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Method Article
線虫におけるアエロモナス感染症を研究する 3 つの実験を紹介します。これらの便利なメソッドを使用して、間とAeromonas種内の毒性を評価するために簡単です。
ヒトの病原体アエロモナスは胃腸炎、創傷感染、敗血症、尿路感染症を引き起こす臨床的に示されています。最も人間の病気は、細菌の種に関連する報告されている:アエロモナス ポリエステルアエロモナスより、アエロモナス サルモニシダアエロモナス dhakensis。モデル生物線虫は、アエロモナスの病原細菌を研究する優れた感染モデルを提供する bacterivore です。生存、液体毒性、筋壊死アッセイなど線虫モデルを用いたアエロモナス感染症を研究する 3 つの実験を紹介します。アエロモナスの病原性を決定する 3 つの方法の結果は安定していた。A. dhakensisは、臨床感染症の原因 4 主要アエロモナス種の中で最も毒性の高いことが示されました。これらのメソッドは、アエロモナス種内の中で毒性を評価し、アエロモナス感染症の病態の理解に貢献する便利な方法に表示されます。
ヒトの病原体、アエロモナスは、胃腸炎や創傷感染、敗血症、尿路感染症1,2を引き起こす臨床的に示されています。最も関連する疾患は、4 つの細菌種に関連する報告されている:アエロモナス ポリエステルアエロモナスより、アエロモナス サルモニシダアエロモナス dhakensis 2,3,4,5.アエロモナス感染症の中で軟部組織感染症を引き起こす可能性が罹患率と死亡率の人間で。注、筋壊死軟部組織感染症6の最も深刻な形です。生存の観察、感染後線虫の筋肉壊死アエロモナスの毒性を推測する便利な方法です。
科学者は、細菌感染症を研究する多くのモデル生物を既に開発しました。従来、マウス、zebrafishes、および線虫アエロモナス6,7,8の病原性と病因を研究する動物モデルとして使用されました。すべての動物のモデルには、その ' 利点と用途。モデル生物、線虫、bacterivorous 線虫は、摂取量の細菌が foodnaturally として。線虫はその進化の過程で細菌感染に対する複雑な生得の免疫組織を開発しました。細菌感染症のストレスの下でc. の elegansは、アエロモナス6,7,9および他の病原体の病原細菌を研究する優れた感染モデルであること実証されていますのような菌10と出血性大腸菌o157: h711。ただし、アエロモナスの病原性を研究するためのモデルとして線虫を使用して方法論に焦点を当てた出版物はまだありません。
動物モデルとして線虫を用いたアエロモナス感染症を研究する 3 つの実験をご紹介: 生存、液体毒性と筋壊死のための試金。これらのメソッドは、アエロモナス種内の中で毒性を評価し、アエロモナスの病因の理解を改善する便利な方法です。
1. 培地の準備
注: ソリューションの準備のための表 1 を参照してください。
2. c. の elegans6,9,12の同期
3アエロモナス6,9 c. の elegans生存分析。
4.アエロモナス7 c. の elegans液体毒性アッセイ
注:汚染を避けるためには、層流フードの手順を実行する必要があります。
5. c. の elegans筋壊死アッセイアエロモナス6
注:汚染を避けるためには、層流フードでこれらの手順を実行する必要があります。
6. 統計解析
上記で説明したプロトコルに従うことによって 4アエロモナス系統から毒性を区別するために簡単です。図 1にc. の elegansの生存分析を示します。フエレット、高から低の順に示すように感染している線虫の生存率: A. ポリエステル、A. より、A. サルモニシダ、 A. dhakensis。毒性の間で、アエロモナス?...
線虫は bacterivorous 線虫、自然食品として摂取菌し、その進化のプロセスの中に細菌を複雑な免疫を開発しました。表皮および腸の9,13主要な臓器を維持し、免疫力をサポートします。表皮と線虫の筋肉のバンドでは哺乳類と人間6軟部組織の構造に似ています。これらの特性により、線虫、アエロモナス感...
著者が明らかに何もありません。
線虫中核施設診断微生物学、台湾からの支援に感謝しており、抗菌抵抗研究所の国立チェン Kung 大学病院アエロモナスを提供するための分離します。また、線虫の遺伝学センター (CGC) や、WormBase を認めます。我々 はまた、原稿を編集 Savana ムーアを感謝します。
本研究はパ陳に科学省と台湾の技術 (最も 105-2628-B-006-017-MY3) 国立チェン Kung 大学病院 (NCKUH-10705001) からの助成金によって部分的に支えられました。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Shaker incubator | YIH DER | LM-570R | Bacteria incubation |
K2HPO4 | J.T.Baker | MP021519455 | Culture medium preparation |
KH2PO4 | J.T.Baker | 3246-05 | Culture medium preparation |
Na2HPO4 | J.T.Baker | MP021914405 | Culture medium preparation |
NaCl | SIGMA | 31434 | Culture medium preparation |
MgSO4 | SIGMA | M7506 | Culture medium preparation |
agar | Difco | 214530 | Culture medium preparation |
CaCl2 | SIGMA | C1016 | Culture medium preparation |
cholesterol | SIGMA | C8503 | Culture medium preparation |
ethanol | SIGMA | 32205 | Culture medium preparation |
KOH | SIGMA | P5958 | Culture medium preparation |
6 cm Petri plate | ALPHA PLUS | 46 | agar plate preparation |
96-well plate | FALCON | 353072 | liquid assay |
bacterial peptone | Affymetrix/USB | AAJ20048P2 | Culture medium preparation |
yeast extract | SIGMA | 92144 | Culture medium preparation |
citric acid•H2O | SIGMA | C1909 | Culture medium preparation |
tri-potassium citrate•H2O | SIGMA | 104956 | Culture medium preparation |
FudR | SIGMA | 1271008 | Culture medium preparation |
disodium EDTA | SIGMA | E1644 | Culture medium preparation |
FeSO4•7 H2O | SIGMA | 215422 | Culture medium preparation |
MnCl2•4 H2O | SIGMA | 221279 | Culture medium preparation |
ZnSO4•7 H2O | SIGMA | 204986 | Culture medium preparation |
CuSO4•5 H2O | SIGMA | C8027 | Culture medium preparation |
tryptone | SIGMA | 16922 | Culture medium preparation |
Microscope system | Nikon | Eclipase Ti inverted | microscope imaging |
Scientific CCD Camera | QImaging | Retiga-2000R Fast 1394 | microscope imaging |
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