מחקר זה נתמך על ידי מענקים-in-Aid למחקר מדעי של האגודה יפן לקידום המדע (JSPs), גרנט-in-Aid ממשרד החינוך, התרבות, הספורט, המדע והטכנולוגיה ביפן, מענקים ב- סיוע מן הציפור CREST של יפן המדע והטכנולוגיה הסוכנות, גרנט-in-Aid מ Neuroinformatics יפן מרכז (NIJC), RIKEN ועל ידי סיוע גרנט-in-למחקר מדעי על תחומי מחקר אינטגרטיבית-Brain עדיפות (Shien) - החל ב MEXT יפן. אנו מודים אוהרה ושות&#39; מריקו הייאשי עזרתם ביצירת הסרט הזה.

פרוטוקול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המנגנון המשמש מבחן מבוך גבוהות בתוספת היא בתצורה של + וכולל שתי זרועות פתוחות (25 x 5 x 0.5 ס&quot;מ) זה מול זה ו בניצב שתי זרועות סגור (25 x 5 x 16 ס&quot;מ) עם מרכז פלטפורמה (5 x 5 x 0.5 ס&quot;מ). בזרועות פתוחות יש קטן מאוד (0.5 ס&quot;מ) לקיר כדי להקטין את מספר נפילות, בעוד הזרועות סגור יש קיר גבוה (16 ס&quot;מ) כדי להקיף את הזרוע. המנגנון כולו הוא 50 ס&quot;מ מעל הרצפה (אוהרה ושות&#39;, טוקיו) ממוקם מיכל עגול ריק (100 ס&quot;מ קוטר, 35 ס&quot;מ, המשמש בדרך כלל את המשימה מבוך המים מוריס) כדי להגן על עכברים או ליפול ניסיון להימלט במהלך הניסוי. מנגנון מורכב של חומרים פלסטיים. המצע הוא לבן והקירות שקופים. קיימת שונות חומרים וצבעים של מנגנון המבוך פלוס גבוהות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם שוכנו עם אור 12-h / מחזור כהה (אורות בשעה 07:00), כפי שתואר לעיל (טאקאו &amp; Miyakawa, 2006a). הבדיקה מבוצעת ההתנהגות 9:00-18:00. כל עכברי הניסוי מועברים לבדיקת התנהגות 30 דקות בחדר לפני תחילת המשפט הראשון להרגיל למצב של החדר בדיקות התנהגות. הצו של ניסויים היא counterbalanced ברחבי גנוטיפים. ישנן שתי מטרות המשפט לבחון באמצעות בעלי חיים בפועל. האחת היא כדי לוודא שהכל בסדר עם מערכת הקלטה. נוספת היא להשאיר את המצב כמו בדיקה אחידה ככל האפשר. כלומר, את העכבר הראשון במפגש כולו היה חוויה מצב שונה במקצת עם אחרים (כלומר, אין רעשים לפני שנעשו על ידי פעולות בדיקה ואין רמזים ריח ממחקרים קודמים) ללא משפט כזה בפועל. בעלי חיים מתוחזקים על פי הנחיות ועדת בעלי חיים למחקר מאוניברסיטת קיוטו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדיקות בחדר התנהגות (170 x 210 x 200 ס&quot;מ, אוהרה ושות&#39;, טוקיו) היא לרעש ורמת תאורה נשמר 100 לוקס. העכבר ממוקם באזור המרכז של המבוך עם ראשו מופנה כלפי הזרוע סגור. הבדיקה גבוהות מבוך פלוס מוקלט באמצעות מצלמת וידאו המחוברת למחשב, אשר נשלטת על ידי התקן מרוחק. מספר הערכים (ערך מוגדר מרכז המסה של העכבר נכנס הזרוע) לתוך כל זרוע ואת משך הזמן בזרועות פתוחות נרשמות מדידות אלה משמשים כמדד להתנהגות חרדה וכדומה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים רשאים לנוע בחופשיות על המבוך של 10 דקות. העכבר מקבל משפט אחד של הסוללה הבדיקה שלנו. היישום משמש עבור רכישת וניתוח נתונים התנהגותיים (תמונה EP) מבוססת על תוכנית J הציבור תמונה תחום (שפותחה על ידי ויין Rasband במכון הלאומי לבריאות הנפש וזמין בכל <a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/">http://rsb.info.nih.gov/ ij /</a> ), אשר שונה על ידי Tsuyoshi Miyakawa (זמין באמצעות אוהרה ושות&#39;, טוקיו, יפן). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המרחק נסע, מספר כניסות לתוך כל זרוע, הזמן המושקע בכל זרוע, ועל אחוז כניסות לזרועות לפתוח מחושבים על ידי התוכנית EP תמונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי כל משפט, כל הזרועות ואזור מרכז מנקים עם מים hypochlorous סופר, כי הוא סוכן יעיל להסרת ריח ויש לו ריח חלש יחסית של עצמו לעומת פתרונות ניקוי אחרים, כדי למנוע הטיה על בסיס רמזים חוש הריח. כך אנו יכולים לנהל את הבדיקות בתנאים מבוקרים רמזים לגבי הריח. </li></ol>

