A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
وصول المواد الغذائية، والايضات الحجمية والأدوية بالتداول يسيطر عليه حاجز الدم القناة الهضمية في (جب). يصف لنا طريقة مباشرة لقياس جب النفاذية في فيفو، الذي، على النقيض من الأساليب غير المباشرة المستخدمة عادة، هو تقريبا لا تتأثر وظائف الكبد والكلى.
حاجز الدم القناة الهضمية في (جب) يتحكم في مرور المواد الغذائية ونواتج الأيض البكتيرية والعقاقير من التجويف المعوي إلى مجرى الدم. سلامة جب تشعر بالانزعاج في أمراض الجهاز الهضمي والقلب والأوعية الدموية والايض، مما قد يتسبب في وصول أسهل للمركبات النشيطة بيولوجيا، مثل الأمعاء البكتيرية والايضات، إلى مجرى الدم. وهكذا، قد تكون نفاذية جب علامة أمراض المعوية واكسترينتيستينال على حد سواء. وعلاوة على ذلك، تزايد تغلغل والايضات البكتيرية قد تؤثر على أداء الكائن الحي كامل.
هي أساليب شائعة لدراسة نفاذية جب المنجز السابقين فيفو. دقة تلك الأساليب محدودة، نظراً لأن أداء جب يعتمد على تدفق الدم المعوية. من ناحية أخرى، قد تكون متحيزة الأساليب استخداماً في فيفو بالكبد والكلى أداء، حيث تقوم هذه الأساليب على تقييم بول أو/وتركيزات الدم المحيطي من علامات خارجية. وهنا، نقدم مباشرة قياس النفاذية جب في الفئران باستخدام أسلوب في فيفو يستند المدخل الدم أخذ العينات، والذي يحافظ على تدفق الدم المعوية وهو تقريبا لا تتأثر وظيفة الكبد والكلى.
البولي يوريثان بالقسطرة تندس في الوريد البابي والاوردة أدنى الوريد الأجوف فقط أعلاه الكبد التقاء. يتم أخذ عينات الدم عند خط الأساس، وبعد إقامة علامة المحدد في جزء المرجوة من الجهاز الهضمي. هنا، فإننا نقدم العديد من التطبيقات لأسلوب بما في ذلك (1) تقييم نفوذية القولون للجمعية التونسية للأمهات، والأمعاء البكتيرية المستقلب، (2) تقييم لتطهير الكبد من الجمعية التونسية للأمهات، و (3) تقييم لمسار الدم الدم-الكبد-الطرفية مدخل القناة الهضمية للقناة الهضمية الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة المشتقة من البكتيريا. وعلاوة على ذلك، يمكن استخدام البروتوكول أيضا لتعقب امتصاص الأمعاء والكبد للمخدرات أو لقياسات ضغط الدم المدخل.
حاجز الدم القناة الهضمية (جب)، يعرف أيضا باسم الحاجز المعوي، هو نظام معقد متعدد الطبقات الذي يفصل التجويف القناة الهضمية من مجرى الدم بغية الحد من مرور المركبات الضارة بينما يسمح لامتصاص العناصر الغذائية1. وهو يتألف من ثلاث طبقات رئيسية: طبقة المخاط وظهاره والصفيحة بروبريا.
عوامل عديدة قد تؤثر على سلامتها والدالة جب2. فقد ثبت أن جب تشعر بالانزعاج في أمراض المعدة والأمعاء واكستراينتيستينال على السواء، بما في ذلك أمراض القلب والأوعية الدموية والايض3، مما قد يؤدي إلى ممر زيادة من نواتج الأيض البكتيرية الأمعاء إلى مجرى الدم4. قد تؤثر زيادة تغلغل من الأمعاء البكتيرية والايضات أداء الكائن الحي كامل. على سبيل المثال، تظهر الدراسات الأخيرة أثر كبير من نواتج الأيض البكتيرية، مثل indoles، H2S، والأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (الهيئة)، وتريميثيلاميني ن-أكسيد، على نظام الدورة الدموية وظائف5،،من67 ،،من89. وأخيراً، اقترح أن زيادة نفاذية جب تكون بمثابة علامة على أمراض القلب والأوعية الدموية، والتمثيل الغذائي التي ترتبط بالتغيرات المورفولوجية والوظيفية في الأمعاء10. ولذلك، قد يكون تتبع مسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية من نواتج الأيض البكتيرية من أهمية بالنسبة للعلوم الأساسية والسريرية على حد سواء.
