Bu yöntem toprak kaynaklı bitki patojenlerinin biyolojik kontrolü ile ilgili anahtar soruların cevaplarına yardımcı olabilir. Kompost gibi malzemeleri test etmek için altın standart bitkiler için toksik olup olmadığını test etmek için bir bitki bioassay sahip olmaktır. Ancak, bu üç hafta sürer.
Bu yöntem yaklaşık iki ila üç gün içinde yapılabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı basit, uygun fiyatlı ve etkili olmasıdır. Bu titrer Rhizoctonia solani büyümesini bastırmak için özel kompost hızlı bir tarama.
Ancak, bu töz de fusariums, Pythiums ve Fitophthoras gibi diğer toprak kaynaklı bitki patojenler karşı kullanılabilir. Bu yöntemin görsel gösterimi çok önemlidir, çünkü kontaminasyonu önlerken bir mantarın saf kültürünü izole etmeye ve korumaya özen göstermektedir. Tecrit prosedürünü gösteren Taylor Readyhough, laboratuvarımdan yüksek lisans öğrencisi olacak.
Emma Wright, benim laboratuvarımdan bir lisans öğrencisi, yarışma testini gösterecektir. Başlamak için, r.solani neden hastalık öyküsü olduğu bilinen toprağa kırmızı turp tohumları ekmek. Üç ila dört hafta sonra, topraktan fide kaldırmak ve musluk suyu ile durulayın.
Bir jilet kullanarak, hipokotil ve kök kahverengi bir renge sahip bir santimetre segmentleri kesti. Daha sonra, bir dakika boyunca% 10 çamaşır suyu çözeltisi içine segmentleri daldırma için alev sterilize forseps kullanın. Bundan sonra, steril suda segmentleri durulayın.
Daha sonra, bir kağıt havlu segmentleri aktarmak için alev sterilize forceps kullanın. Pat parçaları kuru, ve su agar ile bir Petri kabına aktarın. Petri kabını kapaklı bir kabın içine yerleştirin ve segmentleri oda sıcaklığında kuluçkaya yatırın.
Bir kız kültürü kurmak için, patates dekstroz agar taze bir tabak merkezine segmentlerinden birini aktarın. Bundan sonra, otoklav 25 mililitrelik test tüpleri içeren 10 mililitre su. Her test numunesinin iki 0,5 gramlık örneğini 10 mililitre steril su içeren bir çift otoklaved test tüpüne ekleyin ve test tüplerini bir gecede sallayın.
24 saat sonra, konik şişeler bir çift düz agar ve distile su 90 mililitre 1,5 gram ekleyin. Şişeleri otoklavladıktan sonra, 30 dakika boyunca 45 derecelik bir su banyosuna yerleştirin. Daha sonra, erimiş agar içine otoklav referans örneği ve canlı örnek dökün.
Beş Petri yemekleri içine her şişe karışımları dökün. Yerli mikropları korumak için, agar çok sıcak iken kompost eklemek için değil önemlidir. Bu nedenle, kompost eklemeden önce 45 santigrat derece ye kadar agar soğumasını bekleyin.
Aseptik tekniği kullanarak, R.solani parçalarını her bir numune plakasına aktarın. Daha sonra, 1-2 gün oda sıcaklığında plakalar kuluçka. Son olarak, en yakın milimetreye kadar her plaka daki misel yarıçapını ölçmek için net, düz bir cetvel ve stereo mikroskop kullanın.
Bu protokolde, yaşayan kompostlardan elde edilen özler R.solani büyümesini otoklavlı örneklerden önemli ölçüde daha fazla bastırarak, etkisinin besin bazlı değil mikrobiyal olduğunu göstermiştir. Baskılayıcılık otoklavkontrolüne göre büyümede bir azalma olarak ölçülür. Büyüme kompost olgunlaşma veya kür süresi etkilenmedi.
Büyüme önemli ölçüde kompost yöntemi ve tarifi malzemeler, özellikle vermikompost, windrow süreçleri ve parke kabuğu ile yemek tarifleri ile etkilenmiştir. Gelişiminden sonra, bu teknik hastalık bastırıcı özellikleri için kompost ticari sertifikasyon için bir aday olabilir.
