وأيد هذا البحث من خلال المنح التي تقدم للمساعدة للبحث العلمي لجمعية اليابان لتعزيز العلوم (صفحات JSP) ، المنحة التي تقدم للمساعدة من وزارة التربية والتعليم والثقافة والرياضة والعلوم والتكنولوجيا في اليابان والمنح في و مساعدات من الطيور وكريست العلوم اليابان وكالة التكنولوجيا والمنح التي تقدم للمساعدة من المركز الياباني Neuroinformatics (NIJC) ، بتبريد والمنح والمعونات وللبحوث العلمية في أبحاث الدماغ الأولوية مناطق التكاملية (شيان) -- من وزارة التربية في اليابان. نشكر اوهارا وشركاه وهاياشي ماريكو لمساعدتهم في خلق هذا الفيلم.

بروتوكول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جهاز يستخدم لاختبار المتاهة بالإضافة إلى ارتفاع في تكوين أ + وتضم اثنين من الأسلحة المفتوحة (25 × 5 × 0.5 سم) عبر عن بعضها البعض وعمودي على ذراعين مغلق (25 × 5 × 16 سم) مع مركز منصة (5 × 5 × 0.5 سم). وبأذرع مفتوحة وصغيرة جدا (0.5 سم) الحائط لإنقاص عدد من التراجع ، في حين أن الأسلحة مغلقة لديها مرتفعة (16 سم) لإحاطة الجدار الذراع. جهاز كامل هو 50 سم فوق الأرض (أوهارا وشركاه ، طوكيو) ويوضع في خزان فارغ تعميما (100 سم القطر ، و 35 سم ، وتستخدم عادة لمتاهة موريس المائية المهمة) لحماية الفئران التي تقع أو محاولة الهرب أثناء التجربة. يتكون الجهاز من مواد بلاستيكية. منصة بيضاء وجدران شفافة. هناك اختلاف في المواد والألوان لجهاز من المتاهة زائد مرتفعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إيواء الفئران مع ضوء 12 ساعة / دورة الظلام (أضواء على الساعة 7:00 صباحا) ، كما هو موضح سابقا (تاكاو وMiyakawa ، 2006a). يتم إجراء اختبارات سلوكية 9:00 حتي 6:00. يتم نقل جميع فئران التجارب لاختبار سلوك 30 دقيقة الغرفة قبل بداية المحاكمة الأولى لروض إلى حالة من السلوك غرفة الاختبار. هو يوازن ترتيب المحاكمات عبر المورثات. هناك نوعان من أغراض المحاكمة اختبار باستخدام حيوان الممارسة. واحد هو التأكد من أن كل شيء على ما يرام مع نظام التسجيل. آخر هو الحفاظ على حالة اختبار متجانسة بقدر الإمكان. وهذا هو ، فإن الماوس الأولى في الدورة بأكملها تجربة حالة مختلفة نوعا ما مع الآخرين (أي ، لا ضجيج الذي أدلى به قبل عمليات الاختبار وأية رائحة العظة من التجارب السابقة) دون محاكمة مثل هذه الممارسة. تتم المحافظة على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة البحوث الحيوانية في جامعة كيوتو. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غرفة اختبار السلوك (170 × 210 × 200 سم ، أوهارا وشركاه ، طوكيو) وعازلة للصوت ، والحفاظ على مستوى الإضاءة في 100 لوكس. يتم وضع الماوس في منطقة وسط متاهة مع رئيسها توجه نحو الذراع مغلقة. يتم تسجيل مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة باستخدام كاميرا فيديو مثبتة في الكمبيوتر ، والتي يتم التحكم من قبل الجهاز البعيد. يتم تسجيل عدد من الإدخالات (يتم تعريف إدخال كمركز للكتلة الماوس يدخل الذراع) في كل ذراع ، والوقت الذي يقضيه في بأذرع مفتوحة وهذه القياسات تكون بمثابة مؤشر للقلق مثل السلوك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويسمح للفئران على التحرك بحرية عن متاهة لمدة 10 دقيقة. كل الماوس يتلقى تجربة واحدة في بطارية اختبار لدينا. ويستند التطبيق المستخدم للحصول على البيانات وتحليلها السلوكية (صورة EP) على برنامج J المجال العام الصور (التي وضعتها Rasband اين في المعهد الوطني للصحة العقلية والمتاحة في <a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/">http://rsb.info.nih.gov/ ط /</a> ) ، الذي عدل من قبل Miyakawa تسويوشي (المتاحة من خلال اوهارا وشركاه ، طوكيو ، اليابان). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المسافة المقطوعة ، وعدد من القيود في كل ذراع ، والوقت الذي يقضيه في كل ذراع ، ويتم حسابها في المئة من الإدخالات في أحضان فتح من قبل الجيش الشعبي صورة البرنامج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد كل محاكمة ، ويتم تنظيف جميع الأسلحة ومنطقة المركز مع الماء تحت الكلور السوبر ، التي هي عامل كفاءة إزالة الرائحة ، ورائحة ضعيفة نسبيا مقارنة نفسها إلى حلول تنظيف أخرى ، لمنع وجود تحيز على أساس العظة الشمية. وبالتالي يمكننا اجراء اختبارات تحت ظروف يسيطر بشأن العظة الشمية. </li></ol>

<ol>
	<li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light/dark+transition+test+for+mice.">Light/dark transition test for mice.</a> J Vis Exp. , (2006).</li><li>Aiba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+liaison+for+integrative+brain+research.">Mouse liaison for integrative brain research.</a> Neurosci Res. 58, 103-104 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+knockout+mouse+project.">The knockout mouse project.</a> Nat Genet. 36, 921-924 (2004).</li><li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders:+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice.">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann N Y Acad Sci. 1086, 144-159 (2006).</li><li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+brain-behavior+phenotyping+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders.">Impact of brain-behavior phenotyping of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci Res. 58, 124-1232 (2007).</li><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> What's Wrong With My Mouse? Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , 240 (2007).</li><li>Rodgers, R. J., Dalvi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anxiety,+defense+and+the+elevated+plus-maze.">Anxiety, defense and the elevated plus-maze.</a> Neurosci Behav Rev. 21, 801-810 (1997).</li><li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+'fear'-motivated+behaviour.">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 324, 1-5 (1984).</li><li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+open:closed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat.">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Meth. 14, 149-167 (1985).</li><li>File, S. E., Pellow, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+triazolobenzodiazepines+in+two+animal+tests+of+anxiety+and+in+the+holeboard.">The effects of triazolobenzodiazepines in two animal tests of anxiety and in the holeboard.</a> Br J Pharmac. 86, 729-7235 (1985).</li><li>Lister, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+a+plus-maze+to+measure+anxiety+in+the+mouse.">The use of a plus-maze to measure anxiety in the mouse.</a> Psychopharmacology. 92, 180-185 (1987).</li><li>Miyakawa, T., Yagi, T., Kagiyama, A., Niki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radial+maze+performance,+open-field+and+elevated+plus-maze+behaviors+in+Fyn-kinase+deficient+mice:+further+evidence+for+increased+fearfulness.">Radial maze performance, open-field and elevated plus-maze behaviors in Fyn-kinase deficient mice: further evidence for increased fearfulness.</a> Brain Res Mol Brain Res. 37, 145-150 (1996).</li><li>Manabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+cadherin-11+adhesion+receptor+enhances+plastic+changes+in+hippocampal+synapses+and+modifies+behavioral+responses.">Loss of cadherin-11 adhesion receptor enhances plastic changes in hippocampal synapses and modifies behavioral responses.</a> Mol Cell Neurosci. 15, 534-546 (2000).</li><li>Miyakawa, T., Yamada, M., Duttaroy, A., Wess, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivity+and+intact+hippocampus-dependent+learning+in+mice+lacking+the+M1+muscarinic+acetylcholine+receptor.">Hyperactivity and intact hippocampus-dependent learning in mice lacking the M1 muscarinic acetylcholine receptor.</a> J Neurosci. 21, 5239-5250 (2001).</li><li>Seeger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M2+muscarinic+acetylcholine+receptor+knockout+mice+show+deficits+in+behavioral+flexibility,+working+memory,+and+hippocampal+plasticity.">M2 muscarinic acetylcholine receptor knockout mice show deficits in behavioral flexibility, working memory, and hippocampal plasticity.</a> J Neurosci. 24, 10117-10127 (2004).</li><li>Morishima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+cocaine+responsiveness+and+impaired+motor+coordination+in+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+2+knockout+mice.">Enhanced cocaine responsiveness and impaired motor coordination in metabotropic glutamate receptor subtype 2 knockout mice.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 102, 4170 (2005).</li><li>Miyamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tight+junctions+in+Schwann+cells+of+peripheral+myelinated+axons:+a+lesson+from+claudin-19-deficient+mice.">Tight junctions in Schwann cells of peripheral myelinated axons: a lesson from claudin-19-deficient mice.</a> J Cell Biol. 169, 527-538 (2005).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NFAT+dysregulation+by+increased+dosage+of+DSCR1+and+DYRK1A+on+chromosome+21.">NFAT dysregulation by increased dosage of DSCR1 and DYRK1A on chromosome 21.</a> Nature. 441, 595-600 (2006).</li><li>Hattori, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enriched+environments+influence+depression-related+behavior+in+adult+mice+and+the+survival+of+newborn+cells+in+their+hippocampi.">Enriched environments influence depression-related behavior in adult mice and the survival of newborn cells in their hippocampi.</a> Behav Brain Res. 180, 69-76 (2007).</li><li>Niemann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+ablation+of+NMDA+receptor+subunit+NR3B+in+mouse+reveals+motoneuronal+and+non-motoneuronal+phenotypes.">Genetic ablation of NMDA receptor subunit NR3B in mouse reveals motoneuronal and non-motoneuronal phenotypes.</a> Europ J Neurosci. 26, 1407-1420 (2007).</li><li>Sano, H., Nagai, Y., Miyakawa, T., Shigemoto, R., Yokoi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+social+interaction+in+mice+deficient+of+the+striatal+medium+spiny+neuron-specific+phosphodiesterase+10A2.">Increased social interaction in mice deficient of the striatal medium spiny neuron-specific phosphodiesterase 10A2.</a> J Neurochem. 105, 546-556 (2008).</li><li>Horii, Y., Yamasaki, N., Miyakawa, T., Shiosaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+anxiety-like+behavior+in+neuropsin+(kallikrein-related+peptidase+8)+gene-deficient+mice.">Increased anxiety-like behavior in neuropsin (kallikrein-related peptidase 8) gene-deficient mice.</a> Behav Neurosci. 122, 498-504 (2008).</li><li>Fukuda, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+protocadherin-&#945;,+A+isoforms+in+mice+changes+contextual+fear+conditioning+and+spatial+working+memory.">Down-regulation of protocadherin-&#945;, A isoforms in mice changes contextual fear conditioning and spatial working memory.</a> Eur J Neurosci. , .</li><li>Ikeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+YWHAE,+a+gene+encoding+14-3-3epsilon,+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia.">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Behav Neurosci. , .</li><li>Korte, S. M., De Boer, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+animal+model+of+state+anxiety:+fear-potentiated+behaviour+in+the+elevated+plus-maze.">A robust animal model of state anxiety: fear-potentiated behaviour in the elevated plus-maze.</a> Eur J Phamacol. 463, 163-175 (2003).</li><li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety.">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54, 21-30 (1996).</li><li>Holmes, A., Parmigiani, S., Ferrari, P. F., Palanza, P., Rodgers, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+profile+of+wild+mice+in+the+elevated+plus-maze+test+for+anxiety.">Behavioral profile of wild mice in the elevated plus-maze test for anxiety.</a> Physiol Behav. 71, 509-516 (2000).</li><li>Tsujimura, A., Matsuki, M., Takao, K., Yamanishi, K., Miyakawa, T., Hashimoto-Gotoh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+lacking+the+kf-1+gene+exhibit+increased+anxiety-+but+not+despair-like+behavior.">Mice lacking the kf-1 gene exhibit increased anxiety- but not despair-like behavior.</a> Front. Behav. Neurosci. 10, (2008).</li><li>Nakajima, R., Takao, K., SM, H. u. a. n. g., Takano, J., Iwata, N., Miyakawa, T., Saido, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+Behavioral+Phenotyping+of+Calpastatin-Knockout+Mice.">Comprehensive Behavioral Phenotyping of Calpastatin-Knockout Mice.</a> Molecular Brain. , .</li><li>Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+calcineurin+knockout+mice+exhibit+multiple+abnormal+behaviors+related+to+schizophrenia.">Conditional calcineurin knockout mice exhibit multiple abnormal behaviors related to schizophrenia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 8987-8992 (2003).</li><li>Yamasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factor+analyses+of+large-scale+data+justify+the+behavioral+test+battery+strategy+to+reveal+the+functional+significances+of+the+genes+expressed+in+the+brain.">Factor analyses of large-scale data justify the behavioral test battery strategy to reveal the functional significances of the genes expressed in the brain.</a> , (1985).</li><li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Scienc. 284, 1670-1672 (1999).</li></ol>

