Ferrik Klorür Kaynaklı Arteriyel Tromboz ve 3D Elektron Mikroskobu Analizi için Numune Toplama

Bu yöntemle, trombositlerin ve hemostatik sistemin hangi bileşenlerinin tromboz için önemli olduğu belirlenebilir. Ek olarak, bu yöntem trombüs büyümesinin ve mimarisinin hücresel düzeyde nasıl etkilendiğini belirleyebilir. Bu tekniğin temel avantajı, trombozun birçok aşamasını yapısal düzeyde incelemek için tekrarlanabilir bir yol sağlamasıdır.

Bu teknikte yeni olan bir kişi, cerrahi alandaki dokuyu aşırı kullanmaktan kaçınmalıdır. Bu kanamaya yol açabilir ve karotis arterin tanımlanmasını aşırı derecede zorlaştırabilir. Karotis arteri açığa çıkardıktan sonra, 0.1 milimetre büyüklüğünde iki cerrahi iplik arasındaki bölgeyi gevşek bir şekilde çevreleyerek yaralanma bölgesini işaretlemeye başlayın.

Probu alt iplikten arter distalinin altına yerleştirin. Plastik parçayı, demir klorür yaralanması bölgesini işaretlemek için iki iplik arasındaki arterin altına yerleştirin. Bazal akışı not etmek için yaralanma yapmadan önce akış ölçümleri yapın.

Demir klorürle ıslatılmış filtre kağıdını üç dakika boyunca artere yerleştirerek yaralanmayı gerçekleştirin. Yaralanmanın değişken derecesini önlemek ve prob tarafından akış sayımını kolaylaştırmak için filtre kağıdını üç dakika sonra çıkarın. Fazla kalan demir klorürü çıkarmak için yaralanma bölgesine salin ekleyin.

Akış okumasını izleyin. Akış başlangıç değerinin %50'sinin altına düştüğünde, probu çıkarın. Alanı hızla kurutun ve yaralanma bölgesini dışarıdan düzeltmek için fiksatif ekleyin.

Daha sonra, arteri forseps ile yaralanma bölgesinin yakınında derhal tutun. Alt ipliğin aşağı akışını ve üst ipliğin yukarı akışını kesin. Dokuyu plastik doku kültürü kabına toplandığı gibi aynı yönde koyun ve birkaç damla fiksatif ekleyin.

Bir neşter kullanarak, arterin etrafındaki ekstra dokuyu temizleyin. Bir ucunu yatay olarak keserek ve diğer ucunu sivrerek veya eğik olarak kan akışının yönünü kaydettiğinizden emin olun. Numuneyi oda sıcaklığında bir saat boyunca fiksatif olarak yerleştirin, ardından elektron mikroskobu analizi için ıslak buza gönderene kadar numuneyi 4 santigrat derecede% 1 paraformaldehit içinde saklayın.

Veriler bir Kaplan-Meier hayatta kalma eğrisi, kan akışının durması veya bir deneyin sona ermesi sırasında terminal kan akışını gösteren çubuklu bir nokta grafiği veya bir çizgi grafik olarak çizildi. Kan akışı, bazı vakalarda, büyüyen trombüsün kısmen dökülmesini gösteren birkaç dakika boyunca kademeli bir düşüşün ardından aniden artmıştır ve bir embolizasyon olayı olarak kabul edilmiştir. Tıkayıcı trombüs morfolojisi de bu yöntem kullanılarak incelendi.

Tromboz işlemi sırasında numunenin derhal toplanması en önemli adımdır, çünkü bu işlemdeki gecikme yapısal analizimizin yanlış yorumlanmasına neden olabilir.