<ol>
	<li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light/dark+transition+test+for+mice.">Light/dark transition test for mice.</a> J Vis Exp. , (2006).</li><li>Aiba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+liaison+for+integrative+brain+research.">Mouse liaison for integrative brain research.</a> Neurosci Res. 58, 103-104 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+knockout+mouse+project.">The knockout mouse project.</a> Nat Genet. 36, 921-924 (2004).</li><li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders:+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice.">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann N Y Acad Sci. 1086, 144-159 (2006).</li><li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+brain-behavior+phenotyping+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders.">Impact of brain-behavior phenotyping of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci Res. 58, 124-1232 (2007).</li><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> What's Wrong With My Mouse? Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , 240 (2007).</li><li>Rodgers, R. J., Dalvi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anxiety,+defense+and+the+elevated+plus-maze.">Anxiety, defense and the elevated plus-maze.</a> Neurosci Behav Rev. 21, 801-810 (1997).</li><li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+'fear'-motivated+behaviour.">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 324, 1-5 (1984).</li><li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+open:closed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat.">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Meth. 14, 149-167 (1985).</li><li>File, S. E., Pellow, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+triazolobenzodiazepines+in+two+animal+tests+of+anxiety+and+in+the+holeboard.">The effects of triazolobenzodiazepines in two animal tests of anxiety and in the holeboard.</a> Br J Pharmac. 86, 729-7235 (1985).</li><li>Lister, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+a+plus-maze+to+measure+anxiety+in+the+mouse.">The use of a plus-maze to measure anxiety in the mouse.</a> Psychopharmacology. 92, 180-185 (1987).</li><li>Miyakawa, T., Yagi, T., Kagiyama, A., Niki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radial+maze+performance,+open-field+and+elevated+plus-maze+behaviors+in+Fyn-kinase+deficient+mice:+further+evidence+for+increased+fearfulness.">Radial maze performance, open-field and elevated plus-maze behaviors in Fyn-kinase deficient mice: further evidence for increased fearfulness.</a> Brain Res Mol Brain Res. 37, 145-150 (1996).</li><li>Manabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+cadherin-11+adhesion+receptor+enhances+plastic+changes+in+hippocampal+synapses+and+modifies+behavioral+responses.">Loss of cadherin-11 adhesion receptor enhances plastic changes in hippocampal synapses and modifies behavioral responses.</a> Mol Cell Neurosci. 15, 534-546 (2000).</li><li>Miyakawa, T., Yamada, M., Duttaroy, A., Wess, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivity+and+intact+hippocampus-dependent+learning+in+mice+lacking+the+M1+muscarinic+acetylcholine+receptor.">Hyperactivity and intact hippocampus-dependent learning in mice lacking the M1 muscarinic acetylcholine receptor.</a> J Neurosci. 21, 5239-5250 (2001).</li><li>Seeger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M2+muscarinic+acetylcholine+receptor+knockout+mice+show+deficits+in+behavioral+flexibility,+working+memory,+and+hippocampal+plasticity.">M2 muscarinic acetylcholine receptor knockout mice show deficits in behavioral flexibility, working memory, and hippocampal plasticity.</a> J Neurosci. 24, 10117-10127 (2004).</li><li>Morishima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+cocaine+responsiveness+and+impaired+motor+coordination+in+metabotropic+glutamate+receptor+subtype+2+knockout+mice.">Enhanced cocaine responsiveness and impaired motor coordination in metabotropic glutamate receptor subtype 2 knockout mice.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 102, 4170 (2005).</li><li>Miyamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tight+junctions+in+Schwann+cells+of+peripheral+myelinated+axons:+a+lesson+from+claudin-19-deficient+mice.">Tight junctions in Schwann cells of peripheral myelinated axons: a lesson from claudin-19-deficient mice.</a> J Cell Biol. 169, 527-538 (2005).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NFAT+dysregulation+by+increased+dosage+of+DSCR1+and+DYRK1A+on+chromosome+21.">NFAT dysregulation by increased dosage of DSCR1 and DYRK1A on chromosome 21.</a> Nature. 441, 595-600 (2006).</li><li>Hattori, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enriched+environments+influence+depression-related+behavior+in+adult+mice+and+the+survival+of+newborn+cells+in+their+hippocampi.">Enriched environments influence depression-related behavior in adult mice and the survival of newborn cells in their hippocampi.</a> Behav Brain Res. 180, 69-76 (2007).</li><li>Niemann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+ablation+of+NMDA+receptor+subunit+NR3B+in+mouse+reveals+motoneuronal+and+non-motoneuronal+phenotypes.">Genetic ablation of NMDA receptor subunit NR3B in mouse reveals motoneuronal and non-motoneuronal phenotypes.</a> Europ J Neurosci. 26, 1407-1420 (2007).</li><li>Sano, H., Nagai, Y., Miyakawa, T., Shigemoto, R., Yokoi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+social+interaction+in+mice+deficient+of+the+striatal+medium+spiny+neuron-specific+phosphodiesterase+10A2.">Increased social interaction in mice deficient of the striatal medium spiny neuron-specific phosphodiesterase 10A2.</a> J Neurochem. 105, 546-556 (2008).</li><li>Horii, Y., Yamasaki, N., Miyakawa, T., Shiosaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+anxiety-like+behavior+in+neuropsin+(kallikrein-related+peptidase+8)+gene-deficient+mice.">Increased anxiety-like behavior in neuropsin (kallikrein-related peptidase 8) gene-deficient mice.</a> Behav Neurosci. 122, 498-504 (2008).</li><li>Fukuda, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+protocadherin-&#945;,+A+isoforms+in+mice+changes+contextual+fear+conditioning+and+spatial+working+memory.">Down-regulation of protocadherin-&#945;, A isoforms in mice changes contextual fear conditioning and spatial working memory.</a> Eur J Neurosci. , .</li><li>Ikeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+YWHAE,+a+gene+encoding+14-3-3epsilon,+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia.">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Behav Neurosci. , .</li><li>Korte, S. M., De Boer, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+animal+model+of+state+anxiety:+fear-potentiated+behaviour+in+the+elevated+plus-maze.">A robust animal model of state anxiety: fear-potentiated behaviour in the elevated plus-maze.</a> Eur J Phamacol. 463, 163-175 (2003).</li><li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety.">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54, 21-30 (1996).</li><li>Holmes, A., Parmigiani, S., Ferrari, P. F., Palanza, P., Rodgers, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+profile+of+wild+mice+in+the+elevated+plus-maze+test+for+anxiety.">Behavioral profile of wild mice in the elevated plus-maze test for anxiety.</a> Physiol Behav. 71, 509-516 (2000).</li><li>Tsujimura, A., Matsuki, M., Takao, K., Yamanishi, K., Miyakawa, T., Hashimoto-Gotoh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+lacking+the+kf-1+gene+exhibit+increased+anxiety-+but+not+despair-like+behavior.">Mice lacking the kf-1 gene exhibit increased anxiety- but not despair-like behavior.</a> Front. Behav. Neurosci. 10, (2008).</li><li>Nakajima, R., Takao, K., SM, H. u. a. n. g., Takano, J., Iwata, N., Miyakawa, T., Saido, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+Behavioral+Phenotyping+of+Calpastatin-Knockout+Mice.">Comprehensive Behavioral Phenotyping of Calpastatin-Knockout Mice.</a> Molecular Brain. , .</li><li>Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+calcineurin+knockout+mice+exhibit+multiple+abnormal+behaviors+related+to+schizophrenia.">Conditional calcineurin knockout mice exhibit multiple abnormal behaviors related to schizophrenia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 8987-8992 (2003).</li><li>Yamasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factor+analyses+of+large-scale+data+justify+the+behavioral+test+battery+strategy+to+reveal+the+functional+significances+of+the+genes+expressed+in+the+brain.">Factor analyses of large-scale data justify the behavioral test battery strategy to reveal the functional significances of the genes expressed in the brain.</a> , (1985).</li><li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Scienc. 284, 1670-1672 (1999).</li></ol>

כל ההליכים אושרו על ידי שימוש בבעלי חיים ועדת Care מאוניברסיטת קיוטו.

למרות גנום העכבר כבר רצף, פונקציות של מרבית הגנים אינם ידועים. בטכניקות הנדסה גנטית לאפשר מחיקה או מניפולציות אחרות של גן מסוים בעכברים (אוסטין et al, 2004;.. Aiba et al, 2007). השפעתו של גן מסוים על התנהגות ספציפית אז יכול להיות נקבע על ידי ביצוע ניתוח התנהגותי של עכברים שעברו מוטציה (טאקאו ו Miyakawa, 2006b;. טאקאו et al, 2007). המבחן גבוהות מבוך פלוס הוא אחד המבחנים הפופולריים ביותר של כל הדגמים הזמינים כיום חיה של חרדה (רוג&#39;רס Dalvi, 1997; קרולי, 2007). בדיקה זו של חרדה, כמו התנהגות שימש במשך ההקרנה phenotyping מהונדס ו נוקאאוט בעכברים (קרולי, 1999) ועל גילוי סמים (הוג et al 1996;. קרולי, 2007). המבחן גבוהות מבוך פלוס יש תוקף ניבוי חזק לסינון תרופות לטיפול בחרדות (רוג&#39;רס Dalvi, 1997; Mechiel Korte דה בואר, 2003; קרולי, 2007); תרופות לטיפול בחרדות במיוחד להגדיל, ותרופות anxiogenic במיוחד להקטין את מספר הכניסות בזרועות פתוחות את הזמן שם. ציון ערכי מוחלט שהמרחק הכולל נחשבים מדד שימושי הפעילות הכללית. סה&quot;כ ניקוד ערכים גם אינדקס של חרדה, אחוזי הכניסות הזמן המושקע בכל זרוע מהווים מדד של חרדה ראשונית (רוג&#39;רס Dalvi, 1997, Mechiel Korte דה בואר, 2003). זרועות פתוחים וסגורים נחשבים לעורר את הכונן גישוש אותו, ולכן הימנעות נשק הפתוח נחשב תוצאה של אינדוקציה של רמות גבוהות יותר של פחד (רוג&#39;רס Dalvi, 1997). הוא חשב כי סלידה של עכברים לחקור את בזרועות פתוחות המבוך נגרמת על ידי פחד ממקומות פתוחים גבוהות. בשנת 1984, דיווחו הנדלי ו Mithani על עבודה ראשונית עם המבחן מבוך גבוהות (פלוס) X שתוארו לעיל. מנגנון הבדיקה המקורית הועלתה 70 ס&quot;מ מעל הרצפה, כלל שני סגור בשתי זרועות פתוחות, שכל אחד מהם נמדד 45 ס&quot;מ על 10 ס&quot;מ רוחב. בשנת הלימודים הראשונה שלהם, הם דיווחו על יחס פתוח / סה&quot;כ כניסות הזרוע (ו Mithani הנדלי, 1984). כתוצאה מכך, פותחו מדדים אחרים שכללו את מספר הערכים לזרועות סגור לפתוח את משך הזמן בזרועות סגור פתוח חולדות (Pellow et al, 1985; Pellow ואת קובץ, 1986) ועכברים (ליסטר, 1987) . שינויים מבחן מבוך גבוהות בתוספת כלל התארכות של שני בזרועות פתוחות (50 x 10 ס&quot;מ) נשק סגור (50 x 10 x 40 ס&quot;מ) עם קירות גבוהים סביב גג פתוח על הזרועות סגור, המבוך כולו היה גבוה עד לגובה של 50 ס&quot;מ (Pellow et al, 1985; Pellow ואת קובץ, 1986). נכון להיום, במעבדה שלנו, לבדוק את מוגבה בתוספת מנגנון מבוך מוגדר בצורת +, עם שתי זרועות פתוחות (25 x 5 ס&quot;מ, עם מעט מאוד, 0.5 ס&quot;מ, קיר) זה מול זה ו בניצב לשני הזרועות סגורות (25 x 5 x 16 ס&quot;מ), והוא העלה 50 ס&quot;מ מעל הרצפה (Miyakawa et al, 1996; Manabe et al, 2000; Miyakawa et al, 2001; סיגר et al, 2004; Morishima et al, 2005; מיאמוטו et al, 2005; חץ et al, 2006; האטורי et al, 2007; נימן et al, 2007; סנו et al, 2008; Horii et al, 2008; פוקודה et al, 2008; איקדה ואח&#39;; 2008). העכבר ממוקם במרכז + (5 ס&quot;מ X 5 ס&quot;מ), והוא רשאי לחקור את מבוך בחופשיות. למרות 5 דקות הקלטה נפוצה, התנהגות נרשם דקות 10 בפרוטוקול שלנו להגדיל את ההזדמנות לזהות את הפנוטיפ. הנשק גבוהות פתוחים וסגורים לגרום סכסוך חקירה (Mechiel Korte דה בואר, 2003; קרולי, 2007). הצעדים של מבחן מבוך גבוהות בתוספת נרשמות על ידי משקיף במהלך הניסוי. במעבדה שלנו, המבחן הוא הקליט עם מצלמת וידאו המחוברת למחשב את נתוני התנהגות (תמונה EP) נרכשים ונותחו באמצעות תוכנת ה-EP תמונה. מספר הרשומות על גבי בזרועות פתוחות לעומת מספר הערכים זרוע הכולל, ואת משך הזמן על הידיים בזרועות פתוחות לעומת סגורות, לספק מדדים של התנהגות, כמו חרדה. החוקרים העריכו יותר מ -90 זנים של עכברים מהונדסים גנטית מוטציה באמצעות פרוטוקול שמוצג בסרט יש קבוצה גדולה של נתונים גולמיים עבור יותר מ 5000 עכברים (כולל wild-type ועכברים שעברו מוטציה). בשנת סוללה הבדיקה שלנו, wild-type להמלטה משמשים בדרך כלל כביקורת. כמו זן רקע, עכברים C57BL/6J נמצאים בשימוש נרחב. אספנו את הנתונים של עכברים C57BL/6J במבחני התנהגות. הערכים שהתקבלו בעכברים C57BL/6J במבחן מבוך פלוס גבוהות שלנו הם כדלקמן (n = 914; מתכוון SEM), המרחק הכולל נסע: 1547.55 14.27 ס&quot;מ, משך הזמן המושקע: 56.49 2.42 s (בזרועות פתוחות), 384.02 3.13 s (נשק סגור), 161.90 2.17 s (מרכז מבוך); היחס בין משך הזמן בזרועות פתוחות: 9.19 0.36%, היחס בין משך הזמן בזרועות סגורות: 63.82 0.52%, מספר כניסות: 7.64 0.21 (בזרועות פתוחות), 24.32 0.28 (נשק סגור); פתוח% ערכים זרוע: 21.9 0.05,% סגור נשק ערכים: 78.1 0.05. עכברים C57BL/6J לבלות פחות זמן בזרועות פתוחות מאשר בזרועות סגורות (p &lt;0.0001, N = 914, לזווג-t test). זה מעיד כי עכברים C57BL/6J נוטים להימנע בזרועות פתוחות, וכי משך הזמן בזרועות פתוחות הוא מדד תקף של התנהגות, כמו חרדה. בנוסף, בסדר גודל של ניסויים היא counterbalanced ברחבי גנוטיפים, משום שמספר המשפט משפיע על משך הזמן בזרועות פתוחות את פלטפורמת מרכז. כלומר, כל עלייה במדדי במהלך עכברים 3 ו - 4 לעומת 1 עכברים (p = 0.0089, n = 476) (נתונים לא פורסם). עם פרוטוקול שלנו, ניתוח של יותר מ 1661 בעכברים הראו כי בסדר רציף של עכברים שנבדקו בכלוב לא השפיעו באופן משמעותי על הזרוע לפתוח להישאר זמן (נתונים שלא פורסמו). כלומר, הופעות של עכברים ראשונים שננקטו מהכלוב לא שונה באופן משמעותי מאלה של השני, השלישי או עכברים האחרון. למרות הבדיקה גבוהות מבוך פלוס המבחן אור / חושך המעבר הן בשימוש להערכת חרדה כמו התנהגות, התוצאות הן לא תמיד עקבי ביניהם (הולמס et al, 2000; Tujimura et al, 2008; Nakajima et al, in press ) לדוגמה, forebrain ספציפי calcineurin-נוקאאוט בעכברים להשקיע סכום קטן של זמן בחדר אור במבחן אור / חושך המעבר, אך כמות מוגברת של זמן בזרועות פתוחות במבחן מבוך גבוהות החיבור (Miyakawa et al. , 2003). ניתוח פקטור של הסוללה מבחן ההתנהגות שלנו עולה כי הבדיקה גבוהות מבוך פלוס המבחן אור / חושך מעבר להעריך אספקטים שונים של התנהגות, כמו חרדה, כגון חרדה בהיר מרחב במבחן אור / חושך המעבר פתוח חלל חרדה כמו התנהגות במבחן שדה פתוח (טאקאו ו Miyakawa, 2006b; Yamasaki et al, 2006). לפיכך, הן במבחן אור / חושך המעבר במבחן גבוהות מבוך פלוס כלולים סוללה מבחן ההתנהגות שלנו. קראב ועמיתיו דיווחו כי משתנים מבוקרת ניסויים ואפיון מוטנטים עשוי להניב תוצאות ספציפיים מעבדה מסוים (קראב et al., 1999). ההבדלים הקיימים בין פרוצדורליים מעבדות להקשות לשכפל או להשוות את התוצאות ביניהן. הקמת תיעוד חזותי של פרוטוקול יקדם הבנה טובה יותר של הפרוצדורות, המאפשר סטנדרטיזציה של פרוטוקולים להשתמש בה בכל מעבדות להשוואות של פנוטיפים התנהגותיים של זנים שונים של עכברים מוטנטים הוערכה באמצעות בדיקות אלה. אנחנו קודם לכן פרסם פרוטוקול הסרט הבדיקה אור / חושך המעבר (טאקאו ו Miyakawa, 2006a). כמו כן, סרטים של פרוטוקולים אחרים, כגון למבחן שדה פתוח, porsolt אילצו מבחן לשחות, מיזוג פחד בדיקות שאנו משתמשים בסוללה מבחן ההתנהגות שלנו כיום נעשה עבור פרסום מאמרים כמו עתיד וידאו.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Elevated plus maze</td>
<td>Tool</td>
<td>O&#x2019;hara & Co.</td>
<td>(none)</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

elevated plus maze for mice

למרות גנום העכבר עכשיו רצף לחלוטין, פונקציות של רוב הגנים מתבטאת במוח אינם ידועים. השפעתו של גן מסוים על התנהגות מסוימת יכול להיקבע על ידי ניתוח התנהגות של עכברים שעברו מוטציה. אם גן היעד מתבטאת במוח, פנוטיפ התנהגותי של עכברים שעברו מוטציה יכולה להבהיר את המנגנון הגנטי של התנהגות נורמלית. המבחן גבוהות מבוך פלוס הוא אחד המבחנים הנפוצים ביותר למדידת חרדה כמו התנהגות. הבדיקה מבוססת על שנאת הטבעי של העכברים עבור שטחים פתוחים גבוהות, כמו גם על ההתנהגות הטבעית שלהם גישוש ספונטנית בסביבות רומן. מנגנון מורכב בזרועות פתוחות וידיים סגור, חצה באמצע בניצב זה לזה, ואזור המרכז. עכברים מקבלים גישה לכל הזרועות ואת רשאים לנוע בחופשיות ביניהן. מספר כניסות לזרועות לפתוח את משך הזמן בזרועות פתוחות משמשים מדדי החרדה הנגרמת שטח פתוח בעכברים. למרבה הצער, את ההבדלים הקיימים בין פרוצדורליים מעבדות להקשות כפולות להשוות תוצאות בין מעבדות. כאן, אנו מציגים סרט מפורט הוכחת פרוטוקול שלנו למבחן מבוך גבוהות בתוספת. במעבדה שלנו, יש לנו להעריך יותר מ -90 זנים של עכברים מוטנטים באמצעות פרוטוקול שמוצג בסרט. נתונים אלה יחשף כחלק מסד נתונים ציבורי שעכשיו אנחנו בונים. ויזואליזציה של פרוטוקול יקדם הבנה טובה יותר של הפרטים של הליך הניסוי כולו, המאפשר סטנדרטיזציה של הפרוטוקולים המשמשים מעבדות השוואות שונות של פנוטיפים התנהגותיים של זנים שונים של עכברים מוטנטים הוערכה באמצעות בדיקה זו.

