A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
هنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة Aeromonas في C. ايليجانس. باستخدام هذه الأساليب ملائمة، فمن السهل تقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas .
مسببات الأمراض البشرية Aeromonas ثبت سريرياً يسبب التهاب المعدة والأمعاء، وعدوى الجرح، وتسمم الدم، والتهابات المسالك البولية. قد أبلغ معظم البشرية من الأمراض تترافق مع أربعة أنواع من البكتيريا: Aeromonas دهاكينسيس هيدروفيلا Aeromonasو بروني Aeromonasو كافي أيروموناس. نموذج الكائن الحي ايليجانس كاينورهابديتيس هو باكتيريفوري الذي يوفر نموذج عدوى ممتازة لدراسة الآلية المرضية البكتيرية من أيروموناس. وهنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة أيروموناس باستخدام نموذج C. ايليجانس ، بما في ذلك البقاء على قيد الحياة وسمية سائلة وفحوصات نخر العضلات. وكانت نتائج ثلاثة أساليب تحديد ضراوة Aeromonas متسقة. وأبدى دهاكينسيس (أ) أن تكون الأكثر سمية بين 4 أهم الأنواع Aeromonas تسبب العدوى السريرية. وترد هذه الأساليب لتكون وسيلة مريحة لتقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas وتسهم في فهمنا للآلية المرضية للإصابة أيروموناس .
مسببات الأمراض البشرية، Aeromonas، ثبت سريرياً يسبب التهاب المعدة والأمعاء، وعدوى الجرح، وتسمم الدم، والتهابات المسالك البولية1،2. أبلغ معظم الأمراض البشرية المرتبطة بها لتكون مرتبطة مع أربعة أنواع من البكتيريا: 2، دهاكينسيس أيروموناس، هيدروفيلا Aeromonasو بروني Aeromonasو كافي Aeromonas 3 , 4 , 5-من بين الأمراض المعدية أيروموناس ، يمكن أن يسبب التهابات الأنسجة اللينة حادة في معدلات الاعتلال والوفيات في البشر. ملاحظة، نخر العضلات هو أشد أشكال الأنسجة اللينة العدوى6. المراقبة للبقاء على قيد الحياة ونخر العضلات من ايليجانس كاينورهابديتيس بعد الإصابة أسلوب مناسب للتكهن بسمية Aeromonas.
فعلا طور العلماء الكائنات نموذج عديدة لدراسة حالات العدوى البكتيرية. في دراسات سابقة، استخدمت الفئران، زيبرافيشيس، والديدان الخيطية كنماذج حيوانية لدراسة الآلية المرضية وضراوة Aeromonas6،،من78. كل نموذج الحيوان في ' المزايا والتطبيقات. نموذج الكائن الحي، ايليجانس كاينورهابديتيس، هي ديدان أسطوانية باكتيريفوروس أي مأخذ البكتيريا فودناتورالي. C. ايليجانسطورت نظام المناعة فطرية معقدة ضد العدوى البكتيرية على مدى تطورها. وقد ثبت C. ايليجانس تحت ضغط العدوى البكتيرية، تكون نموذجا عدوى ممتازة لدراسة الآلية المرضية البكتيرية أيروموناس6،،من79 ومسببات الأمراض الأخرى مثل الفطريات10 واسشيريشيا الإشريكيّة القولونية O157:H711. ومع ذلك، لا يزال هناك لا المنشور يركز على المنهجية في استخدام C. ايليجانس كنموذج لدراسة ضراوة Aeromonas.
هنا، نحن نقدم ثلاث تجارب مختلفة لدراسة الإصابة Aeromonas استخدام C. ايليجانس كنموذج حيوان: فحوصات للبقاء على قيد الحياة وسمية سائلة ونخر العضلات. هذه الأساليب طريقة ملائمة لتقييم سمية فيما بين وداخل الأنواع Aeromonas وتحسين فهم الآلية المرضية أيروموناس.
1-إعداد متوسطة الثقافة
ملاحظة: انظر الجدول 1 لإعداد الحل.
2-تزامن ايليجانس جيم-6،،من912
3- C. ايليجانس "بقاء المقايسة" مع Aeromonas،من69
4- C. ايليجانس "المقايسة سمية السائل" مع أيروموناس7
ملاحظة: لتجنب التلوث، ينبغي إجراء الخطوات في غطاء الاندفاق الصفحي.
5- C. ايليجانس "المقايسة نخر العضلات" مع أيروموناس6
ملاحظة: لتجنب التلوث، ينبغي تنفيذ هذه الخطوات في غطاء الاندفاق الصفحي.
6. التحليلات الإحصائية
عن طريق اتباع البروتوكولات المذكورة أعلاه، فمن السهل للتفريق بين السمية من أربع سلالات أيروموناس . ويرد في الشكل 1مقايسة البقاء على قيد الحياة من C. ايليجانس . كانت معدلات البقاء على قيد الحياة من C. ايليجانس المصابين بالأنواع Aeromonas ، سيظ...
C. ايليجانس ديدان أسطوانية باكتيريفوروس بطبيعة الحال أن مأخذ البكتيريا كغذاء، وقد وضعت حصانة فطرية تعقيداً للبكتريا أثناء عملية تطورية. اثنين من الأجهزة الرئيسية للحفاظ على ودعم الحصانة هي9،البشرة والأمعاء13. البشرة وعصابات من العضلات C. ايليجانس ...
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
ونحن ممتنون للمساعدة من مرفق الأساسية C. ايليجانس في تايوان والميكروبيولوجيا التشخيصية ويعزل "مضادات الميكروبات المقاومة المختبر من الوطني تشنغ الكونغ المستشفى الجامعي" لتقديم أيروموناس . ونعترف أيضا مركز علم الوراثة كاينورهابديتيس (كجك)، وفي وورمباسي. ونشكر أيضا مور سفانا لتحرير المخطوطة.
وأيد هذه الدراسة جزئيا المنح المقدمة من وزارة العلوم والتكنولوجيا من تايوان (آخر 105-2628-B-006-017-MY3) والمستشفى الوطني لجامعة الكونغ تشنغ (نكوه-10705001) بفضل تشن.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Shaker incubator | YIH DER | LM-570R | Bacteria incubation |
K2HPO4 | J.T.Baker | MP021519455 | Culture medium preparation |
KH2PO4 | J.T.Baker | 3246-05 | Culture medium preparation |
Na2HPO4 | J.T.Baker | MP021914405 | Culture medium preparation |
NaCl | SIGMA | 31434 | Culture medium preparation |
MgSO4 | SIGMA | M7506 | Culture medium preparation |
agar | Difco | 214530 | Culture medium preparation |
CaCl2 | SIGMA | C1016 | Culture medium preparation |
cholesterol | SIGMA | C8503 | Culture medium preparation |
ethanol | SIGMA | 32205 | Culture medium preparation |
KOH | SIGMA | P5958 | Culture medium preparation |
6 cm Petri plate | ALPHA PLUS | 46 | agar plate preparation |
96-well plate | FALCON | 353072 | liquid assay |
bacterial peptone | Affymetrix/USB | AAJ20048P2 | Culture medium preparation |
yeast extract | SIGMA | 92144 | Culture medium preparation |
citric acid•H2O | SIGMA | C1909 | Culture medium preparation |
tri-potassium citrate•H2O | SIGMA | 104956 | Culture medium preparation |
FudR | SIGMA | 1271008 | Culture medium preparation |
disodium EDTA | SIGMA | E1644 | Culture medium preparation |
FeSO4•7 H2O | SIGMA | 215422 | Culture medium preparation |
MnCl2•4 H2O | SIGMA | 221279 | Culture medium preparation |
ZnSO4•7 H2O | SIGMA | 204986 | Culture medium preparation |
CuSO4•5 H2O | SIGMA | C8027 | Culture medium preparation |
tryptone | SIGMA | 16922 | Culture medium preparation |
Microscope system | Nikon | Eclipase Ti inverted | microscope imaging |
Scientific CCD Camera | QImaging | Retiga-2000R Fast 1394 | microscope imaging |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved