The pancreas develops from the ventral and dorsal pancreatic buds in the foregut and after rotation of the stomach and duodenum, the ventral lobe moves and fuses with the dorsal 3. The ventral lobe forms the posterior portion of the head including the uncinate process while the dorsal lobe gives rise to the rest of the organ. Regional pancreatic variation is also reported with the tail region having higher islet density compared to other regions and the dorsal lobe-derived components undergoing selective atrophy in type 1 diabetes4,5.
Additional organs and tissues are often recovered from the organ donors and include pancreatic lymph nodes, spleen and non-pancreatic lymph nodes. These samples are recovered with similar formats as for the pancreas with the addition of isolation of cryopreserved cells. When the proximal duodenum is included with the pancreas, duodenal mucosa may be collected for paraffin and frozen blocks and minced snap frozen preparations.

This video demonstrates a dissection procedure for processing human pancreas into multiple storage formats. Anatomical orientation is maintained throughout the pancreatic regions to allow definition of regional islet composition and density.

İnsan Pankreas için Toplama Protokolü

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Tıp

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. The tail veins of mice are small, and it is sometimes difficult to obtain the required blood volume by conventional puncture methods. This study investigates the superiority of repeated blood sample collection from tail veins of mice through use of a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier (experimental group) compared to conventional blood sampling methods (conventional group), performed by beginners and experts, respectively. With the help of an eyeglass magnifier, a butterfly needle tip is inserted into the tail vein of each mouse in the experimental group. When the vein is penetrated successfully, a blood sample is collected in the vacuum collection tube by insertion of the rubber end of a butterfly needle into the vacuum blood collection tube. The plunger is then used to collect blood without the help of the eyeglass magnifier in the conventional group. Success rates of blood sample collection by the beginners and experts were shown to be 70% vs. 100% (p &#60; 0.01) in the experimental group and 35% vs. 85% (p &#60; 0.01) in the conventional group. For both beginners and experts, puncture times required for obtaining required blood sample were significantly lower in the experimental group compared to the conventional group (2.40 &#177; 0.75 vs. 2.90 &#177; 0.31, p &#60; 0.05; 1.15 &#177; 0.37 vs. 1.55 &#177; 0.76, p &#60; 0.05). In conclusion, the presented blood sampling technique is feasible and easy to practice and enables frequent sampling of adequate blood volumes from non-anesthetized mice.&#160;

This study reports blood sampling from tail vein in mice using a vacuum extraction tube system with eyeglass magnifier. Our method is easy to practice and could be used for repeat blood sampling in mice.

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

Davranış

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful compared to other more aggressive methods such as retro-orbital plexus sample collection. However, this blood collection method is sometimes limited by an unsatisfactory success rate. Here, we introduce a method for blood collection through the subclavian vein puncture. The subclavian vein is located just under the clavicle and this vein is large enough to fulfill the volume requirements of blood collection. Our results show that this method is safe and applicable for blood collection sampling with the required blood volume. Blood collection through the subclavian vein puncture could serve as an alternative blood collection method in case of failed tail vein blood sampling in rats.

Here, we present a protocol to collect blood samples from the rat subclavian vein.

Subklaviyan ven ponksiyon kan örnek fareleri koleksiyonunda alternatif bir yöntem olarak

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, proteins, and glucose, yet the composition of the blood is dynamically regulated and easily perturbed. One factor that can change the blood composition is the stress response triggered by the sampling procedure, which can contribute to variability in the measures of interest. Here we describe a procedure for blood sampling from the lateral tail vein in the rat. This procedure offers significant advantages over other more commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, without anesthesia or analgesia. Additionally, it can be used to obtain large volume samples (upwards of 1 ml in some rats), and it may be used repeatedly across experimental days. By minimizing the stress response and pain resulting from blood sampling, measures can more accurately reflect the true basal state of the animal, with minimal influence from the sampling procedure itself.

Blood samples are useful for assessing biomarkers of physiological states or disease in vivo. Here we describe the methodology to sample blood from the lateral tail vein in the rat. This method provides rapid samples with minimal pain and invasiveness.

Rat Yanal Kuyruk Ven gelen Kan Örnekleme

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

Biyoloji

Eş Zamanlı EEG Kaydı ile Sıçanlardan Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Çekilmesi

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

Yazar Spotlight: Epilepsi Biyobelirteç Keşfi için Yüksek Kaliteli BOS ve Kan Örnekleri Alma 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

Nörobilim

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to detect drug exposure. The rat blood sampling method determines the quality of the plasma and further affects the precision of the test results. The subclavian vein blood collection method described in this protocol collects blood samples repeatedly in the conscious state of animals to meet the needs of PK and TK tests. The skills of restraint handling and appropriate procedure of needle incision ensure the success rate of blood collection. It is easy to operate while ensuring the quality of plasma and at the same time catering to animal welfare. However, this method requires skilled operation, and an improper one may cause animal weakness, pain, lameness, and even mortality. The current method has been used in the testing facility for a 4-week oral toxicity study in Sprague Dawley (SD) rats with TK. The maximum amount of blood collected within 24 h did not exceed 20% of the animal's total blood. The animals' body weight was more than 200 g for males and females. The data showed that the animals' bodyweight increased steadily every week, and the clinical observation was normal after repetitive sample collection.

The present protocol describes a simple and efficient method for collecting blood from the subclavian vein in rats. It enables rapid, timely, and easily identifiable sampling without anesthesia and obtains high-quality blood through repetitive sample collection.

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Sıçanlarda Kan Alma Tekniklerinin Karşılaştırmalı Çalışması

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood collection in rats: the lateral tail vein puncture and the dorsal penile vein puncture, which offer significant advantages over other previously described techniques. This study shows that these two procedures allow for fast sampling (under 10 min) and yield sufficient blood volumes for most assays (202 &#956;L &#177; 67.7 &#956;L). The dorsal penile vein puncture must be done under anesthesia, whereas the lateral tail vein puncture can be done on a conscious, restrained animal.
Alternating these two techniques, therefore, enables blood draw in any situation. While it is always recommended for an operator to be assisted during a procedure to ensure animal welfare, these techniques require only a single operator, unlike most blood sampling methods that require two. Moreover, whereas these previously described methods (e.g., jugular stick, subclavian vein blood draw) require extensive prior training to avoid harm to or death of the animal, tail vein and dorsal penile vein puncture are rarely fatal. For all these reasons, and according to the context (e.g., for studies including male rats, during the perioperative or immediate postoperative period, for animals with thin tail veins), both techniques can be used alternately to enable repeated blood draws.

Yazar Spotlight: Sıçanlarda Bağlama Bağlı Kan Alma Yöntemleri 

Here, we present a protocol to offer rapid, easy, and reliable blood collection alternatives for the rat model. We describe three different blood sampling methods according to the context: tail vein puncture under anesthesia or on a conscious animal, and dorsal penile vein puncture under anesthesia.

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...

Kuyruk damar anestezi sıçan bir vakum kan toplama sistemi ile kan koleksiyonundan tekrarlanan

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

İnsan Pankreas için Toplama Protokolü

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Subklaviyan ven ponksiyon kan örnek fareleri koleksiyonunda alternatif bir yöntem olarak

Rat Yanal Kuyruk Ven gelen Kan Örnekleme

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi