Bu yöntem mukoza aşısı alanında anahtar soruların cevaplanmasına yardımcı olabilir, bağırsak mukozası alımı biyolojik bileşikler ve nasıl bu tür biyolojik entübasyon sonrası yerel sitede bağışıklık sistemini modüle gibi. Bu tekniğin en büyük avantajı, kurulumu basit, hızlı ve düşük mortalite oranları göstermesidir. Bu yöntem mukozal vasinoloji ye ışık verebilir.
Ayrıca kimyasallar, toksikler veya patojenler gibi diğer bileşikler, uygulanabilir. Bu yöntemin görsel gösteri oral entübasyon ve bağırsak diseksiyonu adımlarında olduğu gibi önemlidir, entübasyonda zebra balığı zarar verebilir ve ölüme neden olabilir, çünkü dikkatli olmak gerekir. Diseksiyonda, bağırsağın ucu çok ince ve kırılgandır.
31 kalibrelik Luer-lock iğnesi üzerine yaklaşık bir santimetre lik ince silikon boru yerleştirin. Steril 10 mikrolitrelik filtre pipet ucunu kesin, ince ucunu alın ve kılıf olarak silikon tüpün üzerine yerleştirin. Başlamak için, iğne cihazını 100 mikrolitrelik Luer-lock şırıngayına takın.
İlk olarak, deneyden bir gece önce balığı deney tanklarına taşıyın. Girdap hazırlanan nanopartikül çözeltisi iyi ve süspansiyon istenilen hacmi çizmek. Güvenli bir şekilde balık anestezi sonra, hızlı bir ıslak plastik tepsiye balık aktarmak için bir ağ kullanın.
Hayvanı iğneyle yüzleşmek için yatay olarak yönlendirin. Dikkatle bir el ile balık destek ve korunan iğne ile ağız açın. Daha sonra, yavaşça ağız açıklığından yaklaşık bir santimetre yemek borusu aşağı iğne takın.
İğnenin ne kadar ileri gitmesi gerektiğini görmek zor ve bu bir uygulama meselesi. İğneyi durdurduğu nda hissedeceksiniz ve sonra iğneyi manipüle ederek cihazı biraz daha yerleştirmek için doğru açıyı bulacaksınız. Nanopartikül süspansiyonu yavaşça balıklara enjekte edin, süspansiyonun solungaçlardan veya ağızdan dışa doğru akmasını sağlar.
Bundan sonra, yavaşça iğne çıkarın ve bir kurtarma tankı içine balık yerleştirin. Balık iyileşirken, herhangi bir anormallik için balık izlemek. Balık iyileştikten sonra, onu deneysel tanklardan birine geri ver.
Metin protokolüne göre balık ötenazi sonra, filtre kağıt bir parça üzerine balık yerleştirin. Keskin diseksiyon makası kullanarak, anüsoperkül için yarı dairesel bir kesi yapmak ve ince cımbız ile kesi açın. Sonra, bağırsağın iki ucunu da kesin, tüm iç organları çıkar ve filtre kağıdına yerleştirin.
Sonra, iç organlardan bağırsak ayırmak ve tüm bağırsak elde etmek için özen, dışarı germek. Son olarak, yapışkan doku ayırmak için filtre kağıt üzerinde bağırsak rulo cımbız kullanın. Bu protokolü kullanarak, karışık cinsiyetzebra balık başarıyla farklı rekombinant protein nano tanecikleri ile entübe edildi.
Ev yapımı oral entübasyon cihazı kullanılarak, düşük ortalama mortalite yüzdesi elde edildi. Rekombinant TNF alfa ile yapılan floresan nano tanecikleri dahil organlarının teslimini değerlendirmek için sitometri analizi yapıldı. Nanopartikül entübasyonlu grupta toplam floresan hücre miktarı entübasyondan beş ve 24 saat sonra kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha yüksekti.
Entübasyon ekipmanları ucuz, hassas ve yeniden kullanılabilir. Tüm entübasyon prosedürü çok hızlı bir operatör tarafından yapılabilir ve, daha da önemlisi, yöntem farklı operatörler arasında tutarlıdır. Entübasyon yöntemimizin downstream analizi ile birleşimi oral aşı gelişimi için ideal olabilir.