وقد وافق جميع الإجراءات المتبعة في استخدام الحيوان والعناية اللجنة من جامعة كيوتو.

على الرغم من تسلسل جينوم الفأر ، ليست معروفة وظائف أكثر من الجينات. تقنيات التعديل الوراثي تسمح للحذف أو التلاعب غيرها من جين معين في الفئران (أوستن وآخرون ، 2004 ؛. أيبا وآخرون ، 2007). ويمكن بعد ذلك من تأثير جين معين على سلوك معين يتم تحديدها عن طريق إجراء التحاليل السلوكية للفئرانا معدلة وراثيا (تاكاو وMiyakawa ، 2006b ؛ تاكاو وآخرون ، 2007). وبالاضافة الى ارتفاع اختبار المتاهة هي واحدة من التجارب الأكثر شعبية من جميع النماذج الحيوانية المتوافرة حاليا من القلق (رودجرز وDalvi ، 1997 ؛ كراولي ، 2007). وقد استخدم هذا الاختبار للقلق مثل السلوك للفحص وphenotyping المعدلة وراثيا والفئران خروج المغلوب (كراولي ، 1999) واكتشاف المخدرات (هوغ وآخرون 1996 ؛. كراولي ، 2007). وارتقى اختبار المتاهة زائد لديها صلاحية قوية التنبؤية لفحص المخدرات مزيل القلق (رودجرز وDalvi ، 1997 ؛ Mechiel Korte ودي بوير ، 2003 ؛ كراولي ، 2007) ؛ المخدرات زيادة مزيل القلق على وجه التحديد ، والمخدرات anxiogenic الانخفاض على وجه التحديد ، وعدد من القيود في قضى بأذرع مفتوحة والوقت هناك. وتعتبر النتيجة مداخل الكلية والمسافة الإجمالية فهرس مفيدة من النشاط العام. مجموع الإدخالات النتيجة هي أيضا مؤشر للقلق ، والنسب المئوية للمداخل والوقت الذي يقضيه في كل ذراع تشكل مؤشر القلق الأساسي (رودجرز وDalvi ، 1997 ، Mechiel Korte ودي بوير ، 2003). تعتبر الأسلحة المفتوحة والمغلقة لاستحضار نفس محرك الأقراص استكشافية ، لذلك يعتبر التهرب من بأذرع مفتوحة لتكون نتيجة لتحريض مستويات أعلى من الخوف (رودجرز وDalvi ، 1997). ويعتقد أن النفور من الفئران لاستكشاف بأذرع مفتوحة من المتاهة سببه الخوف من الأماكن المفتوحة ومرتفعة. في عام 1984 ، وذكرت هاندلي Mithani على الأعمال الأولية مع اختبار المتاهة X مرتفعة (زائد) المذكورة أعلاه. تم رفع جهاز الاختبار الأصلي 70 سم فوق الأرض ، واشتملت على المغلقة والمفتوحة ذراعين ، ولكل منها قياس 45 سم طولا و 10 سم واسعة. في الدراسات الأولية ، وذكرت أنها نسبة الإدخالات ذراع فتح / مجموع (هاندلي وMithani ، 1984). بعد ذلك ، تم تطوير المؤشرات الأخرى التي شملت عددا من القيود في أحضان المغلقة والمفتوحة والوقت الذي يقضيه في الأسلحة المغلقة والمفتوحة للفئران (Pellow وآخرون ، 1985 ؛ Pellow والملفات ، 1986) والفئران (ليستر ، 1987) . وشملت التغييرات لاختبار المتاهة مرتفعة بالإضافة إلى إطالة الأسلحة على حد سواء فتح (50 × 10 سم) والأسلحة مغلق (50 × 10 × 40 سم) مع طول الجدران المحيطة بها ومفتوحة على سقف الأسلحة مغلقة ، وارتقى كامل المتاهة حتى ارتفاع 50 سم (Pellow وآخرون ، 1985 ؛ Pellow والملفات ، 1986). في الوقت الحاضر ، لدينا في المختبر ، يتم تكوين اختبار المتاهة مرتفعة بالإضافة إلى جهاز في شكل + ، مع اثنين من الأسلحة فتح (25 × 5 سم ، مع طفيف جدا ، و 0.5 سم ، والجدار) عبر عن بعضها البعض وعمودي لاثنين يتم رفع السلاح مغلق (25 × 5 × 16 سم) ، و 50 سم فوق الأرض (Miyakawa وآخرون ، 1996 ؛ Manabe وآخرون ، 2000 ؛ Miyakawa وآخرون ، 2001 ؛ Seeger وآخرون ، 2004 ؛ موريشيما وآخرون ، 2005 ؛ مياموتو وآخرون ، 2005 ؛ سهم وآخرون ، 2006 ؛ هاتوري وآخرون ، 2007 ؛ نيمان وآخرون ، 2007 ؛ سانو وآخرون ، 2008 ؛ Horii وآخرون ، 2008 ؛ فوكودا وآخرون ، 2008 ؛ ايكيدا وآخرون ؛ 2008). يتم وضع الماوس في وسط + (5 سم × 5 سم) ، ويسمح لاستكشاف متاهة بحرية. على الرغم من تسجيل 5 دقائق هو شائع ، يتم تسجيل السلوك لمدة 10 دقيقة في بروتوكول لدينا الفرصة لزيادة الكشف عن النمط الظاهري. الأسلحة المفتوحة والمغلقة مرتفعة لحث نزاع الاستكشاف (Mechiel Korte ودي بوير ، 2003 ؛ كراولي ، 2007). وسجلت تدابير للاختبار المتاهة زائد مرتفعة بمراقب أثناء التجربة. في المختبر لدينا ، يتم تسجيل الاختبار مع كاميرا فيديو متصلة بجهاز كمبيوتر والبيانات السلوكية (صورة EP) والمكتسبة وتحليلها باستخدام برنامج EP صورة. عدد الإدخالات على السلاح مقابل فتح عدد الإدخالات الذراع الإجمالي ، والوقت الذي أنفق على التسلح في مقابل فتح الأسلحة المغلقة ، وتوفير التدابير من القلق مثل السلوك. قمنا بتقييم