Kardiyak ve solunum fonksiyon bozukluğu nöbet sonrası ani ölüme katkıda bulunur. Bu nedenle, bu fenomeni incelemek için, bir tavşan modeline çok sistemli bir yaklaşım uygulandı. Bu teknik, nöbetleri, aritmileri ve ölümden öncekileri çevreleyen birden fazla tavşanın nörolojik, kardiyak ve solunum fonksiyonlarının eşzamanlı izlenmesini ve daha sonra analizini sağlar.
Bir hastalık öncelikle nöronal veya kardiyak olsa da, nöbetler ve aritmiler gibi hem beyinde hem de kalpte elektriksel bozuklukların yanı sıra solunum fonksiyon bozukluğu içerebilir. Arka bacak güçleri nedeniyle tavşanlarla çalışmak zor olabilir. Tavşanları hareket ettirirken ve monitörleri ta bağlarken sakin tutmaya özen edin.
Bilgisayarı 64 pinli bir kafa kutusuyla bir amplifikatöre bağlayarak başlayın. Kafa kutusundaki her sekizinci iğneyi referans yapmak için referans elektrot'u bağımsız olarak ayarlayın. EKG elektrotlarının implantasyonu için, sırtüstü pozisyonda bir tavşanı baş araştırmacının dizlerine ve vücudunun geri kalanından daha düşük olacak şekilde sabitleyin.
Alttaki deriyi ortaya çıkarmak için kürkü yayan ikinci bir araştırmacı ile, her aksiillaya 35 derecelik açılı bükülmüş elektrotlar yerleştirin. Göğüse, arkadakileri sağa ve sola ön ayaklara yerleştirin. Ve karında, sol arka uzvun ön kısmında.
Daha sonra karın üzerindeki sağ arka uzuvlara bir zemin pimi elektrot ön ön yerleştirin. Tüm EKG uçları düzgün bir şekilde yerleştirildiğinde, tavşanı hayvanın altındaki arka uzuvlarla uygun büyüklükte bir kısıtlayıcıya sabitleyin. 45 derecelik açı yaklaşımını kullanarak, kafa derisine subdermal düz pimli elektrotlar yerleştirin.
Başın sağ ön, sol ön, sağ oksipital ve sol oksipital bölgelerine bir EEG kurşun yerleştirin. Ve diğer dört müşteri adayı arasındaki merkezi noktaya merkezi bir referans ipucu yerleştirin. Kabloları kulakların arasına sürün ve gevşek bir şekilde kafanın arkasındaki kısıtlayıcıya bağlayın.
Deney sırasında solunumu izlemek için, marjinal kulak damarı üzerinde bir kulağa nabız oksimetresi takın ve hayvanın ağzı ve burnu üzerinde kapnografi tüpü olan bir yüz maskesini hafifçe sabitleyin. Daha sonra borunun diğer ucunu hayati işaretler monitörüne takın. Video EEG-ECG kaydetmek için, uygun bir ticari EEG yazılım programı açın ve videoyu tüm tavşanların görüş alanında gözlemlenebileceği şekilde ayarlayın.
Hayvan için en az 10 ila 20 dakika boyunca veya kalp atış hızı en az beş dakika boyunca dakikada 200 ila 250 atıma sabitleninceye kadar bir temel kayıt gerçekleştirin. Düşük frekans filtresini bir hertz'e ve yüksek frekans filtresini 59 hertz'e ayarlayın. Müdahalelerin, nöro-kardiyak olayların ve motor veya araştırmacı eserlerinin zamanlamasını belirtmek için gerçek zamanlı olarak zaman kilitli notlar ekleyin.
Fotik stimülasyon için, flaş yoğunluğu maksimuma ayarlanmış tavşanın önüne 30 santimetre dairesel reflektörlü bir ışık kaynağı yerleştirin. Ve başın her iki tarafına iki ayna ve tavşanın arkasına bir ayna yerleştirin, böylece ışık tavşanın gözlerine girer. Işığı ayarlanabilir bir hıza, yoğunluğa ve süreye sahip bir denetleyiciye takın.
Photic stimülatör bir hertz'e ayarlanmış ve flaş açıkken, yanıtı 30 saniye boyunca kaydedin. Gözleri simüle etmek veya neden olmak için tavşanın gözlerini bir maske ile kapatın ve 30 saniye daha uyarın. Gözleri her frekansta açık ve gözleri kapalı tepkiyi kaydettikten sonra, fotik stimülatörü 30 saniye kapatın ve denetleyiciyi bir sonraki frekans ayarına ayarlayın.
İki hertz aralıkta her frekansta bir ila 25 hertz arasında 60 saniye kayıt yaptıktan sonra, frekansı beş hertz artışta 60'tan 25 hertz'e düşür ve gözler açıkken 30 saniye ve gözler kapalıyken 30 saniye kayıt edin. Deneyin sonunda, EEG ve EKG uçlarını tavşandan çıkarın ve hayvanları hayvancılık personeli tarafından rutin bakım için ev kafeslerine geri verin. İlacı uygulamadan önce, gösterildiği gibi tedavi edilmemiş tavşandan 10 ila 20 dakikalık temel EEG-EKG videosu toplayın.
