تثبيت قطع عظم الفخذ مع تثبيت الصفائح في Ambystoma mexicanum

Summary

يتم تقديم بروتوكول لجراحة قطع عظم الفخذ مع استخدام تثبيت اللوحة الداخلية في قنافذ البحر الناضجة. يمكن استخدام الإجراء لإجراء دراسات مقارنة حول تجديد الأطراف والتئام الكسور في البرمائيات المائية.

Abstract

قنفذ البحر (Ambystoma mexicanum) هو كائن نموذجي واعد للطب التجديدي بسبب قدرته الرائعة على تجديد الأعضاء المفقودة أو التالفة ، بما في ذلك الأطراف والدماغ والقلب والذيل وغيرها. تسلط الدراسات التي أجريت على قنفذ البحر الضوء على المسارات الخلوية والجزيئية التي تحكم تنشيط السلف واستعادة الأنسجة بعد الإصابة. يمكن تطبيق هذه المعرفة لتسهيل التئام الإصابات غير الكفؤة للتجديد ، مثل عدم اتحاد العظام. في البروتوكول الحالي ، يتم وصف تثبيت عظم الفخذ باستخدام نظام تثبيت لوحة داخلي. تم تكييف الإجراء للاستخدام في المائية (axolotl ، Ambystoma mexicanum). تم استخدام قنافذ البحر ≥ 20 سم من الخطم إلى الذيل مع عظم الفخذ المتحجر بالكامل بحجم الماوس ، وتم إيلاء اهتمام خاص لوضع اللوحة وتثبيتها ، وكذلك لرعاية ما بعد الجراحة. تسمح هذه التقنية الجراحية بتثبيت العظام بشكل موحد ومستقر ويمكن أن تكون مفيدة للمقارنة المباشرة مع تجديد أطراف axolotl والدراسات المماثلة لشفاء العظام عبر البرمائيات والثدييات.

Introduction

يعد قنفذ البحر (Ambystoma mexicanum) نموذجا مهما لتجديد الأعضاء ، بما في ذلك الذيل والحبل الشوكي والدماغ والقلب والخياشيم والأطراف^{1،2،3،4،5}. كشفت الدراسات التفصيلية لتجديد أطراف قنفذ البحر عن آليات عدم تمايز الخلايا وتشكيل تجمع الخلايا الجذعية ، blastema، في موقع البتر. نظرا لقدرة الخلايا الأرومية على إعادة بناء جميع أجزاء الأطراف المفقودة ، بما في ذلك الهيكل العظمي^{المنقوش 6,7} ، يبدو أن قنفذ البحر كائن نموذ....

Protocol

تم تنفيذ الإجراء التالي بموافقة قاضي فيينا (GZ: MA 58-65248-2021-26). 5-8 سنوات ، ≥ 20 سم من طرف الخطم إلى الذيل (الخطم إلى طرف الذيل) تم استخدام قنافذ البحر الطويلة (Ambystoma mexicanum) لجراحة الكسور وبتر الأطراف. تم استخدام كل من الذكور والإناث في العمليات الجراحية. تم تربية Axolotls في معهد أبحاث مرفق علم الأمراض الجزيئي. تمت إدارة الألم وخطر العدوى باستخدام المسكنات والمضادات الحيوية المناسبة لضمان نتيجة ناجحة. يتم سرد الكواشف والمعدات المستخدمة للدراسة في جدول المواد.

1. إعداد

1. استحم في محلول بنزوكائين 0.03٪ لمدة 15-20 دقيقة حتى يتم الوصول إلى التخدي....

النتائج

تستغرق العملية الجراحية الموصوفة هنا (الشكل 1) ما بين 20 دقيقة و 30 دقيقة وتتطلب جراحا ومساعدا. اختياريا ، استخدم مجهر تشريح مجهر أو نظام عدسة مكبرة.

الشكل 1.......

Discussion

تسمح الطريقة الموصوفة حاليا لتثبيت صفيحة عظم الفخذ وقطع العظم بتطبيقه في المائية ، مثل Ambystoma mexicanum (axolotl). تم استخدام هذه الطريقة الجراحية مؤخرا لمقارنة التئام الكسور وتجديد الأطراف في قنافذ البحر بشفاء الكسور في الفئران⁹. كما هو الحال في الفئران ، يمكن ت.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.66 mm Gigly wire saw	RISystem	RIS.590.120
7.0 Optilene suture	Braun	C3090538
Benzocaine	Sigma-Aldrich	E1501	dilute to 0.03%  prior to using
Butorphanol (Butomidor 10 mg/mL)	Richter Pharma AG	-	dilute to 0.5 mg/L  prior to using
Drill bit 0.30 mm	RISystem	RIS.590.200
Dumont #5 Forceps - Standard/Inox	Fine Science Tools	11251-20
Hand drill	RISystem	RIS.390.130	better to have at least 3 pieces
Micro CT data analyzer	Bruker, Billerica, MA, USA	SkyScan NRecon software
Micro CT specimen scanner	Bruker, Billerica, MA, USA	SkyScan 1172
Moria MC31b Iris forceps - smooth, curved, 10 cm	Fine Science Tools	11373-12FST	2 pieces
MouseFix Drill-&Saw guide 1.75 mm, rigid	RISystem	RIS.301.102
MouseFix plate 4 hole, rigid	RISystem	RIS.401.110
MouseFix screw, L =2.00 mm	RISystem	RIS.401.100	need 4 per bone
Narrow Pattern Forceps	VWR	FSCI11002-12
penicillin/streptomycin	Gibco	15140-122
Ring forceps	Fine Science Tools	11103-09
scalpel #15	B Braun, Thermo Fischer Scientific	5518032
Square box wrench 0.50 mm	RISystem	RIS.590.111
Sterile bone wax, 2.5 g	Ethicon, Johnson & Johnson	W810
Student Fine Scissors - Straight/11.5cm	Fine Science Tools	91460-11