أكثر من 90 سلالات من الفئران المعدلة وراثيا الطافرة باستخدام بروتوكول يظهر في الفيلم وجود مجموعة كبيرة من البيانات الخام لأكثر من 5000 الفئران (بما في ذلك نوع البرية وفئرانا معدلة وراثيا). في بطارية اختبار لدينا ، وتستخدم عادة من النوع البري تتزاحم كمجموعة تحكم. كما سلالة الخلفية ، وتستخدم على نطاق واسع C57BL/6J الفئران. جمعنا البيانات من الفئران C57BL/6J في الاختبارات السلوكية. القيم التي تم الحصول عليها من خلال موقعنا الفئران C57BL/6J مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة هي كما يلي (ن = 914 ؛ يعني SEM) ، وسافر المسافة الإجمالية : 1547.55 14.27 سم ، مدة من الوقت الذي يقضيه : 56.49 2.42 ثانية (فتح الأسلحة) ، ق 384.02 3.13 (الأسلحة المغلقة) ، 161.90 2.17 ثانية (وسط المتاهة) ؛ قضى نسبة من الوقت في بأذرع مفتوحة : 9.19 0.36 ٪ ، ونسبة الوقت الذي يقضيه في أحضان مغلق : 63.82 0.52 ٪ ، وعدد الإدخالات : 7.64 0.21 (مفتوحة الذراعين) ، 24.32 0.28 (الأسلحة المغلقة) ؛ ذراع فتح مداخل ٪ : 21.9 0.05 ٪ مغلقا الأسلحة مقالات : 78.1 0.05. الفئران C57BL/6J يمضون وقتا أقل في فتح من الأسلحة بالأسلحة مغلق (P &lt;0.0001 ، ن = 914 ، مقترنة - T Tبتوقيت شرق الولايات المتحدة). هذا يشير إلى أن الفئران C57BL/6J تميل لتجنب بأذرع مفتوحة ، وبأن الوقت الذي يقضيه في أحضان فتح هو مؤشر صالحة للقلق مثل السلوك. بالإضافة إلى ذلك ، يوازن ترتيب المحاكمات عبر المورثات ، وذلك لأن عدد المحاكمة يؤثر على الوقت الذي يقضيه في بأذرع مفتوحة ومنصة المركز. هذا هو ، وجميع المؤشرات الزيادة خلال الفئران 3 4 وبالمقارنة مع الفئران 1 (ع = 0.0089 ، ن = 476) (بيانات غير منشورة). مع بروتوكول لدينا ، وأظهر تحليل أكثر من 1661 الفئران أن ترتيب تسلسلي للفئران اختبار في قفص لا تؤثر تأثيرا كبيرا على البقاء مفتوحة ذراع الزمن (بيانات غير منشورة). هذا هو ، وأداء الفئران الأولى التي اتخذت من قفص لا تختلف كثيرا عن تلك التي من الثانية ، والثالثة أو الفئران الماضي. على الرغم من ارتفاع اختبار المتاهة زائد واختبار الانتقال الضوء / الظلام على حد سواء المستخدمة لتقييم القلق مثل السلوك ، فإن النتائج ليست متسقة دائما بينهما (هولمز وآخرون ، 2000 ؛ Tujimura وآخرون ، 2008 ؛ ناكاجيما وآخرون ، في الصحافة ) على سبيل المثال ، الدماغ الأمامي محددة الكالسينيورين (calcineurin) ، خروج المغلوب الفئران انخفض انفاق مبلغ من الوقت في الغرفة ضوء في اختبار الانتقال الضوء / الظلام ، ولكن زيادة كمية من الوقت في بأذرع مفتوحة في اختبار المتاهة زائد مرتفعة (Miyakawa وآخرون. ، 2003). تحليل عوامل سلوكية اختبار بطارية لدينا تشير إلى أن ارتفاع اختبار المتاهة زائد واختبار الانتقال الضوء / الظلام تقييم جوانب مختلفة من القلق مثل السلوك ، مثل مشرق مساحة القلق في اختبار الانتقال الضوء / الظلام وفتح المجال للقلق شبيهة السلوك في الاختبار الميداني المفتوحة (تاكاو وMiyakawa ، 2006b ؛ ياماساكي وآخرون ، 2006). تبعا لذلك ، يتم تضمين كل من اختبار الانتقال الضوء / الظلام وارتفاع زائد في متاهة اختبار بطارية اختبار لدينا السلوكية. وذكرت كراب وزملاؤه ان المتغيرات غير المتحكم فيها والتجارب التي تميز المسوخ قد تسفر عن نتائج محددة إلى مختبر خاص (كراب وآخرون ، 1999). الاختلافات الإجرائية التي توجد بين مختبرات تجعل من الصعب تكرار أو مقارنة النتائج فيما بينها. ووضع وثائق بصرية للبروتوكول تعزيز فهم أفضل للإجراءات التجريبية ، والسماح لتوحيد البروتوكولات المستخدمة في المختبرات وإجراء مقارنات من الظواهر السلوكية للسلالات مختلفة من الفئران الطافرة المقررة باستخدام هذه الاختبارات. نشرنا سابقا بروتوكولا للاختبار الفيلم انتقال الضوء / الظلام (تاكاو وMiyakawa ، 2006a). وبالمثل ، وأفلام من البروتوكولات الأخرى ، مثل لاختبار حقل مفتوح ، واضطر porsolt اختبار السباحة ، ويتم حاليا اختبارات تكييف الخوف التي نستخدمها في بطارية اختبار لدينا السلوكية التي تبذل من أجل نشر في مجلة المستقبل مقالات الفيديو.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Elevated plus maze</td>
<td>Tool</td>
<td>O&#x2019;hara & Co.</td>
<td>(none)</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