الأساليب التجريبية المستخدمة عادة لتقييم نفاذية جب المنجز في المختبر باستخدام شرائح المعوية مستأصل، وأجزاء من الغشاء المخاطي، أو الأغشية الاصطناعية11،12. هو المساس بحقيقة أن الأداء السليم لجب يتطلب تدفق الدم المعوي المستمر بسبب دقة تلك الأساليب. من ناحية أخرى، تستند الأساليب المتاحة في فيفو تقييم البول أو الدم المحيطي تركيزات من علامات خارجية13. ومع ذلك، يتأثر تركيز البول والدم الطرفية الخارجية مركبات وظائف الكلي، أي معدل الترشيح الكبيبي والافراز الأنبوبي، فضلا عن التمثيل الغذائي في الكبد، أي أولاً تمرير الأيض. كل معلمات قد تختلف اختلافاً كبيرا بين مواضيع دراسة مستقلة عن الدالة جب.
وتصف هذه الورقة مباشرة قياس النفاذية جب في الفئران باستخدام عينات الدم المدخل. هذا الأسلوب في فيفو يحافظ على تدفق الدم المعوي، ويكاد لا يتأثر بوظيفة الكبد والكلى. وصف النهج الذي لا يستخدم عادة، ربما بسبب بعض الصعوبات المنهجية. يصف لنا بالتفصيل قسطرة الوريد البابي وأدنى الوريد الأجوف فقط فوق التقاء الوريد الكبدي. أخذ عينات من الدم من الوريد البابي وأدنى الوريد الأجوف يسمح تقييم تطهير جب النفاذية والكبد وكذلك تتبع مسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية للجزيئات ذات الاهتمام، مثل الأمعاء البكتيرية نواتج الأيض أو الأدوية. ونقدم أيضا العديد من التطبيقات للأسلوب الذي تم اختباره في المختبر. وهذه تشمل تقييم نفوذية القولون للجمعية التونسية للأمهات، المستقلب البكتيرية الأمعاء، والتقييم لتطهير الكبد من الجمعية التونسية للأمهات، وتقييم لمسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية للهيئة.
تقييم نفاذية حاجز الدم القناة الهضمية، ينبغي اتباع الخطوات التالية البروتوكول، بالترتيب: 1 (إدراج السطر للإدارات إينترينتيستينال)، 3 (قسطرة الوريد البابي)، 4 (أخذ عينات الدم الوريد البابي ), 6 (إقامة علامة نفاذية الأمعاء)، 4.
تقييم تطهير الكبد ومسار دم دم-كبد-منهجية مدخل القناة الهضمية، ينبغي اتباع الخطوات التالية البروتوكول، بالترتيب: 1 (إدراج السطر للإدارات إينتراينتيستينال)، 2 (الوريد الأجوف السفلي قسطرة)، 3 (قسطرة الوريد البابي)، 4 (أخذ عينات الدم من الوريد البابي)، 5 (أخذ عينات الدم من أدنى الوريد الأجوف)، 6 (إقامة علامة نفاذية الأمعاء)، 4، 5، 7 ( حساب إزالة الكبد).
التجارب التي أجريت على الفئران الذكور كيوتو ويستار وفقا "الاتحاد الأوروبي" التوجيه 2010/63 المتعلق بحماية الحيوانات المستخدمة لأغراض علمية ووافقت عليها أنا "اللجنة المحلية لأخلاقيات علم الأحياء" في وارسو.
1-إدراج بند للإدارة إينتراينتيستينال
ملاحظة: ونقترح هنا الإدارة إينتراكولونيك علامة باستخدام قسطرة. أنه يجوز تعديله من قبل الإدارة عن طريق الفم أو تزقيمية مدتها على مستويات مختلفة من الجهاز الهضمي مثل المعدة أو العفج. تذكر أن استخدام الملابس الجراحية القابل للتصرف، بما في ذلك ثوب الجراحية وغطاء محرك السيارة والقفازات، وضمان اتباع احتياطات السلامة المتصلة بالأدوات الحادة المستخدمة في الجراحة (الإبر، إلخ) أثناء إجراءات 1-6.
2-أدنى الوريد الأجوف قسطرة
3. قسطرة الوريد البابي
الشكل 1 : مدخل القسطرة. القسطرة المدخل يتكون من إبرة OD: 0.9 مم بطول حوالي 25.0 مم [A]، OD قسطرة البولي يوريثان مرنة: 0.025 "، طول نحو 100.0 ملم [ب]، تلميح البولي إثيلين مرنة للقسطرة OD: 0.040"، نحو 15.0 مم طويلة [ج]، سد [د]. ، وحرف مزدوج 3-0 بطول مم 100.0 [ه]. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
4-الوريد البابي الدم أخذ العينات
بروتوكول قصيرة | بروتوكول طويل |
t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) | t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) |
تي1 – 5 دقائق بعد الإدارة إينتراكولونيك | تي1 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك |
تي2 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك | t2 -60 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك |
الجدول 1: بوابة الدم بروتوكولات أخذ العينات لتقييم نفاذية الأمعاء.