Watch this Scientific Journal Video about Elevated Plus Maze for Mice at JoVE.com

Elevated Plus Maze for Mice

המבחן גבוהות מבוך פלוס הוא אחד המבחנים הנפוצים ביותר למדידת חרדה כמו התנהגות בעכברים. כאן, אנו מציגים סרט המראה את הליכי מפורט לביצוע הבדיקה.

מבוך פלוס גבוהות עבור עכברים

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given ...

Research

JoVE Journal

Biology

89.3K Views.  Graduate School of Medicine, Kyoto University. המבחן גבוהות מבוך פלוס הוא אחד המבחנים הנפוצים ביותר למדידת חרדה כמו התנהגות בעכברים. כאן, אנו מציגים סרט המראה את הליכי מפורט לביצוע הבדיקה.

Video: Elevated Plus Maze for Mice

Light/dark Transition Test for Mice

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, however, can be used to delete or manipulate a specific gene in mice. The influence of a given gene on a specific behavior can then be determined by conducting behavioral analyses of the mutant mice. As a test for behavioral phenotyping of mutant mice, the light/dark transition test is one of the most widely used tests to measure anxiety-like behavior in mice. The test is based on the natural aversion of mice to brightly illuminated areas and on their spontaneous exploratory behavior in novel environments. The test is sensitive to anxiolytic drug treatment. The apparatus consists of a dark chamber and a brightly illuminated chamber. Mice are allowed to move freely between the two chambers. The number of entries into the bright chamber and the duration of time spent there are indices of bright-space anxiety in mice. To obtain phenotyping results of a strain of mutant mice that can be readily reproduced and compared with those of other mutants, the behavioral test methods should be as identical as possible between laboratories. The procedural differences that exist between laboratories, however, make it difficult to replicate or compare the results among laboratories. Here, we present our protocol for the light/dark transition test as a movie so that the details of the protocol can be demonstrated. In our laboratory, we have assessed more than 60 strains of mutant mice using the protocol shown in the movie. Those data will be disclosed as a part of a public database that we are now constructing.

Visualization of the protocol will facilitate understanding of the details of the entire experimental procedure, allowing for standardization of the protocols used across laboratories and comparisons of the behavioral phenotypes of various strains of mutant mice assessed using this test.

The light/dark transition test is one of the most widely used tests to measure anxiety-like behavior in mice. Here, we present a movie that shows detailed procedures on how we conduct the test.

אור / חושך מעבר מבחן עכברים

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Morris Water Maze Experiment

The Morris water maze is widely used to study spatial memory and learning. Animals are placed in a pool of water that is colored opaque with powdered non-fat milk or non-toxic tempera paint, where they must swim to a hidden escape platform. Because they are in opaque water, the animals cannot see the platform, and cannot rely on scent to find the escape route. Instead, they must rely on external/extra-maze cues. As the animals become more familiar with the task, they are able to find the platform more quickly. Developed by Richard G. Morris in 1984, this paradigm has become one of the "gold standards" of behavioral neuroscience.

The Morris water maze is a well-accepted tool used to document the involvement of the hippocampus in a behavioral task.

מבוך מוריס מים הניסוי

The Morris water maze is widely used to study spatial memory and learning. Animals are placed in a pool of water that is colored opaque with powdered ...

Polymerase Chain Reaction: Basic Protocol Plus Troubleshooting and Optimization Strategies

In the biological sciences there have been technological advances that catapult the discipline into golden ages of discovery. For example, the field of microbiology was transformed with the advent of Anton van Leeuwenhoek&#39;s microscope, which allowed scientists to visualize prokaryotes for the first time. The development of the polymerase chain reaction (PCR) is one of those innovations that changed the course of molecular science with its impact spanning countless subdisciplines in biology. The theoretical process was outlined by Keppe and coworkers in 1971; however, it was another 14 years until the complete PCR procedure was described and experimentally applied by Kary Mullis while at Cetus Corporation in 1985. Automation and refinement of this technique progressed with the introduction of a thermal stable DNA polymerase from the bacterium Thermus aquaticus, consequently the name Taq DNA polymerase.
PCR is a powerful amplification technique that can generate an ample supply of a specific segment of DNA (i.e., an amplicon) from only a small amount of starting material (i.e., DNA template or target sequence). While straightforward and generally trouble-free, there are pitfalls that complicate the reaction producing spurious results. When PCR fails it can lead to many non-specific DNA products of varying sizes that appear as a ladder or smear of bands on agarose gels. Sometimes no products form at all. Another potential problem occurs when mutations are unintentionally introduced in the amplicons, resulting in a heterogeneous population of PCR products. PCR failures can become frustrating unless patience and careful troubleshooting are employed to sort out and solve the problem(s). This protocol outlines the basic principles of PCR, provides a methodology that will result in amplification of most target sequences, and presents strategies for optimizing a reaction. By following this PCR guide, students should be able to: 
 