elevated plus maze for mice

على الرغم من الآن جينوم الفأر متسلسلة تماما ، ليست معروفة لمعظم وظائف الجينات التي أعرب عنها في الدماغ. يمكن تحديد تأثير الجين على سلوك معين محدد عن طريق التحليل السلوكي للفئرانا معدلة وراثيا. إذا كان يتم التعبير عن الجينات المستهدفة في المخ ، يمكن أن النمط الظاهري السلوكية للفئرانا معدلة وراثيا توضيح الآلية الوراثية من السلوكيات المعتادة. وبالاضافة الى ارتفاع اختبار المتاهة هي واحدة من أكثر الاختبارات المستخدمة على نطاق واسع لقياس القلق مثل السلوك. ويستند الاختبار على النفور من الفئران الطبيعية للمناطق مفتوحة ومرتفعة ، فضلا عن سلوكهم الطبيعي استكشافية عفوية في بيئات جديدة. ويتألف الجهاز من الأسلحة وفتح الأسلحة المغلقة ، عبرت في منتصف عموديا مع بعضها البعض ، ومنطقة المركز. تعطى الفئران الوصول إلى جميع الأسلحة ويسمح لهم بالتنقل بحرية فيما بينها. يتم استخدام عدد الإدخالات في أحضان فتح ، والوقت الذي يقضيه في بأذرع مفتوحة ومؤشرات القلق الناجم عن مساحة مفتوحة في الفئران. لسوء الحظ ، فإن الاختلافات الإجرائية التي توجد بين مختبرات تجعل من الصعب مقارنة النتائج ومكررة بين المختبرات. هنا ، نقدم فيلم مفصلة تثبت لدينا بروتوكول للاختبار المتاهة زائد مرتفعة. في المختبر لدينا ، وقد قمنا بتقييم أكثر من 90 سلالات من الفئران الطافرة باستخدام بروتوكول يظهر في الفيلم. وسيتم الكشف عن هذه البيانات باعتبارها جزءا من قاعدة بيانات عامة أن نقوم ببناء الآن. والتصور للبروتوكول تعزيز فهم أفضل لتفاصيل الإجراء التجريبي كامل ، والسماح لتوحيد البروتوكولات المستخدمة في المختبرات المختلفة ومقارنات بين الظواهر السلوكية للسلالات مختلفة من الفئران الطافرة المقررة باستخدام هذا الاختبار.

Watch this Scientific Journal Video about Elevated Plus Maze for Mice at JoVE.com

Elevated Plus Maze for Mice

وبالاضافة الى ارتفاع اختبار المتاهة هي واحدة من أكثر الاختبارات المستخدمة على نطاق واسع لقياس القلق تشبه السلوك في الفئران. هنا ، نقدم فيلما يظهر الإجراءات التفصيلية لإجراء الاختبار.

زائد المتاهة مرتفعة على الفئران

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given ...

Research

JoVE Journal

Biology

89.3K Views.  Graduate School of Medicine, Kyoto University. وبالاضافة الى ارتفاع اختبار المتاهة هي واحدة من أكثر الاختبارات المستخدمة على نطاق واسع لقياس القلق تشبه السلوك في الفئران. هنا ، نقدم فيلما يظهر الإجراءات التفصيلية لإجراء الاختبار.

Video: Elevated Plus Maze for Mice

Light/dark Transition Test for Mice

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, however, can be used to delete or manipulate a specific gene in mice. The influence of a given gene on a specific behavior can then be determined by conducting behavioral analyses of the mutant mice. As a test for behavioral phenotyping of mutant mice, the light/dark transition test is one of the most widely used tests to measure anxiety-like behavior in mice. The test is based on the natural aversion of mice to brightly illuminated areas and on their spontaneous exploratory behavior in novel environments. The test is sensitive to anxiolytic drug treatment. The apparatus consists of a dark chamber and a brightly illuminated chamber. Mice are allowed to move freely between the two chambers. The number of entries into the bright chamber and the duration of time spent there are indices of bright-space anxiety in mice. To obtain phenotyping results of a strain of mutant mice that can be readily reproduced and compared with those of other mutants, the behavioral test methods should be as identical as possible between laboratories. The procedural differences that exist between laboratories, however, make it difficult to replicate or compare the results among laboratories. Here, we present our protocol for the light/dark transition test as a movie so that the details of the protocol can be demonstrated. In our laboratory, we have assessed more than 60 strains of mutant mice using the protocol shown in the movie. Those data will be disclosed as a part of a public database that we are now constructing.

Visualization of the protocol will facilitate understanding of the details of the entire experimental procedure, allowing for standardization of the protocols used across laboratories and comparisons of the behavioral phenotypes of various strains of mutant mice assessed using this test.

The light/dark transition test is one of the most widely used tests to measure anxiety-like behavior in mice. Here, we present a movie that shows detailed procedures on how we conduct the test.

الضوء / الظلام لاختبار الانتقال الفئران

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Morris Water Maze Experiment

The Morris water maze is widely used to study spatial memory and learning. Animals are placed in a pool of water that is colored opaque with powdered non-fat milk or non-toxic tempera paint, where they must swim to a hidden escape platform. Because they are in opaque water, the animals cannot see the platform, and cannot rely on scent to find the escape route. Instead, they must rely on external/extra-maze cues. As the animals become more familiar with the task, they are able to find the platform more quickly. Developed by Richard G. Morris in 1984, this paradigm has become one of the "gold standards" of behavioral neuroscience.

The Morris water maze is a well-accepted tool used to document the involvement of the hippocampus in a behavioral task.

موريس تجربة المتاهة المائية

The Morris water maze is widely used to study spatial memory and learning. Animals are placed in a pool of water that is colored opaque with powdered ...

Polymerase Chain Reaction: Basic Protocol Plus Troubleshooting and Optimization Strategies

In the biological sciences there have been technological advances that catapult the discipline into golden ages of discovery. For example, the field of microbiology was transformed with the advent of Anton van Leeuwenhoek&#39;s microscope, which allowed scientists to visualize prokaryotes for the first time. The development of the polymerase chain reaction (PCR) is one of those innovations that changed the course of molecular science with its impact spanning countless subdisciplines in biology. The theoretical process was outlined by Keppe and coworkers in 1971; however, it was another 14 years until the complete PCR procedure was described and experimentally applied by Kary Mullis while at Cetus Corporation in 1985. Automation and refinement of this technique progressed with the introduction of a thermal stable DNA polymerase from the bacterium Thermus aquaticus, consequently the name Taq DNA polymerase.
PCR is a powerful amplification technique that can generate an ample supply of a specific segment of DNA (i.e., an amplicon) from only a small amount of starting material (i.e., DNA template or target sequence). While straightforward and generally trouble-free, there are pitfalls that complicate the reaction producing spurious results. When PCR fails it can lead to many non-specific DNA products of varying sizes that appear as a ladder or smear of bands on agarose gels. Sometimes no products form at all. Another potential problem occurs when mutations are unintentionally introduced in the amplicons, resulting in a heterogeneous population of PCR products. PCR failures can become frustrating unless patience and careful troubleshooting are employed to sort out and solve the problem(s). This protocol outlines the basic principles of PCR, provides a methodology that will result in amplification of most target sequences, and presents strategies for optimizing a reaction. By following this PCR guide, students should be able to: 
 