ملاحظة: الفترة الزمنية بين أخذ عينات الدم على التوالي يعتمد أساسا على التوافر الأحيائي للمواد التي تم اختبارها وموقع الإدارة (القولون، المعدة، إلخ).
5. أخذ عينات من الدم الأجوف فينا أدنى من
الوريد البابي | أدنى الوريد الأجوف |
t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) | t0 – الأساس (قبل الإدارة إينتراكولونيك) |
تي1 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك | تي1 – 30 دقيقة بعد الإدارة إينتراكولونيك |
الجدول 2: بروتوكول الدم أخذ العينات للقياس تطهير الكبد، وتتبع مسار الدم الدم-الكبد-منهجية مدخل القناة الهضمية.
6-إدارة علامة نفاذية الأمعاء
7-حساب لتطهير الكبد
8-تقييم عينات الدم ن تركيز مادة الاختبار
وقد قمنا بقياس جب النفاذية والكبد تطهير للجمعية التونسية للأمهات في الفئران بنجاح. لقد أظهرنا أن الفئران ارتفاع ضغط الدم لديها نقطتين زيادة نفاذية للجمعية التونسية للأمهات بالمقارنة مع الفئران نورموتينسيفي (الشكل 2)4. وفي دراسة أخرى نجد أن ت?...
وصف مباشرة، في فيفو، تحتفظ طريقة قياس النفاذية جب شروط كلوسيتوفيسيولوجيكال في نظام الجهاز الهضمي (يحافظ على تدفق الدم المعوية)، وتقريبا لا يتأثر بوظيفة الكبد والكلى.
أن الخطوة الحاسمة لهذا الأسلوب هو إدخال القسطرة المدخل. وهذا يجب أن يتم بلطف وحزم في الوقت نفسه. نزيف خ?...
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
العمل معتمد من قبل وزارة العلوم والتعليم العالي جمهورية بولندا، منح الماس لا: DI2017 009247.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Needle OD: 9 mm | Becton Dickinson S.A. | 301300 | |
Polyethylene catheter ID: 0.025", OD: 0.040" | Scientific Commodities, Inc. | #BB520-40 | |
Polyethylene catheter ID: 0.012", OD: 0.025" | Scientific Commodities, Inc. | #BB520-25 | |
C-Flex Tubing,Opaque White 1/50"ID x 1/12 " OD | Cole-Parmer Instrument Co. | 06424-59 | |
Pediatric Foley catheter (size 10F or 8F) | Sigmed | 0000 80305 | |
Surgical ligatures 3/0 | Yavo Sp. Z o.o. | P48JE | |
Absorbable surgical sutures - Polyglactine 910 4/0 | KRUUSE Polska Sp. Zo.o. | 152336 | |
Tissue glue - Loctite 454Cyanoacrylate Adhesive | Loctite | 1370127 | |
Povidone iodine | EGIS Pharmaceuticals PLC | 4449 11 | |
Heparin - Heparinium WZF | WZF Polfa S.A. | 02BK0417 | Dilute 10 times with physiological saline |
Glycerin 86% | Laboratorium Farmaceutyczne Avena | 5.90999E+12 | Serves as a lubricant in colon catheterization |
Xylocaine 2% | AstraZenca | 9941342 | |
Urethane | Sigma-Aldrich (Merck) | U2500-500G | |
Trimethylamine solution 45% | Sigma-Aldrich (Merck) | 92262-1L | |
Syringes 2 mL | B.Braun Melsungen AG | 4606027V | |
Saline 250 mL | Fraesenius Kabi Polska Sp. Z o.o. | 15LL707WL | |
Surgical scissors, straight, length 115 mm, 4 1/2 "blunt ends | Braun | NS-010-115-PKM | |
Artery forceps type Micro-Adson bent, length 140 mm 5 1/2 " | Braun | KN-008-140-ZMK | |
Anatomic forceps, lenght 95 mm, 3 3/4" sharp 0.7x0.55 | Braun | PO-001-007-ZMK | |
Micro Scissors type Vannas, straight, lenght 85 mm, 3 3/8 " the length of the blades 6 mm | Braun | NO-010-085-PMK | |
Towel clamps type Backhouse, lenght 130 mm, 5 1/8" | Braun | HO-128-130-PMK | |
Needle holders, lenght 150 mm, 6" t=0.4 1/2 | Braun | IM-927-150-PZMK | |
Delicate Scissors, lenght 110 mm , straight, 4 3/8” sharp | Braun | NO-052-110-PMK | |
Anatomic forceps, lenght 95 mm, 3 3/4" sharp | Braun | PO-022-001-PMK |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved