Stabilisation d’une ostéotomie fémurienne avec une fixation par plaque chez Ambystoma mexicanum

Résumé

Un protocole pour la chirurgie de l’ostéotomie fémorale avec l’utilisation de la fixation de la plaque interne chez les axolotls matures est présenté. La procédure peut être utilisée pour effectuer des études comparatives sur la régénération des membres et la guérison des fractures chez les amphibiens aquatiques.

Résumé

L’axolotl (Ambystoma mexicanum) est un organisme modèle prometteur pour la médecine régénérative en raison de sa remarquable capacité à régénérer les organes perdus ou endommagés, y compris les membres, le cerveau, le cœur, la queue et autres. Des études sur l’axolotl ont mis en lumière les voies cellulaires et moléculaires régissant l’activation des progéniteurs et la restauration des tissus après une blessure. Ces connaissances peuvent être appliquées pour faciliter la guérison des blessures inaptes à la régénération, telles que la non-consolidation osseuse. Dans le protocole actuel, la stabilisation de l’ostéotomie du fémur à l’aide d’un système de fixation de plaque interne est décrite. La procédure a été adaptée pour être utilisée chez les animaux aquatiques (axolotl, Ambystoma mexicanum). Des axolotls de ≥20 cm, du museau à l’extrémité de la queue, avec des fémurs comparables entièrement ossifiés, de la taille d’une souris, ont été utilisés, et une attention particulière a été accordée au positionnement et à la fixation de la plaque, ainsi qu’aux soins postopératoires. Cette technique chirurgicale permet une fixation osseuse standardisée et stabilisée et pourrait être utile pour une comparaison directe avec la régénération des membres axolotl et des études analogues de la cicatrisation osseuse chez les amphibiens et les mammifères.

Introduction

L’axolotl (Ambystoma mexicanum) est un modèle important pour la régénération des organes, y compris la queue, la moelle épinière, le cerveau, le cœur, les branchies et les membres 1,2,3,4,5. Des études détaillées de la régénération des membres de l’axolotl ont révélé des mécanismes de dédifférenciation cellulaire et de formation d’un pool de cellules souches, le blastème, au site d’amputation. En raison de la capacité des cellules de blastème à reconstruire toutes ....

Protocole

La procédure suivante a été réalisée avec l’approbation du magistrat de Vienne (GZ : MA 58-65248-2021-26). Âgés de 5 à 8 ans, ≥ axolotls longs (Ambystoma mexicanum) de 20 cm du museau à la queue (Ambystoma mexicanum) étaient utilisés pour la chirurgie des fractures et les amputations. Des hommes et des femmes ont été utilisés pour les chirurgies. Les axolotls ont été élevés dans les installations de l’Institut de recherche en pathologie moléculaire. La douleur et le risque d’infections ont été gérés à l’aide d’analgésiques et d’antibiotiques appropriés pour assurer le succès. Les réactifs et l’équipement utilisés pour l’étude....

Discussion

La méthode actuellement décrite de fixation de la plaque du fémur et d’ostéotomie permet son application chez les animaux aquatiques, tels que Ambystoma mexicanum (axolotl). Cette méthode chirurgicale a récemment été utilisée pour comparer la cicatrisation des fractures et la régénération des membres chez les axolotls à la cicatrisation des fractures chez les souris⁹. Comme chez les souris, une plaque de fixation à 4 trous peut être fixé.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.66 mm Gigly wire saw	RISystem	RIS.590.120
7.0 Optilene suture	Braun	C3090538
Benzocaine	Sigma-Aldrich	E1501	dilute to 0.03%  prior to using
Butorphanol (Butomidor 10 mg/mL)	Richter Pharma AG	-	dilute to 0.5 mg/L  prior to using
Drill bit 0.30 mm	RISystem	RIS.590.200
Dumont #5 Forceps - Standard/Inox	Fine Science Tools	11251-20
Hand drill	RISystem	RIS.390.130	better to have at least 3 pieces
Micro CT data analyzer	Bruker, Billerica, MA, USA	SkyScan NRecon software
Micro CT specimen scanner	Bruker, Billerica, MA, USA	SkyScan 1172
Moria MC31b Iris forceps - smooth, curved, 10 cm	Fine Science Tools	11373-12FST	2 pieces
MouseFix Drill-&Saw guide 1.75 mm, rigid	RISystem	RIS.301.102
MouseFix plate 4 hole, rigid	RISystem	RIS.401.110
MouseFix screw, L =2.00 mm	RISystem	RIS.401.100	need 4 per bone
Narrow Pattern Forceps	VWR	FSCI11002-12
penicillin/streptomycin	Gibco	15140-122
Ring forceps	Fine Science Tools	11103-09
scalpel #15	B Braun, Thermo Fischer Scientific	5518032
Square box wrench 0.50 mm	RISystem	RIS.590.111
Sterile bone wax, 2.5 g	Ethicon, Johnson & Johnson	W810
Student Fine Scissors - Straight/11.5cm	Fine Science Tools	91460-11