&#9679; Set up reactions and thermal cycling conditions for a conventional PCR experiment 
&#9679; Understand the function of various reaction components and their overall effect on a PCR experiment 
&#9679; Design and optimize a PCR experiment for any DNA template 
&#9679; Troubleshoot failed PCR experiments

PCR has emerged as a common technique in many molecular biology laboratories. Provided here is a quick guide to several conventional PCR protocols. Because each reaction is a unique experiment, optimal conditions required to generate a product vary. Understanding the variables in a reaction will greatly enhance troubleshooting efficiency, thereby increasing the chance to obtain the desired result.

تفاعل البلمرة سلسلة: البروتوكول الأساسي زائد استراتيجيات حل المشكلات والتحسين

In the biological sciences there have been technological advances that catapult the discipline into golden ages of discovery. For example, the field of ...

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Milk Collection Methods for Mice and Reeves&#039; Muntjac Deer

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

طرق جمع الحليب لالفئران وريفز &#39;Muntjac الغزلان

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

Intravenous Injections in Neonatal Mice

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are technically feasible and routine. However, some mouse models can have early onset of disease with a rapid progression that makes administration of potential therapies difficult. The temporal (or facial) vein is just anterior to the ear bud in mice and is clearly visible for the first two days after birth on either side of the head using a dissecting microscope. During this window, the temporal vein can be injected with volumes up to 50 &#956;l. The injection is safe and well tolerated by both the pups and the dams. A typical injection procedure is completed within 1-2 min, after which the pup is returned to the home cage. By the third postnatal day the vein is difficult to visualize and the injection procedure becomes technically unreliable. This technique has been used for delivery of adeno-associated virus (AAV) vectors, which in turn can provide almost body-wide, stable transgene expression for the life of the animal depending on the viral serotype chosen.

Animal models of pediatric disease can experience early onset and aggressive disease progression. Clinically relevant therapy delivery to young mouse models can be technically difficult. This protocol describes a non-invasive intravenous injection method for newborn mice within the first two postnatal days of life.

الحقن في الوريد في الفئران حديثي الولادة

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are ...

Subcloning Plus Insertion (SPI) - A Novel Recombineering Method for the Rapid Construction of Gene Targeting Vectors

Gene targeting refers to the precise modification of a genetic locus using homologous recombination. The generation of novel cell lines and transgenic mouse models using this method necessitates the construction of a &#8216;targeting&#8217; vector, which contains homologous DNA sequences to the target gene, and has for many years been a limiting step in the process. Vector construction can be performed in vivo in Escherichia coli cells using homologous recombination mediated by phage recombinases using a technique termed recombineering. Recombineering is the preferred technique to subclone the long homology sequences (>4kb) and various targeting elements including selection markers that are required to mediate efficient allelic exchange between a targeting vector and its cognate genomic locus. Typical recombineering protocols follow an iterative scheme of step-wise integration of the targeting elements and require intermediate purification and transformation steps. Here, we present a novel recombineering methodology of vector assembly using a multiplex approach. Plasmid gap repair is performed by the simultaneous capture of genomic sequence from mouse Bacterial Artificial Chromosome libraries and the insertion of dual bacterial and mammalian selection markers. This subcloning plus insertion method is highly efficient and yields a majority of correct recombinants. We present data for the construction of different types of conditional gene knockout, or knock-in, vectors and BAC reporter vectors that have been constructed using this method. SPI vector construction greatly extends the repertoire of the recombineering toolbox and provides a simple, rapid and cost-effective method of constructing these highly complex vectors.

Subcloning Plus Insertion SPI - A Novel Recombineering Method for the Rapid Construction of Gene Targeting Vectors

Gene targeting methodologies can be used to generate transgenic mice with knockout, knock-in and tagged alleles. Here, we describe an improved method of recombineering in E. coli, that we term &#8216;subcloning plus insertion&#8217;, which can be used to generate custom gene targeting vectors rapidly.

استنساخ فرعي زائد الإدراج (SPI) - رواية الطريقة Recombineering عن البناء السريع للجين استهداف ناقلات

Gene targeting refers to the precise modification of a genetic locus using homologous recombination. The generation of novel cell lines and transgenic ...

