Bu protokol, pelvik organ prolapsusu veya POP gibi uterosakral ligament ve pelvik taban koşulları üzerine yapılan araştırmaların erişilebilirliğini genişletecek ve yansıtıcı pelvik taban dokusunun diseksiyonunu kolaylaştıracaktır. Bu teknik, anatomik ataşmanları korurken ve çevredeki pelvik taban organlarını alırken her iki uterosakral ligamentin bir fareden izole edilmesine izin verir. Yöntemimiz, hamileliğin veya hastalığın doku mekanik davranışını nasıl etkilediğine dair bu çalışmaya izin veren klinik öncesi bir model oluşturur.
Bu yöntem, kadın sağlığı ile ilgili araştırmalar için yeni bir araç oluşturmaktadır. Ana mücadele, uterosakral ligamentin tanımlanması ve ele alınmasıdır. Benim tavsiyem yeterli zaman ve özen göstermenizdir çünkü bu dokular küçük ve kırılgandır.
Ötanazi yapılmış bir fareyi bir pedin üzerine yerleştirerek ve dört uzuvları aşağı doğru sabitleyerek başlayın. Makasla karın üzerinde bir ila 1,5 santimetre uzunluğunda bir kesi yapın. İnsizyonun kraniyal, kaudal ve lateral taraflarındaki cildi nazikçe ayırın.
Fareyi sırt tarafına bakacak şekilde çevirin ve cildi arka bacaklara doğru yavaşça soyun. Uzuvları sabitleyin ve torakstan pelvise kadar karın içine bir santimetre uzunluğunda bir kesi yapın. Net bir görüş için organları yavaşça göğüs kafesine doğru itin.
Bir çift forseps kullanarak PBS ile sulamadan sonra, pelvik yağ dokusunu çekin ve temizleyin. Rahim boynuzlarını tanımlayın ve sonra yumurtalıklardan kesin. Şimdi, onları görüş alanından çekin ve servikal bağlantıyı kesin.
Üreterleri mesane bağlantısından ayırın. Kolonu servikse mümkün olduğunca yakın kesin. Uterosakral ligamentleri görselleştirmek için fareyi ped ile diseksiyon kapsamının altına yerleştirin.
Uterosakral bağlardan çevredeki yağları nazikçe temizlemek için forseps kullanın. Her iki ligamentin servikal ucunun etrafına 5-0'lık bir dikiş bağlayın. Uterosakral ligamentin servikal ucunu kesin, serviksin bir parçasını bağlı bırakın.
Şimdi, ligamentin altından bir kas parçası kesin. Disseke edilmiş dokuyu, doku hidrasyonunu korumak için PBS içeren bir banyoya yerleştirin. Kalan dokunun servikal ucunu kesin, mekanik test ve görüntüleme için bağlı bir serviks parçası bırakın.
Yağ temizlendikten sonra, mesaneyi forseps ile tutun ve yaklaşık 40 derecelik bir açıyla yavaşça kaldırın. Mesaneyi, serviksin hemen üstündeki distal taraftan kesmek için makas kullanın. Hidrasyonu korumak için mesaneyi PBS ile bir banyoya yerleştirin.
Şimdi, rahim ağzını yaklaşık 40 derecelik bir açıyla kaldırmak için forsepsleri kullanın. Rektum ve serviksi birbirine bağlayan rektovajinal fasyayı tanımlayın ve neşter ile bağlantıyı kesin. Kasık sentezinde kasık kemiğini kesmek için makas kullanın.
Doku yerleştirmelerinin görünürlüğünü artırmak için pelvik tabanı yavaşça genişletin. Serviksi forseps ile tutun ve vulvaya mümkün olduğunca yakın kesin. Hidrasyonu korumak için dokuyu PBS'ye yerleştirin.
Rektumu yavaşça toraksa doğru çekmek için forsepsleri kullanın. Rektumu tanımlayın ve anüsten kesin. Hidrasyonu korumak için rektumu PBS'ye yerleştirin.
İlgilenilen tüm dokular toplandıktan sonra femurları pelvisten çıkarır. Pelvik kemiği distal ve proksimal uçlardan kesin. Disseke edilmiş dokuyu PBS'ye yerleştirin.
Enzim tedavisinin, uterosakral ligamentin öngörülen küresel yer değiştirmelerde yaşadığı ortalama aksiyel zirveyi ve gevşemiş stresörleri azalttığı görülmüştür, bu da kollajen ve glikozaminoglikanların ligamentlerin eksenel sertliğine katkıda bulunduğunu göstermektedir. Mekanik olarak test edilen her numune için ortalama eksenel suşlar, enzimle muamele edilmiş numunelerdeki global eksenel suşun kontrollü numuneye benzer veya daha büyük olduğunu göstermektedir, bu da makroskopik stresteki azalmanın daha küçük suşlardan ziyade enzim tedavisinden kaynaklandığını düşündürmektedir. Uterosakral ligamentin ara bölümünün Raman spektroskopisi, enzim tedavilerinin murin uterosakral ligamentlerin biyokimyasal bileşimini değiştirdiğini göstermektedir.
Kollajenaz ile tedavi edilen uterosakral bağlar, kollajen içeriğini azaltmış, ayrıca su ve hyaluronik asidi azaltmıştır. Kondroitinaz ile tedavi edilen uterosakral bağlar daha az hyaluronik asidin yanı sıra daha düşük su ve kollajen içeriğine sahipti. Detaylara dikkat etmek çok önemlidir, özellikle USL ve pelvik organların etrafındaki birikintilerin USL'ye ve çevresindeki dokulara zarar vermemek için gerekli olduğu gerçeğini temizlerken.
USL ve diğer pelvik taban dokuları üzerinde, POP'u etkilediği varsayılan genetik varyasyonlara sahip fareler kullanılarak daha fazla araştırma yapılabilir. Protokolümüz, USL'lerin mekanik davranışının, POP için önemli bir risk faktörü olan gebeliğin bir işlevini nasıl değiştirdiğine dair araştırmalar da dahil olmak üzere bir dizi yeni çalışmaya olanak sağlamaktadır.