İlgi çekici bir ilacın oral uygulaması için, üç mililitre gıda sınıfı elma püresinde ilgi ilacının kilogramı başına 0,3 miligram karıştırın ve karışımı üç mililitrelik oral şırınna yükleyin. Tavşanın üst dudağını hafifçe kaldırın, şırıngın ucunu tavşanın dişleri tarafından engellenmemiş ağzın kenarına kaydırın ve ilaç takviyeli elma püresinin tüm hacmini tavşanın ağzına enjekte edin. Ardından, tavşanı rutin bakım için ev kafesine geri göndermeden önce iki saatlik EEG-ECG video verilerini toplayın.
EEG-EKG yanıtını intravenöz ilaç tedavisine kaydetmeden önce, tavşan kulağının arka yüzeyini tıraş edin ve bölgeyi dezenfekte etmek ve marjinal kulak damarını genişletmek için% 70 etanol kullanın. Dikkatlice, marjinal kulak damarını 25-gauge anjiyokateter ile yalıtın ve kateterin ucuna bir enjeksiyon fişi yerleştirin. Kateteri yerine sabitlemek ve kulağı dik tutmak için üç yuvarlanmış gazlı bez parçasından oluşturulan bir splinti kulağa bantlayın.
Kateter patentini korumak için mililitre heparinize salin başına 10 USP biriminden bir mililitre enjekte edin. Temel kayıt bittiğinde, her 10 dakikada bir katetere ilgi ilacının kilogramı başına bir ila 10 miligram ile desteklenmiş salin enjekte edin. Her dozdan sonra, video EEG-EKG, oksimetre kapnografi, herhangi bir nöro, kardiyak, elektriksel ve solunum anormallikleri veya epileptiform aktivitenin görsel kanıtları için dikkatlice izleyin.
Bu değişiklikleri gerçek zamanlı olarak ve analiz sonrası olarak not edin. EKG videosunu analiz etmek için, EKG verileri içindeki taşikardi, brakikardi, ektopik atımlar veya diğer aritmi dönemlerini tanımlamak için ticari olarak kullanılabilen uygun bir yazılım kullanın. Gözden geçirilecek veri miktarını azaltmak için, taşikardi, bradikardi veya RR aralığının düzensizliklerinin tanımlanabileceği sürelerin kolaylığını artırmak için bir takogram oluşturun.
Bir ilaç uygulama deneyinden sonra video EEG analizi için, her ilaç dozunun ardından en az bir dakika boyunca epileptik ile epileptik olmayan hareketleri ayırt etmek için EEG izlemede görsel olarak ilerleyin. Bir fotik stimülasyon deneyinden sonra video EEG analizi için, uygun bir EEG analiz yazılımı programında spektral analiz grafiği oluşturun. Daha sonra oksipital sürüş ritminin varlığı ve yokluğu için EEG'nin oksipital uçlarını analiz edin.
Oksipital sürüş ritmi spektral analizde fotik stimülatörün frekansine karşılık gelen bir zirve yaratacaktır. EKG morfolojisinin değerlendirilmesi anormal kalp atış hızlarının, iletimin ve EKG dalga formlarının tespitini sağlar. İzlemeler kalp atış hızı, RR aralığı, PR aralığı, P süresi, QRS aralığı, QT aralığı, QTc, JT aralığı ve T-tepe -T-uç aralığını ölçmek için de kullanılabilir.
Oksipital EEG uçlarından elde edilen kayıtlar genellikle öndeki kurşun verileri için gözlenenden daha yüksek bir genlik gösterir. Ve tüm müşteri adaylarındaki baskın frekans genellikle Delta aralığında ölçülür. Burada, temsili bir tavşan deneyinden uyku mili dalgaları gösterilir.
Bir uyku döneminin çoklu EEG montajları, bu dalgaların insan bulgularıyla tutarlı olan başın merkezinden kaynaklandığını göstermektedir. Normal EEG değişikliklerine ek olarak, bu verileri epileptik form deşarjlarından ayırt etmek için kullanılabilecek temel kayıtlar sırasında çeşitli bilinçli, epileptik olmayan tavşan hareketleri de gözlenebilir. Telleri bacaklardan uzak tutmak ve tavşanları kısıtlayıcıya aktarırken elektrotların bağlı kalmasına dikkat etmek için EKG kurşunun cilde güvenli bir şekilde yerleştirilmesi önemlidir.
Bu çok sistemli kayıt aparatı, gelecekteki ilaç güvenliği ve etkinlik çalışmalarını mümkün kılacak ve edinilmiş ve kalıtsal çeşitli hastalıkların kapsamlı bir şekilde anlaşılmasını kolaylaştıracaktır. Bu teknik, bir nöbetten sonra potansiyel olarak ölümcül, multiorgan disfonksiyonun seyrini yakalar ve bu da SUDEP mekanizmasının daha iyi anlaşılmasına yol açacaktır.