A Strategy to Validate the Role of Callose-mediated Plasmodesmal Gating in the Tropic Response

The plant hormone auxin plays an important role in many growth and developmental processes, including tropic responses to light and gravity. The establishment of an auxin gradient is a key event leading to phototropism and gravitropism. Previously, polar auxin transport (PAT) was shown to establish an auxin gradient in different cellular domains of plants. However, Han et al. recently demonstrated that for proper auxin gradient formation, plasmodesmal callose-mediated symplasmic connectivity between the adjacent cells is also a critical factor. In this manuscript, the strategy to elucidate the role of particular genes, which can affect phototropism and gravitropism by altering the symplasmic connectivity through modulating plasmodesmal callose synthesis, is discussed. The first step is to screen aberrant tropic responses from 3-day-old etiolated seedlings of mutants or over-expression lines of a gene along with the wild type. This preliminary screening can lead to the identification of a range of genes functioning in PAT or controlling symplasmic connectivity. The second screening involves the sorting of candidates that show altered tropic responses by affecting symplasmic connectivity. To address such candidates, the movement of a symplasmic tracer and the deposition of plasmodesmal callose were examined. This strategy would be useful to explore new candidate genes that can regulate symplasmic connectivity directly or indirectly during tropic responses and other developmental processes.

This article describes the methods for screening the genes controlling plasmodesmal permeability and hence auxin gradient during tropic response. This includes the measurement of the degree of tropic response in hypocotyl of Arabidopsis thaliana and checking plasmodesmal permeability by 8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid (HPTS) loading and finally callose level assessment.

استراتيجية للتحقق من دور بوساطة Callose Plasmodesmal المحاصرة في الاستجابة مدار

The plant hormone auxin plays an important role in many growth and developmental processes, including tropic responses to light and gravity. The ...

Nasal Potential Difference to Quantify Trans-epithelial Ion Transport in Mice

The nasal potential difference test has been used for almost three decades to assist in the diagnosis of cystic fibrosis (CF). It has proven to be helpful in cases of attenuated, oligo- or mono-symptomatic forms of CF usually diagnosed later in life, and of CF-related disorders such as congenital bilateral absence of vas deferens, idiopathic chronic pancreatitis, allergic bronchopulmonary aspergillosis, and bronchiectasis. In both clinical and preclinical settings, the test has been used as a biomarker to quantify responses to targeted therapeutic strategies for CF. Adapting the test to a mouse is challenging and can entail an associated mortality. This paper describes the adequate depth of anesthesia required to maintain a nasal catheter in situ for continuous perfusion. It lists measures to avoid broncho-aspiration of solutions perfused in the nose. It also describes the animal care at the end of the test, including administration of a combination of antidotes of the anesthetic drugs, leading to rapidly reversing the anesthesia with full recovery of the animals. Representative data obtained from a CF and a wild-type mouse show that the test discriminates between CF and non-CF. Altogether, the protocol described here allows reliable measurements of the functional status of trans-epithelial chloride and sodium transporters in spontaneously breathing mice, as well as multiple tests in the same animal while reducing test-related mortality.

Here, we present a protocol to measure nasal potential difference in mice. The test quantifies the function of transmembrane ion transporters such as the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator and the epithelial sodium channel. It is valuable to evaluate the efficacy of novel therapies for cystic fibrosis.

الآنف الفرق المحتملة التحديد الكمي للنقل عبر الظهارية أيون في الفئران

The nasal potential difference test has been used for almost three decades to assist in the diagnosis of cystic fibrosis (CF). It has proven to be helpful ...

An Antegrade Perfusion Method for Cardiomyocyte Isolation from Mice

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating cardiomyocytes from rabbits, guinea pigs or rats has been performed via retrograde perfusion of the heart with enzymes using a Langendorff apparatus. However, a high degree of skill is required when this method is used with a small mouse heart. An antegrade perfusion method that does not use a Langendorff apparatus was recently reported for the isolation of mouse cardiomyocytes. We herein report a complete protocol for the improved antegrade perfusion of the excised heart to isolate individual heart cells from adult mice (8 - 108 weeks old). Antegrade perfusion is performed by injecting perfusate near the apex of the left ventricle of the excised heart, the aorta of which was clamped, using an infusion pump. All procedures are carried out on a pre-warmed heater mat under a microscope, which allows for the injection and perfusion processes to be monitored. The results suggest that ventricular and atrial myocytes, and fibroblasts can be well isolated from a single adult mouse simultaneously.

We developed a simple method for isolating high quality individual mouse heart cells by the antegrade perfusion technique. This method is Langendorff-free and useful for isolating ventricular and atrial myocytes or interstitial cells, such as cardiac fibroblasts or progenitors.

طريقة ال perfusion أنتيغراد لعزل القلب من الفئران

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating ...

Terminal H-reflex Measurements in Mice

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits after injuries such as spinal cord damage or stroke. An increase of the H-reflex response, together with symptoms like non-voluntary muscle contractions, pathologically augmented stretch reflex, and hypertonia in the corresponding muscle, is an indicator of post-stroke spasticity (PSS).
In contrast to rather nerve-unspecific transcutaneous measurements, here, we present a protocol to quantify the H-reflex directly at the ulnar and median nerves of the forepaw, which is applicable, with minor modifications, to the tibial and sciatic nerve of the hindpaw. Based on the direct stimulation and the adaptation to different nerves, the method represents a reliable and versatile tool to validate electrophysiological changes in spasticity-related disease models.

The clinical evaluation of spasticity based on the Hoffmann reflex (H-reflex) and using electrical stimulation of peripheral nerves is an established method. Here, we provide a protocol for a terminal and direct nerve stimulation for H-reflex quantification in the mouse forepaw.

قياسات منعكس H الطرفي في الفئران

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits ...