이 방법은 토양 식물 병원체의 생물학적 통제와 관련된 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 퇴비와 같은 시험 재료의 금 본위제는 식물에 독성이 있는지 여부를 테스트하기 위해 식물 바이오애세이가 있는 것입니다. 그러나, 그 3 주가 걸립니다.
이 방법은 약 2 ~3 일 이내에 수행 할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 간단하고 저렴하며 효과적이라는 것입니다. 이 분석은 리조토니아 솔라니의 성장을 억제하기 위해 특정 퇴비의 신속한 검사입니다.
그러나, 이 분석은 또한 푸사리움, 피티움 및 피토프토라스와 같은 그밖 토양 식물 병원체에 대하여 이용될 수 있습니다. 이 방법의 시각적 데모는 오염을 피하면서 곰팡이의 순수한 문화를 분리하고 유지하는 데 주의를 기울이기 때문에 중요합니다. 격리 절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 대학원생 인 테일러 레디호프가 될 것입니다.
내 실험실에서 학부 생 엠마 라이트, 경쟁 분석시연할 것입니다. 먼저, R.solani에 의한 질병의 역사를 가진 것으로 알려진 토양에 붉은 무 씨앗을 뿌리는 것입니다. 3~4주 후에는 묘목을 토양에서 제거하고 수돗물로 헹구십시오.
면도날을 사용하여 갈색이 있는 고체코틸과 뿌리의 1센티미터 세그먼트를 잘라냅니다. 그런 다음 화염 멸균 된 집게를 사용하여 세그먼트를 10 % 표백액용액으로 1 분 동안 담급하십시오. 그 후, 멸균 물에 세그먼트를 헹구는 다.
다음으로, 화염 멸균 된 집게를 사용하여 세그먼트를 종이 타월로 옮김하십시오. 세그먼트를 말리고 물 한천으로 페트리 접시에 옮기십시오. 페트리 접시를 뚜껑이 달린 용기 안에 놓고 실온에서 세그먼트를 배양합니다.
딸 문화를 확립하기 위해, 감자 덱스트로스 천의 신선한 접시의 중심으로 세그먼트 중 하나를 전송합니다. 그 후, 10 밀리리터의 물을 포함하는 25 밀리리터 테스트 튜브를 오토클레이브합니다. 각 테스트 샘플의 0.5그램 샘플 2개를 멸균수 10밀리리터가 있는 오토클레이브 테스트 튜브에 추가하고 밤새 테스트 튜브를 흔들어 줍니다.
24시간 후, 일반 한천 1.5그램과 증류수 90밀리리터를 원추형 플라스크한 켤레에 넣습니다. 플라스크를 오토클레이브한 후 30분 동안 섭씨 45도의 수조에 넣습니다. 다음으로, 용융 된 한고에 오토 클레이브 참조 샘플과 살아있는 샘플을 붓습니다.
각 플라스크의 혼합물을 5개의 페트리 요리에 붓습니다. 토착 미생물을 보호하기 위해, 한천이 너무 뜨거울 때 퇴비를 추가하지 않는 것이 중요합니다. 따라서 퇴비를 추가하기 전에 한천이 섭씨 45도까지 식힙니다.
무균 기술을 사용하여 R.solani 조각을 각 샘플 플레이트로 옮길 수 있습니다. 그런 다음 실온에서 1 ~2 일 동안 플레이트를 배양합니다. 마지막으로, 명확하고 평평한 눈금자와 스테레오 현미경을 사용하여 각 플레이트의 균사체 반경을 가장 가까운 밀리미터로 측정합니다.
이 프로토콜에서, 살아있는 퇴비에서 추출은 효과가 미생물이고 영양 기반이 아니라는 것을 보여주는, 자동 분해 견본 보다는 훨씬 더 많은 R.solani 성장을 억압했습니다. 억제는 오토클레이브 제어에 비해 성장의 감소로 측정된다. 성장은 퇴비의 성숙 또는 경화기간에 의해 영향을받지 않았다.
성장은 특히 vermicompost, 바람 과정 및 나무 껍질 조리법, 퇴비 방법과 조리법 재료에 의해 크게 영향을 받았다. 개발 후,이 기술은 질병 억제 특성에 대한 퇴비의 상업적 인증 후보가 될 수 있습니다.