&#9679; Set up reactions and thermal cycling conditions for a conventional PCR experiment 
&#9679; Understand the function of various reaction components and their overall effect on a PCR experiment 
&#9679; Design and optimize a PCR experiment for any DNA template 
&#9679; Troubleshoot failed PCR experiments

PCR has emerged as a common technique in many molecular biology laboratories. Provided here is a quick guide to several conventional PCR protocols. Because each reaction is a unique experiment, optimal conditions required to generate a product vary. Understanding the variables in a reaction will greatly enhance troubleshooting efficiency, thereby increasing the chance to obtain the desired result.

תגובת שרשרת פולימרז: פרוטוקול בסיסי פלוס אסטרטגיות לפתרון בעיות ואופטימיזציה

In the biological sciences there have been technological advances that catapult the discipline into golden ages of discovery. For example, the field of ...

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Milk Collection Methods for Mice and Reeves&#039; Muntjac Deer

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס &#39;Muntjac צביים

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

Intravenous Injections in Neonatal Mice

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are technically feasible and routine. However, some mouse models can have early onset of disease with a rapid progression that makes administration of potential therapies difficult. The temporal (or facial) vein is just anterior to the ear bud in mice and is clearly visible for the first two days after birth on either side of the head using a dissecting microscope. During this window, the temporal vein can be injected with volumes up to 50 &#956;l. The injection is safe and well tolerated by both the pups and the dams. A typical injection procedure is completed within 1-2 min, after which the pup is returned to the home cage. By the third postnatal day the vein is difficult to visualize and the injection procedure becomes technically unreliable. This technique has been used for delivery of adeno-associated virus (AAV) vectors, which in turn can provide almost body-wide, stable transgene expression for the life of the animal depending on the viral serotype chosen.

Animal models of pediatric disease can experience early onset and aggressive disease progression. Clinically relevant therapy delivery to young mouse models can be technically difficult. This protocol describes a non-invasive intravenous injection method for newborn mice within the first two postnatal days of life.

זריקות תוך ורידים בעכברים בילוד

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are ...

Subcloning Plus Insertion (SPI) - A Novel Recombineering Method for the Rapid Construction of Gene Targeting Vectors

Gene targeting refers to the precise modification of a genetic locus using homologous recombination. The generation of novel cell lines and transgenic mouse models using this method necessitates the construction of a &#8216;targeting&#8217; vector, which contains homologous DNA sequences to the target gene, and has for many years been a limiting step in the process. Vector construction can be performed in vivo in Escherichia coli cells using homologous recombination mediated by phage recombinases using a technique termed recombineering. Recombineering is the preferred technique to subclone the long homology sequences (>4kb) and various targeting elements including selection markers that are required to mediate efficient allelic exchange between a targeting vector and its cognate genomic locus. Typical recombineering protocols follow an iterative scheme of step-wise integration of the targeting elements and require intermediate purification and transformation steps. Here, we present a novel recombineering methodology of vector assembly using a multiplex approach. Plasmid gap repair is performed by the simultaneous capture of genomic sequence from mouse Bacterial Artificial Chromosome libraries and the insertion of dual bacterial and mammalian selection markers. This subcloning plus insertion method is highly efficient and yields a majority of correct recombinants. We present data for the construction of different types of conditional gene knockout, or knock-in, vectors and BAC reporter vectors that have been constructed using this method. SPI vector construction greatly extends the repertoire of the recombineering toolbox and provides a simple, rapid and cost-effective method of constructing these highly complex vectors.

Subcloning Plus Insertion SPI - A Novel Recombineering Method for the Rapid Construction of Gene Targeting Vectors

Gene targeting methodologies can be used to generate transgenic mice with knockout, knock-in and tagged alleles. Here, we describe an improved method of recombineering in E. coli, that we term &#8216;subcloning plus insertion&#8217;, which can be used to generate custom gene targeting vectors rapidly.

Subcloning Plus ההכנסה (SPI) - Recombineering שיטה חדשה לבנייה המהירה של וקטורי גן המיקוד

Gene targeting refers to the precise modification of a genetic locus using homologous recombination. The generation of novel cell lines and transgenic ...

A Strategy to Validate the Role of Callose-mediated Plasmodesmal Gating in the Tropic Response

The plant hormone auxin plays an important role in many growth and developmental processes, including tropic responses to light and gravity. The establishment of an auxin gradient is a key event leading to phototropism and gravitropism. Previously, polar auxin transport (PAT) was shown to establish an auxin gradient in different cellular domains of plants. However, Han et al. recently demonstrated that for proper auxin gradient formation, plasmodesmal callose-mediated symplasmic connectivity between the adjacent cells is also a critical factor. In this manuscript, the strategy to elucidate the role of particular genes, which can affect phototropism and gravitropism by altering the symplasmic connectivity through modulating plasmodesmal callose synthesis, is discussed. The first step is to screen aberrant tropic responses from 3-day-old etiolated seedlings of mutants or over-expression lines of a gene along with the wild type. This preliminary screening can lead to the identification of a range of genes functioning in PAT or controlling symplasmic connectivity. The second screening involves the sorting of candidates that show altered tropic responses by affecting symplasmic connectivity. To address such candidates, the movement of a symplasmic tracer and the deposition of plasmodesmal callose were examined. This strategy would be useful to explore new candidate genes that can regulate symplasmic connectivity directly or indirectly during tropic responses and other developmental processes.

This article describes the methods for screening the genes controlling plasmodesmal permeability and hence auxin gradient during tropic response. This includes the measurement of the degree of tropic response in hypocotyl of Arabidopsis thaliana and checking plasmodesmal permeability by 8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid (HPTS) loading and finally callose level assessment.

אסטרטגיה כדי לאמת את התפקיד של Gating Plasmodesmal בתיווך Callose במענה חוג

The plant hormone auxin plays an important role in many growth and developmental processes, including tropic responses to light and gravity. The ...

Nasal Potential Difference to Quantify Trans-epithelial Ion Transport in Mice

The nasal potential difference test has been used for almost three decades to assist in the diagnosis of cystic fibrosis (CF). It has proven to be helpful in cases of attenuated, oligo- or mono-symptomatic forms of CF usually diagnosed later in life, and of CF-related disorders such as congenital bilateral absence of vas deferens, idiopathic chronic pancreatitis, allergic bronchopulmonary aspergillosis, and bronchiectasis. In both clinical and preclinical settings, the test has been used as a biomarker to quantify responses to targeted therapeutic strategies for CF. Adapting the test to a mouse is challenging and can entail an associated mortality. This paper describes the adequate depth of anesthesia required to maintain a nasal catheter in situ for continuous perfusion. It lists measures to avoid broncho-aspiration of solutions perfused in the nose. It also describes the animal care at the end of the test, including administration of a combination of antidotes of the anesthetic drugs, leading to rapidly reversing the anesthesia with full recovery of the animals. Representative data obtained from a CF and a wild-type mouse show that the test discriminates between CF and non-CF. Altogether, the protocol described here allows reliable measurements of the functional status of trans-epithelial chloride and sodium transporters in spontaneously breathing mice, as well as multiple tests in the same animal while reducing test-related mortality.

Here, we present a protocol to measure nasal potential difference in mice. The test quantifies the function of transmembrane ion transporters such as the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator and the epithelial sodium channel. It is valuable to evaluate the efficacy of novel therapies for cystic fibrosis.

האף הפרש הפוטנציאלים לכמת תחבורה טרנס-אפיתל יון בעכברים

The nasal potential difference test has been used for almost three decades to assist in the diagnosis of cystic fibrosis (CF). It has proven to be helpful ...

An Antegrade Perfusion Method for Cardiomyocyte Isolation from Mice

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating cardiomyocytes from rabbits, guinea pigs or rats has been performed via retrograde perfusion of the heart with enzymes using a Langendorff apparatus. However, a high degree of skill is required when this method is used with a small mouse heart. An antegrade perfusion method that does not use a Langendorff apparatus was recently reported for the isolation of mouse cardiomyocytes. We herein report a complete protocol for the improved antegrade perfusion of the excised heart to isolate individual heart cells from adult mice (8 - 108 weeks old). Antegrade perfusion is performed by injecting perfusate near the apex of the left ventricle of the excised heart, the aorta of which was clamped, using an infusion pump. All procedures are carried out on a pre-warmed heater mat under a microscope, which allows for the injection and perfusion processes to be monitored. The results suggest that ventricular and atrial myocytes, and fibroblasts can be well isolated from a single adult mouse simultaneously.

We developed a simple method for isolating high quality individual mouse heart cells by the antegrade perfusion technique. This method is Langendorff-free and useful for isolating ventricular and atrial myocytes or interstitial cells, such as cardiac fibroblasts or progenitors.

שיטת זלוף Antegrade לבידוד קרדיומיוציטים מעכברים

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating ...

Terminal H-reflex Measurements in Mice

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits after injuries such as spinal cord damage or stroke. An increase of the H-reflex response, together with symptoms like non-voluntary muscle contractions, pathologically augmented stretch reflex, and hypertonia in the corresponding muscle, is an indicator of post-stroke spasticity (PSS).
In contrast to rather nerve-unspecific transcutaneous measurements, here, we present a protocol to quantify the H-reflex directly at the ulnar and median nerves of the forepaw, which is applicable, with minor modifications, to the tibial and sciatic nerve of the hindpaw. Based on the direct stimulation and the adaptation to different nerves, the method represents a reliable and versatile tool to validate electrophysiological changes in spasticity-related disease models.

The clinical evaluation of spasticity based on the Hoffmann reflex (H-reflex) and using electrical stimulation of peripheral nerves is an established method. Here, we provide a protocol for a terminal and direct nerve stimulation for H-reflex quantification in the mouse forepaw.

מדידות רפלקס H טרמינלי בעכברים

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits ...